202593. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új citotoxinok és ilyeneket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
13 HU 221 593 B 14 ii) Az 1. példa szerinti PBE 94 oszlopról lejövő folyadék y-interferon aktivitását immunoradiometriával végeztük (Sucrosep Kit, Boots-Celltech Diagnostics Ltd., Anglia). A mért aktivitás 1,5 egység/ml értékű volt. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás új citotoxin (bázikus limfotoxin) előállítására, amelynek látszólagos molekulatömege gélszűréssel meghatározva 47 ± 5kDa, látszólagos izoelektromos pontja legalább 7,7 és aminosav összetétele a következő: Aminosav Maradékok Aminosav Maradékok száma száma Asx 36,0 ±4,3 Pro 24,5 ± 2,9 Glx 46,7 ±5,6 Tyr 12,3 ± 1,5 Ser 41,0 ±4,9 Val 22,7 ± 2,7 Gly 38,4 ±4,6 Met 8,4 ± 1,0 His 13,6 ±1,6 Ile 19,6 ±2,4 Arg 19,6 ±2,4 Leu 43,1 ±5,2 Thr 21,4 ±2,6 Phe 23,8 ± 2,9 Alá 33,2 ±4,0 Lys 26,4 ± 3,2- ahol Asx jelentése Asp és/vagy Asn és Glx jelentése Glu és/vagy Gin -azzaljellemezve, hogy limfoblasztoid sejtvonalat táptalajon inkubálunk, a sejtvonalat indukálószerrel indukáljuk, majd a kapott citotoxint a táptalajtól elválasztjuk, és kívánt esetben tisztítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a citotoxin elválasztásánál a limfoblasztoid interferon eltávolítására anti-limfoblasztoid interferon antitest immunoafTinitásos oszlopot és a savas izoelektromos ponttal rendelkező citotoxinok eltávolítására kn matográfiás oszlopot alkalmazunk. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás. az: il j< I- lemezve, hogy a citotoxint nagyobb mint 90'/, tis/lasa gúra tisztítjuk. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a citotoxint nagyobb mint 95% tisztaságúra tisztítjuk. 5. Eljárás gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy hatóanyagként 1. igénypont szerint előállított citotoxint gyógyszerészetileg elfogadható inert hordozóanyaggal összekeverjük és adagolásra alkalmas gyógyszerkészítménnyé alakítjuk. 5 10 15 20 8
