202548. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4,-demetil-epipodofillotoxin glükozid 4,acil-származékok és e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készitmények előállitására.
HU202548B gítjük és további 6 órán át keverjük. Az elegyet ezután 25 ml 7-es pH-jú foszfát puffer, 150 ml víz és 350 ml etil-acetát között megosztjuk. A szerves réteget 100 ml vízzel, majd 150 ml telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk és nátrium-magnéziumszulfát keverékén szárítjuk. Az oldatot bepároljuk, majd kovasavgélen gyorsan kromatografáljuk, 0-tól 2%-ig változó mennyiségű metanolt tartalmazó metilén-klorid gradiens eleggyel eluálva. így 97,2 mg (6%) tiszta, cím szerinti vegyületet kapunk sárga szilárd anyag formájában. IR (KBr): 1774 (lakton), 1733 (karbonát, 1678 (kínon), 1602,1506,1486,1464,1454,1435,1422, 1386, 1327, 1294, 1237, 1160, 1131, 1096, 1078, 933 cm'1. 1 H-NMR (360 MHz, CDCI3): delta 8,33-8,28 (m, 4H); 7,84-7,78 (m, 3H); 6,81 (s, 1H); 6,53 (s, 1H); 6,28 (s, 2H); 5,97 (dd, 2H); 5,40 (s, 2H); 4,89 (d, 1H, J-3,5Hz); 4,73 (q, 1H, J-4,9Hz); 4,66-4,62 (m, 2H); 4,41 (dd, 1H);4,22(dd, lH);4,15(dd, 1H,J-I0,4és 4,2Hz);3,71 (m, 1H); 3,69 (s, 6H); 3,56 (m, 1H);3,41 (m, 1H); 3,34-3,31 (m, 2H); 3,26 (dd, 1H,J-I4,0és 5,2Hz); 2,89-2,83 (m, 1H); 2,61 (d, 1H, OH, J-2,2Hz); 2,30 (d, 1H, OH, J-2,4Hz); 1,38 (d, 3H, J-4,9Hz). Tömegspektrum (FAB), m/e, 853 (M++H): 808, 723,646,587. A C45H40O17 összegképletre számított M+852. 19. példa Etopozid-4’-(4-nitro-benzil)-karbonát (Xlla, Y- nitro-benzil-oxi-karbonil-csoport) 5,19 g (8,82 mmól) etopozid 700 ml száraz acetonnal készült és mágneses keverővei kevert szuszpenziójához szobahőmérsékleten, nitrogénatmoszérában 2,15 ml (12,3 mmól) N,N-diizopropil-etil-amint és 2,20 g (10,2 mmól) 4-nitro-benzil-ldór-formiátot adunk. 30 perc alatt lassan minden anyag feloldódik, és halványsárga oldat képződik, amelyet szobahőmérsékleten 16 órán át keverünk. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot 500 ml etil-acetátban oldjuk, majd 200 ml 7-es pH-jú foszfát keverékén szárítjuk. Forgó bepárlóban az oldószert eltávolítjuk, a maradékot 50 ml etil-acetátban felvesszük és celiten átszűrjük. A celitet két alkalommal 25-25 ml friss etil-acetáttal átmossuk és az egyesített szűrletet lassan 600 ml, élénken kevert hexánhoz adjuk. A kivált csapadékot szűréssel összegyűjtjük, hexánnal mossuk és 50 *C- on, 66,5 Pa nyomáson szárítjuk, így 6,73 g (99%) tiszta, cím szerinti vegyületet kapunk nagyon halvány sárga szilárd anyag formájában. ‘II-NMR (360 MHz, CDCI3): delta 8,22 (d, 2H, J=8,6Hz); 7,56 (d, 2H, J=8,6Hz); 6,81 (s, 1H); 6,52 (s, 1H); 6,27 (s, 2H); 5,98 (d, 2H); 5,32 (s, 2H); 4,89 (d, 1H, J=3,4Hz); 4,73 (q, 1H, J=5,0Hz); 4,65-4,61 (m, 2H); 4,42 (dd, 1H); 4,22 (dd, 1H); 4,15 (dd, 1H), J-10,5 és 4,0Hz); 3,74 (m, 1H); 3,66 (s, 6H); 3,56 (m, 1H); 3,43 (m, 1H); 3,36-3,31 (m, 2H); 3,27 (dd, 1H, J-14,1 és 5,2Hz); 2,89-2,78 (m, 1H); 2,64 (br.s, 1H, OH); 2,37 (br.s, 1H, OH); 1,38 (d, 3H, J-5,0Hz). 