202249. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás 2-dezoxi- 2',2'-difluor-nukleozidok előállítására
1 HU 202249 B 2 mHz-es készüléken CDCb-ban: 6-4,70 (szingulett, 2H); 4,99 (szingulett, 1H); 5,76 (szingulett, 1H); 7,4-8,2 (széles multiplen, 10H). A termékről, amely 119°—119^5 *C hőmérsékleten olvad, úgy véljük, hogy több, mint 95,0% tisztaságú 2-dezoxi-2,2-difluor-D- eritro-pentofuranóz-1 -ulóz-3,5-dibenzoát. 6. példa D-eritro- és D-treo-2-dezoxi-2,2-difluor-pentofuranóz-l-ulóz-3,5-dibenzoát enantiomer keverékének előállítása. 250 ml-es lombikba 73 ml 2:1 (térfogat/térfogat) metanol/víz oldatot adunk, amely 2,33 g (13,89 mmól), 5. példa eljárása szerint előállított D-eritro- és D-treo-2-dezoxi-2,2-difluor-pentofuranóz-l-ulóz enantiomer keveréket (62,4% eritro enantiomer) tartalmaz. Az oldatot csökkentett nyomáson melegítjük, ilyen módon olajat kapunk. Az olajat feloldjuk 100 ml etil-acetátban és az így létrejött oldatot vízmentes magnézium-szulfáton vízmentesítjük. Miután a magnézium-szulfátot szűréssel eltávolítottuk, az oldatot ismét koncentrájuk csökkentett nyomáson, így sűrű olajat kapunk. Ezt az olajat feloldjuk 18 ml metilén-kloridban, ezt követi 0,17 g (1,38 mmól) 4-dimetil-amino- piridin hozzáadása. Az oldatot mintegy 0 *C hőmérsékletre lehűtjük és 3,41 g (31,85 mmól) 2,6 lutidint és 4,50 g (31,98 mmól) benzoil-kloridot adunk hozzá. Az oldatot hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni (22 *C), majd kevertetjük mintegy 64 órán át. Keverés után az oldat térfogatát mintegy 50 ml-re növeljük metilén-kloriddal. Az így létrejött oldatot egymás után mossuk 25 ml 5 tömeg %-os sósavoldattal, 25 ml 5 tömeg %-os nátrium-bikarbonát oldattal, és 25 ml vízzel. A metilén-kloridos oldatot vízmentes magnézium-szulfáton víztelenítjük, és csökkentett nyomáson koncentráljuk, ilyen módon olajat kapunk. Erről az olajról, bár nem viszgáltuk, úgy véljük, hogy D-eritro- és D-treo-2-dezoxi-2,2-difluor-pentofuranóz-l-ulóz-3,5-dibenzoát. B. 2-dezoxi-2,2-difIuor-D-eritro-pentofuranóz-lulóz-3,5- dibenzoát izolálása. A fentebb kapott olajat feloldjuk metilén-kloridban (3,5 ml). Izopropanolt (35 ml) adunk hozzá, és az oldatot mintegy 0 ‘C-ra lehűtjük jégfűrdőben, majd az autentikus vegyület kristályával beoltjuk. Miután mintegy 0 °C-on kevertettük 3 órán át, a keveréket leszűrjük. A szűrőpogácsát hideg izopropanollal, majd szobahőmérsékletű (22 °C) hexánnal mossuk és vákuum-kemencében szárítjuk 22 °C-on, így kapunk 0,87 g 97,0% tisztaságú 2-dezoxi- 2,2-difluor-D-eritro-pentofuranóz-l-ulóz-3,5-dibenzoátot, az 1. példában leírt analitikai technikával mérve. Op.: 117-118 °C. A terméket NMR elemzéssel is azonosítjuk 300 MHz-es készüléken CDCb: 8=4,70 (szingulett, 2H), 4,99 (szingulett, 1H), 5,76 (szingulett, 1H), 7,4-8,2 (széles multiple«, 10H). 