202512. lajstromszámú szabadalom • Eljárás benzopirán-származékok és az ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 202512B tont alkalmazhatunk. A kapott (XXXIII) általános képletű vegyületet szokásos módszerekkel (pl. kristályosítás, kromatografálás stb.) izolálhatjuk. A kapott (XXXm) általános képletű vegyületet szokásos redukálószerekkel [pl. di-(kis szénatomszámú alkil)-alumínium-hidridekkel, előnyösen diizobutU-alumínium-hidriddel] alakíthatjuk (XXXIV) általános képletű vegyületté. A redukciót kb. -50 *C és -100 *C közötti hőmérsékleten — előnyösen -75 °C-on—inert oldószerben (pl. aromás szénhidorénekben, klórozott alkánokban vagy kis szénatomszámú alkánokban, előnyösen toluolban) hajtjuk végre. A kapott (XXXIV) általános képletű vegyületet szokásos módszerekkel izolálhatjuk. AXm. reakció-sémában m jelentése 0 vagy 1 és R , R , R91 és R’ jelentése a korábbiakban megadott. A XIII. reakció-séma szerint valamely (XXXIV) általános képletű vegyületet egy (XXXV) általános képletű vegyülettel reagáltatunk. A (XXXIV) és (XXXV) általános képletű vegyületek ismertek vagy ismert módszerekkel állíthatók elő. A reakciót inert aromás szénhidrogén oldószerben (előnyösen toluolban), kb. 20-150 °C-os hőmérsékleten — előnyösen 110 °C körül — végezhetjük el. A kapott (XXXVI) általános képletű vegyületet szokásos módszerekkel izolálhatjuk. R91 jelentése kis szénatomszámú alkücsoport, előnyösen etilcsoport és m-0vagy 1. A kapott (XXXVI) általános képletű vegyületet bármely szokásos katalitikus hidrogénező módszerrel (HTh) általános képletű vegyületté alakíthatjuk. Aredukciót hidrogénnel, katalizátor (pl. palládiumszén) jelenlétében, oldószerben (pl. alkanolban, előnyösen etanalban vagy etü-acetátban), előnyösen szobahőmérsékleten és atmoszférikus nyomáson hajthatjuk végre. A kapott (HTh) általános képletű vegyületet szokásos módszerekkel izolálhatjuk. ^jŰtelyé* hidrogénatomot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek gyógyászatiig alkalmas sóinak előállítása is találmányunk tárgyát képezi. Ezeket a sókat oly módon állíthatjuk elő, hogy egy R9 helyén hidrogénatomot tartalmazó (I) általános képletű vegyületet nem-toxikus, gyógyászatiig alkalmas kationt tartalmazó bázissal reagáltatunk. E célra bármely olyan bázist felhasználhatunk, amely a karbonsavval melegvérű állatokon káros hatást elő nem idéző sót képez. Bázisként pl. alkálifém- és alkáliföldfém-hidroxidokat vagy -karbonátokat (pl. nátrium-hidroxidot, kálium-hidroxidot, kalciumhidroxidot, kálium-karbonátot stb.), ammóniát, primer, szekunder vagy tercier aminokat (pl. monoalkü-aminokat, dialkil-aminokat, trialkil-aminokat, nitrogéntartalmú heterociklikus aminokat — pl. piperidint), bázikus aminosavakat (pl. lizint stb.) alkalmazhatunk. Az ily módon előállított gyógyászatüag alkalmas sók az (I) általános képletű vegyületek funkcionális ekvivalenseinek tekintendők és előállításuk önmagukban ismert módszerekkel történik. A sóképzéshez felhasználandó bázisos megválasztásának egyetlen kritériuma, hogy nem-toxikus, gyógyászatiig alkalmas sót képezzen. Az (I) általános képletű új vegyületek