202248. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszeudo-primicin és komponensei, valamint az ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 202248 B 2 Töltésnélküli anyagként egyrészt fémoxidot- vagy hidroxidot, előnyösen nátriunihidroxidot, báriumhidroxidot vagy magnéziumoxidot, másrészt szerves bázist, előnyösen dietil-amint, trietilamint, anilint, harmadrészt nitrogén- vagy oxigén-tartalmú heterociklusos vegyületet, előnyösen piridint, kinolint, piperazint, imidazolt, dioxánt alkalmazunk. A transzlaktonizációs reakciót vizes és/vagy szerves oldószeres közegben hajtjuk végre. Szerves oldószerként protikus oldószereket, mit pl. 1-4 szénatomos alifás alkoholokat, előnyösen metilalkoholt, etilalkoholt, n-butanolt vagy például halogénezett szénhidrogéneket, előnyösen kloroformot, valamint aprotikus oldószereket, mint pl. étert, valamint szerves bázisokat, mint pl. dietilamint, piridint, acetonitrilt, dimetil-formamidot alkalmazunk. Legelőnyösebbnek találtuk az 1-4 szénatomos alifás alkoholokat önmagukban vagy vízzel elegyítve. A reakciót szobahőmérsékleten (20-22 °C) is elvégezhetjük, de meggyorsítja a folyamatot, ha melegítjük a reakcióelegyet, kívánt esetben az oldószer forráspontján dolgozhatunk. A reakcióelegy feldolgozása előnyösen a következőképpen történik: a kiindulási primycin-sóból, ha szükséges, acetát-sót képezünk, majd a fent leírt transzlaktonizációs reakcióval pszeudo-primicin-acetátot állítunk elő. A reagálatlan primycin-acetátot alkalmas szerves anyaggal történő kezeléssel elkülönítjük a pseudo-primycin- acetáttól. A kicsapásra előnyösen etil-formiátot használunk. A kicsapott primycin-acetátot szűréssel eltávolítjuk a reakcióelegy bői. A visszamaradt szűrletből acetát formájában, vagy kívánt esetben más megfelelő sav hozzáadásával egyéb só, pl. szulfát formára átalakítva nyerhetjük ki a pszeudo-primicint. A kinyerést előnyösen éter és/vagy víz, vagy acetonitril segítségével végezzük, melyet szűrés és szárítás követ. Az eljárásunk szerint úgy is eljárhatunk, hogy a komponenseire szétválasztott primycin egyes komponenseiből indulunk ki, és a transzlaktonizációt az egyes komponensekkel végezzük el, így a pszeudo-primicin megfelelő komponensét kapjuk. Az eljárás részletei megegyeznek az előző variáció részleteivel. Kívánt esetben eljhárhatunk úgy is, hogy a pseudo-primycin komponenseit az eljárásunk szerint már előállított pszeudo-primicin komplexből kromatográfiás elválasztással állítjuk elő. Erre a célra oszlop-, vagy vékonyréteg-kromatográfía alkalmazható. Mivel a pszeudo-primycin oldékonysága a primycin oldékonyságánál sokkal jobb, ezért a kromatográfiás komponensekre való bontás is sokkal könnyebben megy végbe, általában egyszerű oszlopkromatográfiával megoldható. Az oszlopkromatográfiás elválasztási módszer kivitelezése az alábbi módon történik. Az oszlop töltete előnyösen szilikagél (pl. Kieselgel 60), amit az alkalmazott eluensben szuszpendálva töltünk be. Az elválasztani kívánt primycinsót szintén az eluensben oldva visszük fel a gélágy tetejére. A kifejlesztéshez víz és szerves oldószer(ek) keverékét használjuk. Azt találtuk, hogy szerves sav jelenléte az eluensben javítja a elválaztás hatékonyságát. Szerves oldószerként előnyösen alkohol(oka)t (pl. metanol, etanol, butanol stb.) és