7. példa 2’-Dezoxi-2’,2’-difluor-citidin 1:1 a/ß anomer keverékének előállítása 500 ml-es háromnyakú, kerekfenekű lombikhoz, amely 250 ml 1,2-diklór-etánt tartalmaz, hozzáadunk 15,00 g (32,88 mmól) 2-dezoxi-2,2-difluor-D-eritropentafuranóz-3,5-dibenzoát-1 -metil-szulfonátot [előállítása: a 3. példa szerinti terméket a 4.526.988 számú amerikai egysük államokbeli szabadalmi leírás szerint a megfelelő alkohollá, majd 1-metánszulfonáttá alakítjuk], 15,65 g (52,60 mmól) bisz-trimetil-szilil-N- acetil-citozint és 9,50 g (42,74 mmól) trifluor-metánszulfonil-oxi-trimetil-szilánt. Az oldatot a visszafolyatás hőmérsékletén (84 °C) melegítjük mintegy 8 órán át. A reakcióoldatot szobahőmérsékletre (22 °C) lehűtjük és 100 ml 5 tömeg %-os sósav-oldatot adunk hozzá. Mintegy 5 perces kevertetés után a rétegeket elkülönítjük, és a vizes réteget 25 ml metilén-kloriddal mossuk. A szerves rétegeket egyesítjük és mossuk, egymás után 100 ml 5 tömeg %-os nátrium-bikarbonát-oldattal és 100 ml telített konyhasó-oldattal. Az így létrejött szerves réteget vízmentes magnézium-szulfáton víztelenítjük és csökkentett nyomáson koncentráljuk, így habot kapunk. Metanolt (150 ml) adunk hozzá, hogy a hab feloldódjék. Az oldatot azután 0 °C hőmérsékleten hűtjük. Ammónia gázt buborékoltatunk keresztül az oldaton mintegy 1 percen át. Az illő alkotórészeket eltávolítjuk csökkentett nyomáson, így gumi-szerű anyagot kapunk. A gumi-szerű anyagot feloldjuk 100 ml etil-acetátban és 100 ml vízben. A rétegeket elkülönítjük és a szerves réteget 25 ml vízzel mossuk. Mindkét vizes réteget egyesítjük, mossuk 100 ml dietil-éterrel, és a vizes oldatot csökkentett nyomáson koncentráljuk, ilyen módon gumiszerű anyagot kapunk. Mintegy 10 ml metanolt adunk hozzá, hogy a gumiszerű anyag feloldódjék. Az így létrejött oldatot szárazra koncentráljuk csökkentett nyomáson, hogy 4,14 g 2’-dezoxi-2’,2’-difluor-citidint kapjunk. A terméket HPLC-vel jellemezzük, összehasonlítva autentikus referencia standardokkal. A vizsgálati mintát úgy készítjük el, hogy 3 mg terméket 5 ml-es mérőlombikba helyezünk, majd teljes térfogatra hígítjuk 0,1 n sósavoldattal. Az oszlopot olyan eluáló oldószerrel eluáljuk, amely 5 térfogat % metanolból és 95 térfogat % 0,04 mól/1 nátrium-acetát oldatból áll. Az alkalmazott oszlop 25 cm-es A-303 típusú YMC oszlop. A detektor hullámhosszúsága 275 nm, az oszlop áramlási sebessége 1,0 ml/perc, az injekciós térfogat 20 1, és az oszlop szobahőmérsékletű (22 °C). A HPLC elemzés feltárja, hogy a termék 2’-dezoxi-2’,2’-difluor-citidin 1:1 a/ß anomer keveréke. Retenciós idők: a-anomer 13,80 perc, ß-anomer 16,7 perc. 8. példa 90,5% tisztaságú ß-2’-dezoxi-2’,2’-difluor-citidinhidroklorid előállítása. 2’-dezoxi-2’,2,-difluor-citidin mintegy 1:1 a/ß anomer keverékét, amelyet a 7. példa eljárása szerint állítottunk elő, feloldjuk 6 ml forró izopropanoíban (80 °C). Koncentrált sósavoldatot (15 csepp) adunk a forró oldathoz. Az oldatot beoltjuk autentikus ß- 2’-dezoxi-2’,2’-difluor-citidin-hidrokloriddal, hagyjuk lehűlni szobahőmérsékletre, és egy hétvégen át hűtjük. A keveréket leszűrjük és a szűrőpogácsát izopropanollal mossuk és vákuumban szárítjuk 22 °C hőmérsékleten, így kapunk 0,38 g terméket, amelyet 90,5% tisztaságú ß-2’-dezoxi-2’,2’-difluor-citidin-hidrokloridnak mérünk a 7. példában leírt analitikai eljárás alapján. A terméket NMR elemzéssel is azonosíthatjuk 300 MHz-es berendezésen CDCb-ban: 6=3,81 (triple«, 2H); 3,93 (dublett, 1H); 4,23 (triple«, 1H); 4,80 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
