202242. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás telítetlen aminosav-vegyületek és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 202242 B 2 (35 mg) 2 ml diklórmetánban 0,05 ml N,0-bisz-trimetil-szilil-acetamiddal származékká alakítjuk és kapillár-gázkromatográfiával (Chirasil®-L-Val, 150 °C) analizáljuk: 89,1% (2R,3S)-izomer (Tret-22,1 perc), 5,8% (2S,3R)-izomer (Tret=23,l perc), 2,8% (2R.3R)izomer (Tret-24,3 perc), 2,3% (2S,3S)-izomer (Tret-25,4 perc). 20.2 g 2 vegyület, 16,83 ml trietilamin és 0,62 g 4-(dimetil-amino)-pirimidin 300 ml diklórmetánnal készített oldatához 25 perc alatt 0-3 “C-on 11,42 ml ecetsavanhidrid 50 ml diklórmetánnal készített oldatát csepegtetjük. 30 perc múlva kétszer mossuk jéghideg 2 n sósavval és kétszer 10%-os nátriumklorid oldattal. A vizes fázisokat 100 ml diklórmetánnal extraháljuk. A nátriumszulfát felett szárított szerves fázisok bepárlási maradékát forrón oldjuk 4:1 arányú hexánetilacetát elegyben. Lassan, körülbelül 30 °C-ra lehűtve 1,82 g racém (2R*,2S*)-2-formil-amino-3-acetoxi-4-metil-4-penténsav-etilésztert nyerünk, mely 98- 106 “C-on olvad. Az anyalúgot lassan -12 “C-ra hűtjük le és egy órán át tartjuk ezen a hőmérsékleten. Szűréssel 15,04 g 3 acetátot nyerünk, mely 73-75 “C-on olvad. [alfa]D= -75,6° (c-1, CHCb). Gázkromatográfiás analízis (Chirasil®-L-Val, 160-180 “C, 1 °C per perc): (2R,3S)izomer 93,5% (Tret=l4,5 perc), 2,2% (2S,3R)-izomer (Tret-14,8 perc), 2,2% (2R.3R)izomer (Tret"16,8 perc), 2,1% (2S,3S)-izomer (Tret-17,1 perc). (2R,3S)-2-formil-amino-3-acetoxi-4-metil-4-penté n-sav-etilészter (3) 400 ml vízmentes etanollal készített oldatához -16 °C-on 20,64 g vízmentes káliumkarbonátot adunk. A reakcióé legyet 4 órán át keverjük -18 'C és 11 °C közötti hőmérsékleten, majd 500 ml pufferoldatot (1 mólos foszfát, pH=7) csepegtetünk hozzá. Ezután 30 percen át keverjük szobahőmérsékleten és háromszor extraháljuk 350- 350 ml diklórmetánnal. A szerves fázisokat nátriumszulfát felett szárítjuk, majd bepároljuk, a maradékot 1 kg szilikagélen kromatografáljuk. Eluálószerként 1:2 arányú hexán-etilacetát elegyet használun. így 9,8 g 1 alkoholt nyerünk. b) (2R)-2-Formil-amino-4-metil-5-diizopropil-foszfono-3-penténsav-etilészter (4) 14,19 g, az a) pontban leírtak szerint előállított 1 vegyület 210 ml 1,2-diklóretánnal készített oldatához 18-20 “C-on 6,57 ml tionilbromidot, majd 2 órán át tartó keverés után 135 ml vizet adunk. 15 perc múlva a szerves fázist elválasztjuk és háromszor 150-150 ml jeges vízzel és egyszer 100 ml jéggel hűtött telített nátriumhidrogénkarbonát oldattal mossuk. A szerves fázist nátriumszulfát felett szárítjuk, majd bepároljuk, a maradékot 60 ml triizopropil-foszfitban oldjuk és 17 órán át keverjük 75 °C-on 100 mbar nyomáson. A reagens-felesleget nagyvákuumban 90 “C-on ledesztilláljuk. A maradékot 650 g szilikagélen kromatografáljuk. Eluálószerként 20:1 arányú etilacetátmetanol elegyet használunk. így 10,88 g 4 foszfonsavésztert nyerünk. [alfa]D—123,5“ (c-1, CHCI3). 