202578. lajstromszámú szabadalom • Eljárás csontvelősejtek replikálására három dimenziós sejttenyésztő rendszerben, három dimenziós támasztó anyag a rendszerhez, és eljárás citotoxicitás vizsgálatára ezen rendszer segítségével
13 HU 202 578 B 14 tanak ki, eltávolítottuk, majd később felengedtetjük a hematopoietikus nyélsejtekkel való inokulálás előtt. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 22. Eljárás csontvelősejtek replikálására, azzal jellemezve, hogy (i) egy három dimenziós támasztóanyagot valamely tenyésztő tápközegben olyan fibroblasztokkal inokulálunk, amelyek kollagént és/vagy egyéb extracelluláris mátrix komponenseket választanak ki; (ii) a fibroblasztokat összefolyásig növesztjük; (iii) a beburkolt támasztóanyagot egy olyan csontvelőmintával inokuláljuk, amely tartalmaz mind sztrómális, mind hematopoietikus sejteket; (iv) a hematopoietikus csontvelősejt telepeket növesztjük, ahol ezek a telepek magukban foglalják az összes olyan hematopoietikus sejttípust, amelyeket eredetileg inokuláltunk. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 23. A 22. igénypont szerinti eljárás csontvelősejtek replikálására azzal jellemezve, hogy az (i) lépésben inokulált fibroblasztokként olyan fibroblasztok keverékeit alkalmazzuk, amelyek III, IV, illetve I kollagén típusokat választanak ki, és amelyek mintegy 6:3:1 arányban vannak jelen. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 24. Eljárás három dimenziós sejttenyésztő rendszer kialakítására, azzal jellemezve, hogy egy alkalmas tenyésztő tápközegbe helyezett három dimenziós támasztóanyagon legalább két rétegben sejteket növesztünk, ahol a sejtek egy része a három dimenziós támasztóanyaghoz kötődik. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 25. A 24. igénypont szerinti eljárá,s azzal jellemezve, hogy a támasztóanyagként hálót alkalmazunk. (Elsőbbsége: 1986.04. 18.) 26. A 25. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hálóként olyan nylonhálót alkalmazunk, amely 400 pm szitaterülettel és 100 pm rostátmérővel bír. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 27. A 24. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a három dimenziós támasztóanyagon csontvelő, bőr, vagy májsejteket növesztünk. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 28. A 27. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy támasztóanyagként nylonhálót alkalmazunk. (Elsőbbsége: 1986. 04.18.) 29. A 28. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan nylon hálót alkalmazunk, amely 400 pm2 szitaterülettel és 100 pm rostátmérővel bír. (Elsőbbsége: 1986. 04. 18.) 30. Eljárás három dimenziós csontvelősejt tenyésztő rendszer kialakítására, azzal jellemezve, hogy egy alkalmas tenyésztő tápközegbe helyezett három dimenziós támasztóanyagon összefolyásig növekedett csontvelő sztrómális sejtek hálózatán és hálózata körül hematopoietikus csontvelősejteket növesztünk. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 31. A 30. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy három dimenziós támasztóanyagként nylonhálót alkalmazunk. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 32. A 31. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyannyion hálót alkalmazunk, mely 400 pm2 szitaterülettel és 100 pm rostátmérővel bír. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 33. A 30. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan csontvelő sztrómális sejteket alkalmazunk, melyek fibroblasztokat, makrofágokat, retikuláris sejteket és adipocitákat foglalnak magukban. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 34. A 30. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan tenyésztő tápközeget alkalmazunk, mely magában foglal a máj vagy lép extramodulláris makrofágjaink (Kupffer-sejtek) tenyészközegéből izolált faktorokat. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 35. A 30. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan hematopoietikus csontvelősejt telepeket növesztünk, melyek eritroid, mieloid, limfoid és makrofág telepeket foglalnak magukban. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 36. A 35. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan csontvelősejt telepeket növesztünk melyek mcgakariocitás telepeket is foglalnak megukban. (Elsőbbsége: 1986.04. 18.) 37. Három dimenziós támasztó nyag sejttenyészethez, azzal jellemezve, hogy a támasztóanyagon - mely előnyösen háló formájú - a sejtek kötődése és egynél több rétegben való növekedése biztosított. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 38. A 37. igénypont szerinti három dimenziós támasztóanyag azzal jellemezve, hogy a támasztóanyag a nylon háló.. (Elsőbbsége: 1986.04. 18.) 39. A 38. igénypont szerinti három dimenziós támasztóanyag, azzal jellemezve, hogy a nylonháló 400 pm2 szitaterülettel és 100 pm rostátmérővel bír. (Elsőbbsége: 1986.04. 18.) 40. A 37. igénypont szerinti három dimenziós támasztóanyag azzal jellemezve, hogy támasztóanyag kollagénnel burkolt háló. (Elsőbbsége: 1986.04.18.) 41. Eljárás citotoxicitás vizsgálatára három dimenziós sejttenyésztő rendszer segítségével, azzal jellemezve, hogy (i) a vizsgálandó anyagot a 24. igénypont szerint kialakított három dimenziós, élő sejteket tartalmazó sejttenyésztő rendszerhez adjuk; (ii) az anyagot tartalmazó sejttenyésztő rendszert inkubáljuk; (iii) a sejtekben az anyag hatására bekövetkező citotoxikus változásokat mérjük. (Elsőbbsége: 1987.04.14.) 42. A 41. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a három dimenziós sejttenyésztő rendszerként csontvelősejt tenyésztő rendszert alkalmazunk. (Elsőbbsége: 1987.04.14.) 43. A 42. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan csontvelősejt tenyésztő rendszert alkalmazunk, amely hematopoietikus pluripotenciális, progenitor és prekurzor sejteket foglal magában. (Elsőbbsége: 1987.04. 14.) 44. A 41. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a három dimenziós támasztóanyagként olyan nylonhálót alkalmazunk, amely 400 pm2 szitaterülettel és 100 pm rostátmérővel bír. (Elsőbbsége: 1987.04.14.) 45. Eljárás abnormális emlős csontvelősejtek kimutatására, azzal jellemezve, hogy (i) egy emlőstől csontvelőmintát veszünk, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
