202279. lajstromszámú szabadalom • Eljárás izopenicillin N-szintetáz és az azt kódoló DNS vegyületek előállítására
3 HU 202279 B 4 szükséges, primer metabolitok antibiotikummá való átalakításának folyamatában. Antibiotikum-termelő organizmus bármilyen organizmus, pl. Streptomyces, Bacillus, Monospora, Cephalosporium, Podospora, Penicillium és Nocardia (de nem csak ezekre korlátozva), amely vagy antibiotikumot termel, vagy olyan géneket tartalmaz, amelyek ha kifejeződnek, valamilyen antibiotikumot termelhetnek.- Antibiotikum rezisztencia-adó gén - DNS-szegmens, amely olyan aktivitást kódol, amely egy antibiotikumra való rezisztenciát ad.- ApR - az ampicillin rezisztenciát adó gén.- Kétfunkciós klónozó .ingázó' vektor - rekombináns DNS klónozó vektor, amely replikálódhat és/vagy integrálódhat két különböző rendszertani osztályba tartozó organizmusban.- Ceph DNS - Cephalosporium acremoniumból származó DNS.- Ceph őri *- Cephalosporium acremonium mitokondriális DNS, amely egy rekombináns DNS vektor extrakromoszomális fenntartásáról gondoskodik.- Klónozás - DNS egy szegmense beépítésének folyamata rekombináns DNS klónozó vektorba.- cos - A-fág kohéziv vég szekvenciák.- Kozmid - rekombináns DNS klónozó vektor, amely képes azonos módon replikálódni egy gazdasejtben, mint egy plazmid, de amely képes beburkolódni fágok fejrészébe is.- Funkcionális polipeptid - kinyerhető, bioaktiv, teljesen heterológ vagy homológ polipeptid vagy prekurzor; kinyerhető, biológiailag aktiv polipeptid, amely egy heterológ polipeptidet és egy homológ polipeptid egy részét vagy egészét tartalmazza, vagy egy kinyerhető, biológiailag aktív fúziós polipeptid, amely egy heterológ polipeptidet és egy biológiailag inaktiváló homológ polipeptidet tartalmaz, amelyet fajlagosan lehet hasítani.- Genom könyvtár - rekombináns DNS klónozó vektorok készlete, amelyekbe DNS szegmenseket - amelyek lényegében egy adott organizmus teljes genomját képviselik - klónozni lehet.- HraR - a higromicin rezisztenciát adó gén.- Hibridizálás - két homológ egyszálú DNS molekula összeforrasztásának folyamata kétszálú DNS molekula képzésére, amely lehet teljesen bázis-páros kialakítású, de nem teljesen ilyen is.- IPS - izopenicillin N-szintetázt kódoló DNS.- IPSp - Cephalosporium acremonium izopenicillin N-szintetáz (IPS) génjének átíró és transzlációs aktiváló szekvenciája.- IPSt - az IPSg átírás-befejező és mRNS poliadenilezö és műveleti szignáljai. 4- Izopenicillin N-szintetáz - cikláz néven is ismert enzim, amely katalizálja az izopenicillin N képződését é-(L-oC-amino-adipil)-L-cijszteinil-D-valinból.- KmR - a kanamicin rezisztenciát adó gén.- mel - a tirozináz gén. - mRNS - hírvivő (messenger) ribonukleinsav. - PGK - a Saccharomyces cerevisiae foszfoglicerát kináz gén átíró és transzlációs, aktiváló szekvenciája.- Rekombináns DNS klónozó vektor - bármilyen autonóm módon replikálódó vagy integrálódó ágens, beleértve (de nem csak erre korlátozva) a plazmidokat, amely egy DNS molekulát tartalmaz, amelybe egy vagy több további DNS molekula lehet vagy van beépítve.- Rekombináns DNS kifejeződő vektor - bármilyen autonóm módon replikálódó vagy integrálódó ágens, beleértve (de nem csak erre korlátozva) a plazmidokat, amely egy átíró és transzlációs aktiváló szekvenciát tartalmaz, amely úgy helyezkedik el, hogy elórevigye egy olyan DNS szegmensnek a kifejeződését, amely egy polipeptidet kódol, vagy egy kutatási vagy kereskedelmi fontosságú RNS kifejeződését.- Rekombináns' DNS vektor - bármilyen rekombináns DNS kódoló vagy kifejeződő vektor.- Restrikciós fragmens - egy vagy több enzim hatása alatt keletkezett bármilyen lineáris DNS molekula. - rRNS - riboszomális ribonukleinsav. - Érzékeny gazdasejt - gazdasejt, amely nem képes nőni egy adott antibiotikum jelenlétében egy olyan DNS-szegmens nélkül, amely rezisztenciát ad erre.- Tcr - a tetraciklin rezisztenciát adó gén.- Átírás aktiváló szekvencia - DNS szekvencia, amely elősegiti a DNS-átirást.- Transzfektáns - befogadó gazdasejt, amely fág DNS által végzett transzformációnak volt alávetve.- Transzformáns - befogadó gazdasejt, amely transzformációnak volt alávetve.- Transzformálás - DNS bevezetése befogadó gazdasejtbe, amely megváltoztatja a genotípust és igy változást eredményez a befogadó sejtben.- Transzláció aktiváló szekvencia - DNS szekvencia, amely - amikor átíródik mRNS-sé - elősegíti az mRNS transzlációját fehérjévé.- trp - E. coli triptofán operonjának átírás- és transzláció aktiváló szekvenciája. Az alábbiakban röviden bemutatjuk a mellékelt ábrákat. Az 1-7. ábrákban bemutatott restrikciós hely- és műveleti térképek az itt tárgyalt rekombináns DNS vektorok hozzávetőleges képviselői. A restrikciós helyek térközei a térképen arányosak a restrikciós helyek 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