'H-NMR-analízis (300 MHz) (lR)-l-(9’antracenil)-2,2,2-trifluor-etanol hozzáadásával az enantiomer-tisztaság>90%. c) (2R)-2-Amino-4-metil-5-foszfono-3-penténsavetilészter (5) 10.3 g, a b) pontban leírtak szerint előállított 4 vegyület 42 ml diklórmetánnal készített oldatához 15 perc alatt 23 ml trimetil-brómszilánt csepegtetünk. 21 és fél óra múlva jéghűtés közben 42 ml etanolt adunk hozzá és további 20 órán át keverjük. Ezután bepároljuk és a maradékot háromszor pároljuk be 70-70 ml toluollal. A maradékot 42 ml etanolban oldjuk és 42 ml propilénoxidot adunk hozzá. Másfél óra múlva szűrjük. A szüredéket vákuum-exszikkátorban P2O5/KOH felett szárítjuk 3 órán át 80 “C-on. így 6,17 g 5 vegyületet nyerünk. [alfa]D=-78° (c-0,6; H2O). Olvadáspontja: 194-197 “C (bomlás közben). Elemanalízis a CsHmNOsP összegképlet alapján: számított: C 40,51; H 6,80; N 5,91; P 13,06%; mért: C 39,4; H 7,09; N 5,73; P 12,98%. Ennek a terméknek egy kis mennyiségét az enantiomer tisztaságvizsgálatához (R)-(+)-metoxi-trifluormetil-fenilecetsavkloriddal és diazometánnal amid-dimetil-foszfonáttá alakítjuk és az !H-NMR (300 MHz) az OCH3-jelek integrálása alapján a következőket mutatja: (2R)-izomer>93% (3,51 ppm), (2S)-izomer <7% (3,37 ppm). 10. példa (2R)-2-Amino-4-metil-5-foszfono-3-penténsav A 9. példában leírtak szerint előállított 100 mg (2R)-2-amino-4-metil-5-foszfono-3- penténsav-etilészter 3 ml 1 n sósavval készített oldatát 4 és fél órán át melegítjük 100 “C fürdőhőmérsékleten. Ezután a reakcióelegyet bepáropljuk és a maradékot nagyvákuumban 60 “C-on szárítjuk 30 percen át. A maradékot 15 ml etanolban oldjuk és 4 ml propilénoxidot adunk hozzá. Ezután szűrjük és a szüredéket vákuum-exszikkátorban P2O5/KOH felett szárítjuk, így 62 mg savat kapunk. Ennek a terméknek egy kis mennyiségét az enantiomer tisztaságvizsgálata céljából (R)-(+)-metoxi-trifluor-metil- fenil-ecetsav-kloriddal amiddá alakítjuk. !H-NMR (300 MHz) vizsgálattal az OCH3-jelek integrálásával a következő eredményt kapjuk: (2R)enantiomer>95% (3,25 ppm) és (2S)-enantiomer <5% (3,18 ppm). 11. példa E-2-Amino-4-metil-5-foszfono-3-penténsav (1) 12 g E-2-amino-4-metil-5-foszfono-3-penténsavetilésztert 70 ml vízben 19 órán át forralunk viszszafolyatás közben. A reakcióelegyet lassan szobahőmérsékletűre hűtjük le, majd egy órán át jégfürdőbe keverjük, szűrjük és hideg vízzel mossuk. így az E-2-amino-4-metil-5-foszfono-3-penténsavat nyerjük monohidrát alakjában. Olvadáspontja 163 “C (bomlás közben) 12. példa E-2-Dimetil-amino-4-metil-5-foszfono-3-penténsav 3,56 g E-2-amino-4-metil-5-foszfono-3-penténsavetilészter, 45 ml 98%-os hangyasav és 30 ml 37%-os vizes fonnaldehidoldat keverékét 30 percen át keverjük 105 “C fürdőhőmérsékleten. A reakcióelegyet ezután vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot kevés vízben felvesszük és ismét bepároljuk. Ezt az eljárást még kétszer megismételjük. A szilárd maradékot 80 ml vízzel felkeverjük. Egy óra múlva az oldhatatlan részeket egy üvegszűrőn elválasztjuk és vízzel utánamossuk. A szürletet és a mosóvizet vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 100 ml 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 17
