202549. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a 3'-azido-3'-dezoxi-timidin jód-125 izotóppal jelzett monojód-tirozin-metilészter származékainak előállítására
HU 202549B A találmány tárgya eljárás a 3’-azido-3’-c,ezoxitimidin (továbbiakban AZT) radioimmunológiai meghatározására alkalmas, új típusú, az (I általános képlet körébe tartozó, jód-125 izotóppá jelzett, nagy fajlagos aktivitású AZT-monojód-tirozin-metilészter származékok előállítására, aholX jelentése a (VI) vagy (VH) képlet szerinti csoport. Ismert, hogy a 3’-azido-3’-dezoxi-timidin (továbbiakban AZT; egyéb véd jegyzett neveken Zidovudine, Retrovir, BW A509U), a Borroughs Wellcome által kifejlesztett szer, mely az AIDS egy potenciális gyógyszere. Ismert az is, hogy az AZT vérkoncentrációját a lehető legegyszerűbb, ugyanakkor pontos módszerrel kell mérni. A jelenleg ismert eljárások hátrányai ismertek, így célul tűztük ki olyan AZT származékok előállítását,, amelyek jól mérhető izotópot, előnyösen jód-125 izotópot tartalmaznak. Ilyen típusú vegyületek az irodalomban eddig ismeretlenek. Az előállítandó származékokkal szemben alapvető követelményünk az volt, hogy a jód-125 izotóppal elérhető minél nagyobb fajlagos aktivitás (nagyobb mint 1000 ci/mmól) biztosítása mellett az AZT alapmolekulán csak olyan kémiai átalakításokat foganatosítsunk, amelyek eredményeként nyert származékok radioimmun meghatározásra alkalmasak maradnak. A találmány alapja az a felismerés, hogy az AZT alapmolekulából (I) általános képletű jód-125 izotóppal jelzett, nagy fajlagos aktivitású és várhatóan radioimmun meghatározásra alkalmas származékok kedvező feltételek között előállíthatok. Felismertük, hogyha a (IV) képletű AZT alapmolekula 5’-hidroxücsoportjához borostyánkősav oldalláncot kapcsolunk, vagy pedig ismert úton előzőleg (V) képletű 5’-oxo származékká alakítjuk, és ebből O- karboximetil-oximino származékot állítunk elő, akkor (IB) általános képletű, új típusú vegyületekhez jutunk, amelyek szabad karboxü csoportot tartalmaznak. Felismerésünk szerint ezek a vegyületek savamid kötésen keresztül kedvező körülmények között tirozin-metüészterrel reagáltatva olyan új típusú, (II) általános képletű—ahol X jelentése a (VI) vagy (VH)Ö képlet szerinti csoport — származékokat szolgáltatnak, amelyekből kedvező feltételek mellett új típusú, az (I) általános képlet körébe tartozó jód-125 izotóppal jelzett, nagy fajlagos aktivitású AZT származékok állíthatók elő. A találmány tárgya tehát eljárás az (I) általános képletű — amely képletben X jelentése a (VI) vagy (VE) képlet szerinti csoport — jód-125 izotóppal jelzett, nagy fajlagos aktivitású, új típusú 3’-azido- Sj-^ezoxitimidin-monojód-tirozin-metilészter ( I) származékok előállítására olyan módon, hogy (TV) képletű 3’-azido-3’-dezoxitimidint borostyánkősav-anhidriddel reagáltatunk, vagy (V) képletű 5’-oxo-3’-azido-3’-dezoxitimidint O-karboximetilhidroxüamin-hemihidrokloriddal reagáltatunk, és a kapott, (El) általános képlet körébe tartozó — amely képletben X jelentése a (VI) vagy (VE) képlet szerinti csoport—reakciótermékeket tirozin-metilészterrel