20. példa Etopozid-4’-[N,N-bisz(2-klór-etil)]-karbamát (Xlla, Y- NJ4-bisz(2-klór-etil)-amino-karbonil-17 csoport) 2,10 g (3,57 mmól) etopozid 215 ml száraz acetonnal készült és mágneses keverővei kevert oldatához nitrogén atmoszférában és szobahőmérsékleten 0,85 ml (4,88 mmól) N,N-diizopropü-etil-amint és 0 °C-ra való hűtés után fecskendővel 361,5 mg (215 mikroliter, 1,83 mmól) difoszgént adunk. Az elegyet 5 percig 0 “C-on tartjuk, majd 750 mg (4,20 mmól) szilárd bisz(2-klór-etil)-amin-hidrokloridot és közvetlen utána 1,60 ml (9,19 mmól) N,N-diizopropil-etü-amint adunk hozzá. A reakcióelegyet 0 °C-on 1,5 órán át, majd szobahőmérsékleten 1 órán át keverjük, azután 300 ml 5-ös pH-jű foszfát puffer, 400 ml etil-acetát és 100 ml telített vizes nátrium-klorid-oldat között megosztjuk. A szerves fázist három alkalommal 150-150 ml telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk és nátrium és magnézium-szulfát keverékében szárítjuk. Az oldószert forgóbepárlóban eltávolítjuk, a maradékot kovasavgélen gyorsan kromatografáljuk 0-tól 4%-ig változó mennyiségű metanolt tartalmazó metilén-ldorid gradienst használva eluálószerként. így 1,71 g (63%) tiszta, cím szerinti vegyületet kapunk színtelen szilárd anyagformájában. IR (KBr): 1773, 1728, 1602, 1506, 1486, 1420, 1338, 1236, 1191, 1160. 1130, 1097, 1077, 1038, 1003,933,890,864 cm. ‘H-NMR (360 MHz, CDCI3): delta 6,80 (s, 1H); 6.52 (s, 1H); 6,26 (br.s, 2H); 5,97 (d, 2H); 4,89 (d, 1H, J-3,33Hz); 4,73 (q, 1H, J~4,8Hz); 4,64-4,61 (m, 2H); 4,41 (dd, 1H); 4,23-4,14 (m, 2H); 3,81-3,67 (m, 9H); 3,67 (s, 6H); 3,57 (m, 1H); 3,42 (m, 1H); 3,34-3,31 (m, 2H); 3,27 (dd, 1H, J-14,1 és 5,2Hz); 2,90-2,80 (m, 1H); 2,75 (br.s, 1H, OH); 2,55 (br. s, 1H, OH); 1,38 (d, 3H, J-4,8Hz). Tömegspektrum (FAB), m/e 756 (M++H), 550 (M-cukor). A C34H39NO14Q2 összegképletre számított M+755,1747. 21. példa Etopozid-4’-metü-karbamát (Xlla, Y- N -metil-amino-karbonü-csoport) 2,00 g (3,40 mmól) etopozid 200 ml száraz acetonitrülel készült és mágneses keverővei kevert oldatához 1,66 ml (9,53 mmól) N,N-diizopropil-etüamint adunk és az elegyet nitrogén alatt 0 °C-ra hűtjük. Ehhez az oldathoz 2,20 ml 1,93 mólos toluoíos foszgén-oldatot (4,42 mmól) adunk gyorsan, fecskendő segítségével. A reakcióelegyet 10 percig 0 °C- on keverjük, majd gyorsan 5,86 ml (6,80 mmól) 40%-os vizes metil-aminhoz adjuk. Az elegyet 30 percig 0 °C-on keverjük, majd 350 ml etü-acetát és 150 ml 0,1N sósav között megosztjuk. A szerves réteget 200 ml vízzel, majd 200 ml telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk és magnézium-szulfáton szárítjuk. Az oldószert forgóbepárlóban eltávolítjuk, és a maradékot kovasavgélen gyorsan kromatografáljuk 2% metanolt tartalmazó metilén-kloridot használva eluálószerként, így 673 mg (31%) tiszta, cím szerinti vegyületet kapunk. IR (KBr): 1775 (váll), 1740, 1604, 1517, 1490, 1425, 1335, 1238, 1168, 1134, 1104, 1080, 1040, 1010,936cm'1. ‘H-NMR (360 MHz, CDCI3): delta 6,79 (s, 1H); 6.53 (s, 1H); 6,24 (s, 2H); 5,96 (d, 2H); 5,01 (t, 1H); 18 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
