202087. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gomba-fűszerkeverék előállítására magasabbrendű gombák tenyésztésével mezőgazdasági és élelmiszeripari hulladékokon
HU 202087B 3 4 1. táblázta APhaneromchaete chrysosporium gombatörzs tenyész-szűrletében folytonos fermentációnál mért enzimek, az enzimaktivitás mérési paraméterei és az elért aktivitásértékek Enzimek megnevezése kódszáma Szubsztrát Inkubálási hőmérséklet CQ Inkubálási idő (perc) Inkubálási PH Aktivitás egység Elért aktivitásértékek Cellulóz (Ci) E.GNr. 3.2.14. Szűrőpapír cellulóz 1% 40 60 4,5 mgglükóz/h 2 Cellulóz (Cx) E.CNr. 3.2.14. KarboximetU cellulóz 1% 50 60 4,5 dm3/h/dm3 5--15 dm3/h/dm3 a-amüáz E.CNr.3.2.1.1. keményítő 37 15 7,0 U/dm3 (Spofa teszt) 300-400 Amüóglükozidáz E.CNr. 3.2.1.3 keményítő 4% 60 60 4,2 lgglükóz/h (Nardencég módszere) 4 Proteáz E.C.Nr.3.4.2.4. hemoglobin 1% 30 60 3,5 PAg (aktivitás tirizinegységben kifejezve) 50-60 Penészgombák szubmersz viszonyok közötti tenyésztése all. világháború idején a penicillin antibi- 30 otikum fermentációjával kezdődött. A magasabbrendű gombák, az ún. ehető gombák szubmersz tenyésztésével főként a svédországi Uppsala Egyetemen, azUSA-ban, Kanadában és hazánkban foglalkoztak. Svédországban a Sporotrichum pulverulen- 35 tűm gombatörzset használták élelmiszeripari fehérjetermelésre. Biotech fermentorokban 43 óra alatt 9-10 g/dm3 micéliumhozamot értek el. A fermentáció során képződő enzimeket nem hasznosították. [Hofsten, 40 B. V. és Rydén, AL. (1975); Biotechnoi. Bioeng., 17.. 1183]. Az USA-ban Agaricus és Morchella gombák szubmersz szaporítására végeztek kísérleteket. Az agaricus campestris és az Agaricus bisporus tör- 45 zsekkel szakaszos fermentációval 2% micéliumhozamot értek el 72-120 órás tenyészidő esetén. [Humfeld, H. és Sugihara, T. F. (1952); Mycologia, 44,605.]. A Basidiomyceteshez tartozó Helvellaceae csa- 50 Iád Morchella génusának több speciesével (M. esculenta, M. bispora, M. hortensis, M. crassipes, M. angusticeps stb.), folytattak nádmelaszon gombamicélium előállítást az USA-ban. [Szuecs, J. (1956); US Patent 2.761.246., Szuecs, J. (1958); US Patent 55 2.850.841., Gilbert, F. A. (1960); Mycologia, 52. 201.] Kanadában ipari szennyvízben a Morchella speciesek szaporítására végeztek intenzív kutató munkát [Kosaric, N. és Miyata, N. (1977); University of 60 Western Ontario, London, Ontario, Canada (Egyetemi Kiadvány)]. Hollandiában az Agaricus bisporus törzs fehér változatának alkalmazásával szakaszos fermentációval 8-10 nap alatt érték el az 1,1% micéliumhoza- 65 mot [Dijkstra, C. J., Scherrers, W. A. és Wiren, T. O. (1972); Antonie van Leenwenhoek, 3Ä, 329]. Magyarországon Pleurotus ostreatus és Agaricus campestris törzsek fagyasztott gombacsírájának előállítására a 181.600. számú (1983) szolgálati találmányban található eljárás. A találmány szerint úgy járunk el, hogy célszerűen süllyesztett, aerob körülmények között tenyésztett ehető gombatörzset az élelmiszeriparban alkalmazott különböző fűszerekkel és adalékokkal keverünk. Ugyancsak a találmány tárgya az eljárás nagy fehérjetartalmú, gomba-alapú fűszerkeverék előállítására, melynek során gomba-alapanyagként kisebb fehérjetartalmú termesztett vagy vadon élő gombák termőtestjcit vagy azok szárítmányát alkalmazzuk. Természetesen alkalmazhatjuk ezeket fermentorban tenyésztett ehető gombákkal keverve is. Az alábbi példákban a találmány szerinti eljárást részletesen ismertetjük: 1. példa Phanerochaete chrysosporium malátás ferdeagar tenyészetéről oltott, rázott, 24 órás inokulummal 6 din-es nyíltrendszerű, egyfokozató keverttank-reaktort (BIOSTAT) oltunk. Az inokulum mennyisége 10%, tenyésztés hőfoka 31 *C, keverés forduktszsjma460ford/perc, a levegő térfogatárama 1 dm3/dm3/min. Az inokulum táptalaj korpakivonatot, élesztőkivonatot, szójalisztet, kukoricalekvárt és ásványi sókat tartalmazó tápközeg (pH: 4,5). A fermentáció során 0,06 h'1 hígítási sebességet alkalmazunk. A fermentáció szénforrásaként búzaszalma hidrolizátumot (őrölt búzaszalma 2% H2S04-el nyomás alatti hőkezeléssel hidrolizálva) bioszanyagokkal és 3