reagáltatjuk, majd a kapott (E) általános képlet körébe tartozó — amely képletben X jelentése a (VI) vagy (VE) képlet szerinti csoport—reak1 ciótermékeket nagy fajlagos aktivitású nátriumí125I)jodiddal reagáltatjuk. A találmány szerint az (I) általános képletű jód- 125 izotóppal jelzett AZT származékokat úgy állítjuk elő, hogy nagy mólfeleslegben lévő (E) általános képletű — ahol X jelentése a (VI) vagy (VE) képlet szerinti csoport — AZT-tirozin-metilészter származékokat nagy fajlagos aktivitású, előnyösen hordozómentes jód-125-tel jelzett nátrium-jodiddal reagáltatunk alkalmas oxidálószer, előnyösen paratoluol-szulfoklóramin-nátriumsó (klóramin-T) jelenlétében vizes puffer-oldatban rövid reakcióidővel. Az (I) célanyagok előállításához alapanyagul szolgáló (n) általános képletű köztitermékeket olymódon nyerjük, hogy (IE) általános képletű vegyületeket — ahol X jelentése a (VI) vagy (VE) képlet szerinti csoport — L-tirozin-metilészterrel (továbbiakban TME) reagáltatjuk karbodiimid vízelvonó reagens, előnyösen l-etil-3(3’-dimetil-amino)-propil-karbodiimid-hidroklorid (továbbiakban EDCIHC1) jelenlétében. A (El) képletű köztitermékeket — ahol X jelentése a (VI) vagy (VE) képlet szerinti csoport — piridines közegben állítjuk elő két úton; vagy az A folyamatábra szerint közvetlenül a (TV) képletű AZT- ből úgy, hogy AZT-t alkalmas szukcinilező reagenssel, előnyösen borostyánkősav-anhidriddel reagáltatunk, vagy a B folyamatábra szerint úgy, hogy az (V) képletű S’-oxo-AZT-t O-karboximetil-hidroxilamin-hemihidrokloriddal (továbbiakban OCMHA-HC1) reagáltatjuk. A (IE) általános képletű köztitermékek szintézisében oldószerként célszerűen piridint alkalmazunk. A (IV), illetve (V) kiindulási anyagok 1 móljára számított 20-500, előnyösen 50-200 mólarányban. A (IEa) képletű köztitermék szintézisében a borostyánkősav-anhidridet a (IV) kiindulási anyag 1 móljára számított 1-5, előnyösen 2,5 mólarányban alkalmazzuk, és a reakció hőmérséklet 10-60 °C, előnyösen 20 °C körüli, a reakcióidő előnyösen 20-24 óra. A (IEb) képletű köztitermék szintézisében az OCMHA-HC1 reagenst az (V) kiindulási anyagra számítva 0,5-3, előnyösen kb. 0,65 mólarányban (1,3 ekvivalens) alkalmazzuk, a reakció-hőmérséklet 10-60 °C, előnyösen 40 °C körüli, és a reakcióidő előnyösen 2-3 óra. A reakcióhoz szükséges 5’-oxo-AZT-t a J. Labelled Comp. Radiopharm. 25, 277 (1988) szakirodalmi forrás szerint frissen készítjük AZT-ből dimetü-formamid oldószerben, diciklohexil-karbondiimid és piridinium-trifluoracetát reagensekkel. A reakció lezajlása után a reakcióelegyből az oldószert ledesztilláljuk, célszerűen vákuumban, szobahőmérsékleten 0,0013 bar nyomáson, cseppfolyós nitrogénnel hűtött lombikba. A (IE) általános képletű köztitermékeket az el nem reagált kiindulási anyagoktól és lehetséges melléktermékektől vékonyréteg-kromatográfiás módszerrel választjuk el szilücagél rétegen, amelyre a bepárolt reakcióelegyet 16-18 cm hosszon, 2- 3 mm széles sávban visszük fel. Akromatogram kifejlesztésére a (Ela) vegyület esetében előnyösen 2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
