202117. lajstromszámú szabadalom • Eljárás növekedést serkentő hormon stabilitására és stabilizált hormonkészítmény előállítására

HU202117 B

11

12

hogy a beültetési viszonyokat utánozzuk. Az 50 millüiteres csőbe bemértük a száraz stabilizátort, a száraz növekedési hormont és az izotóniás foszfátpuffert. A csöveket lezártuk és 19 napon át inkubáltuk 37 *C hőmérsékleten. Az inkubációs idő leteltével a mintákat úgy analizáltuk, ahogyan azt az 1. példában leírtuk. A száraz stabilizátorokkal végezett

vizsgálatok eredményeit a KI. táblázatba# foglaljuk össze. Amint az eredményekből kitűnik, a nem-oldódó maradék csökkenése lényegesen nem tér el az

1. példa eredményeitől, ahol a stabüizátorokat előzetesen feloldottuk a puff erben. A szimulált beépítési kísérletek bizonyítják a találmány szerinti eljárás hatékonyságát.

5

III. táblázat Száraz készítmények

készítalkalmazott

stabilihormon

IFFP

nap 37 °C (lü)

oldhatatlan

RRA

Hypox

mény

borjú növekedési hormon

zátor

súlya

(mg)

mennyisége

maradék a kiindulási hormon tömeg%-ábaq

patkány

növekedés

1.

Lot 7237C

pentaeritrol

40 mg

47 mg

100

19

27

+

2.

Lot 7237C

L-szerin

40 mg

41 mg

150

19

19

+

4. példa

Vizsgálatokat végeztünk a sertés növekedési hormont és stabilizátort, illetve csak sertés növekedési hormont tartalmazó beültetett készülék hatékonyságára az alábbi módon. 20 db 2x0,7 cm méretű szilikoncsőbe körkörös teflonkorongokat helyezünk úgy, hogy a csöveket két egyenlő méretű kamrára osszuk. 10 db cső (a továbbiakban A csövek mindkét kamrájában 20 mg Parlow (lot 4556) sertés növekedési hormont teszünk, majd a cső mindkét végét lezárjuk 70 mikron pórusnagyságű mikropórusos polietilén koronggal. A másik 10 csövet (a továbbiakban B csövek) ugyanilyen módon készítjük el, azzal a különbséggel, hogy a Parlow sertés növekedési hormon a Lot 4654 és a Lot 4673 keveréke. Az A és B csövekben használt növekedési hormonok között nem volt szignifikáns különbség kimutatható. A B csövekbe a növekedési hormonhoz még 80 mg szaccharózt is adunk, amit a csövekbe való betöltés előtt homogénen elkeverünk a hormonnal.

Valamennyi csövet a sertések füle mögé ültetjük be szubkután, ezt követően az állatok vérszérumában mérjük a növekedési hormon szintjét. A növekedési hormon koncentrációját ng/ml egységben adjuk meg.

AIV. táblázatban feltüntettük, hogy a beültetést követő napokban az állatok vérszérumában milliliterenként hány ng sertés növekedési hormon volt található.

Az első ábrán grafikusan ábrázoltuk a IV. táblázat eredményeit. Az ábrán meghúzott vonallal jelöljük a növekedési hormon kívánt minimális 8 ng/ml szintjét.

A kísérleti eredmények bizonyítják, hogy a stabilizált növekedési hormonkészítmény a vérszérumban magasabb hormonkoncentrációt biztosít, mint a stabilizátor nélküli növekedési hormon.

IV. táblázat

Beültetett hordozórendszer hatása

a vérszérum növekedési hormon szintjére

nap

hordozórendszer

A

B

1.

2,8

35,8

2.

3.4

45,0

3.

3,8

23,2

5.

5,1

25,4

7.

4,6

7,0

9.

6,9

9,3

11.

4,4

2,4

13.

2,7

2,0

A táblázatban szereplő átlagértékeket korrigáltuk a vér, a beültetés előtti napon mért átlagos hormonszintjéből adódó kovarianciával.

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás emberi és állati növekedést serkentő hormon stabilizálására, azzal jellemezve, hogy a növekedést serkentő hormont valamely stabilizátorral összekeverjük, ahol a stabilizátor lehet:

a) egy poliol, nevezetesen nem-redukáló cukor, cukor alkohol, cukorsav, laktóz, pentaeritrol, vízoldékony dextrán vagy nemionos, szintetikus szacharóz polimer;

b) egyike az alábbi aminosavaknak: glicin, szarkozin, lizin vagy sói, szerin, arginin vagy sói, ben tain, N,N-dimetU-glicin, aszparaginsav vagy sói, glutaminsav vagy sói;

c) fiziológiás pH értéknél elektromosan töltött oldalláncot hordozó aminosav polimerje; és

d) egy kolinszármazék, nevezetesen kolin-klorid, kolin-dihidrogén-citrát, kolin-hidrogén-tartarát, kolin-hidrogén-karbonát, trikolin-citrát, kolin-aszkorbát, kolin-borát, kolin-glükonát, kolin-foszfát, di(kolin)-szulfát vagy dikolin-mukát.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás juh, ló, madár, sertés vagy borjú növekedési hormon stabilizálására, azzal jellemezve, hogy a tárgyi kör szerinti hor7