halogénezett oldószereket (pl. kloroform, diklórmetán stb.) míg szerves savként előnyösen ecetsavat alkalmazunk. Legelőnyösebbenek a kloroform:metanol:ecetsav:víz-9:6:3:4: arányú elegyének alsó fázisa bizonyult, amelyet 1 tf% metanollal stabilizálunk. A kifejlesztés során összegyűjtjük a vékonyrétegkromatográfía (VRK) alapján azonosnak minősülő anyagokat tartalmazó frakciókat. Az egyesített oldatokból a bepárlást követően tisztán nyerjük ki az egyes komponenseket. A VRK futtatást szilikagél, előnyösen Kieselgel 60 F254 (Merck) vagy HPTLC HP-KF (Whatman) rétegen végezzük, 10 pl térfogatú mintákkal. A futtatóelegy kloroform:metanol:hangyasav:víz:formaldehid:n- butanol=l60:53:6:9:3:3 arányú elegye, az előhívás klór-toluidinnel vagy 1% foszformolibdénsavat tartalmazó etanollal történhet. A kromatográfiás elválasztással a pseudo-primycin komplexből a primycin komplexéhez hasonló komponenseket nyerünk: A], A2, A3, Bi, B2, B3, Ci, C2, C3. Az I. általános képletű pszeudo-primicin komplex komponensei: pseudo-primycin-Ai, ahol Rj jelentése butil-csoport, R2 jelentése O-arabinóz-csoport, X jelentése az 1. igénypontban megadott, pszeudo-primicin-A2, ahol Rí jelentése pentil-csoport, R2 jelentése O-arabinóz-csoport, X jelentése az 1. igénypontban megadott, pszeudo-primicin- A3, ahol Rí jelentése hexil-csoport, R2 jelentése O-arabinóz-csoport, X jelentése az 1. igénypontban megadott, pszeudo-primicin-Bi, ahol Rí jelentése butil-csoport, R2 jelentése hidrogén, X jelentése az 1. igénypontban megadott, pszeudo-primicin-B2, ahol Rí jelentése pentil-csoport, R2 jelentése hidrogén, X jelentése az 1. igénypontban megadott, pszeudo-primicin-B3, ahol R1 jelentése hexil-csoport, R2 jelentése hidrogén, X jelentése az 1. igénypontban megadott, pszeudo-primicin-Ci, ahol Rí jelentése butil-csoport, R2 jelentése hidroxil-csoport, X jelentése az 1. igénypontban megadott, pszeudoprimicin-C2, ahol Rí jelentése pentil-csoport, R2 jelentése hidroxil-csoport, X jelentése az 1. igénypontban megadott, pseudo-primycin-C3, ahol Rí jelentése hexil-csoport, R2 jelentése hidroxil-csoport, X jelentése az 1. igénypontban megadott, valamint savaddíciós sóik. A kromatográfiás elválasztással kapott pszeudo-primicin komponensekre jellemző Rf-értékek a következők: Ai Rf=0,30 Bi RM),55 Ci Rf=0,36 A2 Rf=0,32 B2 Rf=0,57 C2 Rf=0,38 A3 Rf-0,34 B3 Rf-0,59 C3 Rf-0,40 A találmányunk szerinti eljárással előállított pszeudo-primicin komplex és/vagy komponenseinek oldékonysága sokkal jobb, mint a kiindulási primycin komplexnek és/vagy komponenseinek. Pl. a pirimicin-acetát gyakorlatilag oldhatatlan vízben, etanolban, metanolban, ezzel szemben a pszeudo-primicin-acetát oldékonysága vízben 5 g/10 ml, etanolban szintén 5 g/10 ml, metanolban pedig 10 g/10 ml, mely tehát jelentős oldékonyság javulást jelent. Az egyes pszeudo-primicin komponensek oldékonyságának a jelentős javulása az eredeti primycin komponensekéhez képest megegyezik a pszeudo-primicin komplexre vonatkozó adatokkal, pl. a pszeudo-primicin-Ai-acetát oldékonysága vízben és etanolban szintén 5 g/10 ml, metanolban pedig ugyancsak 10 g/10 ml. így a pszeudo-primicin komplex és/vagy a komponensei egyaránt alkalmasak magasabb koncentrációjú gyógyszerformák előállítására. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