értékes antiallergiás aktivitását in vitro teszttel, valamint melegvérű állatokon standard farmakológiai eljárá9 sokkal igazoljuk. a) Tengeri mala ileum teszt (in vitro)A tengeri malac üeum bio-assay tesztet Orange és Austen [Adv. Immunol. IQ, 105-144 (1969)] írták le. A 300-400 g testsúlyú állatokból eltávolított 1.5 cm-es szegmens 110 ml tiród-oldatot — amely 10‘° mól atropin-szulfátot és 10'6 mól pirü-aminmaleátot tartalmaz —magában foglaló szerv-oldatban felfüggesztjük. A fürdőt 37 °C-on tartjuk és 95% oxigént és 5% szén-dioxidot tartalmazó elegygyel levegőztetjük. A tesztnél felhasznált SRS-A-t olymódon nyerjük, hogy aktívan érzékenyített tengeri malac tüdő-darabkákon tojásalbuminnal in vitro reakciót váltunk ki. Az SRS-A behatásának megfelelő dózis-reakció görbét felvesszük (üeum). A maximális összehúzódás 50%-át előidéző SRS-A dózist (EDso) alkalmazzuk a további reakció kiváltásához. A tengeri malac üeum SRS-A által előidézett összehúzódását 50%-ban gátló hatóanyag-koncentrációt meghatározzuk (IC50). A fenti bioassay tesztben a 7-[3-(4-acetü-3-hidroxi-2-propü-fenoxi)-2-hidroxi-propü]-4-oxo-8-propü-4H-l-benzo pirán-2-karbonsav—standard SRS-A antagonista —IC50 értéke 3.5.10'8 mól. b) Tengeri malac hörgő összehúzódási teszt (in vivo: aeroszol) 300-500 g testsúlyú hím tengeri malacokat (Hartley törzs) uretánnal [2 g/kg, i.p.] helyüeg érzéstelenítünk és a juguláris vénába a gyógyszer beadáshoz polietilén kanült illesztünk. A tracheális nyomást a tracheába illesztett és Statham-féle nyomásátalakítóval összekötött kanül segítségével jegyezzük fel. Az állatok sebészeti előkészítése után a tüdőműködést stabüizálódni hagyjuk. A teszt-vegyületet a következőképpen adagoljuk: az állatok spontán légzése közben propanololt (0,1 mg/kg, i.v.) adunk be. 5 perc elteltével az állatoknak 5 percen át a teszt-vegyület 1 tömeg/térfogat%-os aeroszolos oldatát (az oldatot a hatóanyag szolubüizálása céljából szükség esetén lúgos pH-ra állítjuk be) vagy megfelelő pH-értékű desztillált vizet (kontroll célra) adunk be. A teszt-vegyületeket és a kontroll desztülált vizet Monaghan (Model 750) ultraszonikus ködképző segítségével lélegeztetjük be az állatokkal. Az ultraszonikus ködképzőt olyan frekvenciára állít juk be, hogy 1-8 p tartományba eső nagyságú részecskéket képezzen (átlagérték 3 p). A vizes oldatokat frissen készítjük el és juttatjuk a ködképző kamrájába. Az aeroszolt a trachea kanüllel összekötött Y csövön keresztül ferde áramban juttatjuk az állatok szervezetébe. A kezelési idő végén az állatokat szukcinil-kolinnal (1,2 mg/kg, i.v.) megbénítjuk és mesterségesen lélegeztetjük (Harvard-féle rágcsáló lélegeztető készülék; 40 légzés/perc; ki- és belélegzett 2.5 ml-es térfogat). A szukcinü-kolin beadása után 30 másodperccel az állatok reakció kiváltása céljából maximális összehúzódást előidéző i.v. dózisban leukotriént E4-t kapnak. A beadás előtt mért és csúcs légzési nyomás eltérését (cm H2O) három kontroll és öt kezelt állat esetében átlagoljuk. A százalékos gátlást az alábbi képlet segítségével számítjuk ki: 10 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
