202034. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új tetraploid és biszabololdús kamilla populációk előállítására
1 HU 202034 B 2 Az így kiszelektált növényeket valamennyi már kivirágzott virágfej eltávolítása után 18-24 °C közötti nappali hőmérsékleten és 12-14 °C éjjeli hőmérsékleten, továbbá legalább 14 órás naphossz mellett tartva hagyjuk elvirágozni, miközben 4 hét időtartamon át valamennyi elvirágzott vagy röviddel a szétesés előtt levő virágfejet vetőmag nyerése céljából learatjuk. A négy hét alatt a növényeket melegházban tartjuk. Körülbelül 20-35 °C hőmérsékleten, léghőmérsékleten való szárítás után kapjuk például a találmány szerint nyerhető kamilla szaporító anyagát. E kiszelektáláshoz további ismérvekként még a következők jöhetnek számításba: a) Körülbelül egyidejű virágzás, b) egyenletes tűlevelű elágazás és körülbelül 10 cm-es, előnyösen 5 cm-es virágelhelyezkedési sáv, c) nagy virágfejek,a melyeknek külső átmérője körülbelül 30 mm (20 és 40 mm között), előnyösen 25-35 mm. A járulékos a), b) és/vagy c) ismérvek alkalmazása például nagyobb virág- és gyógyszemyerést eredményez, továbbá a kamillát alkalmasabbá teszi a gépi betakarításra. Ha a már ismert tetraploid kamillákból indulunk ki, akkor az előzőekben ismertetett szelektálás, valamint adott esetben a további szelektálási és szaporítási műveletek is hasonló módon mennek végbe. Ha olyan kamillát kívánunk előállítani, amelynél a szárított virágfejekre vonatkoztatva legalább 100 mg% kamazulén tartalmon és legalább 200 mg % (-)-a-biszabolol-tartalmon kívül még nagy a virágtermés is és amely jobban alkalmas a gépi betakarításra, akkor ajánlatos a következőképpen eljárni: A kiszelektált növényeket (mint az előzőkben ismertettük) vegetatív úton dugványok révén szaporítjuk és 3-5 generáción keresztül kiválogatjuk, amely kiválogatást mindig az elő-zőekben meghatározott ismérv, valamint adott esetben a járulékos a) - c) ismérvek alapján végezzük. Az említett ismérvek alapján kikeresett növényeket klónoljuk, a klónolt növényekből vetőmagvakat nyerünk, az ezekből kapott növényeket ismét az előzőleg megadott legkevesebb kamazulén és biszabolol tartalomra, valamint adott esetben a járulékos a) - c) ismérvekre kiszelektáljuk és az utóbbiakból ismét vetőmagvakat nyerünk. A vetésnek, a legalább 100 mg % kamazulén és legalább 200 mg % (-)-ct-biszabolol-tartalomra (50 mg% alatti többi biszaboloidra), valamint adott esetben a járulékos a) - c) ismérvekre való szelektálásnak, továbbá a vetőmagvak nyerésének sorozata 3-5-ször ismételhető. Ehhez csatlakozik ismét egy vetési, az előzők szerint végrehajtott szelektálási (esetleg klónolási), majd vetőmag nyerési műveletsorozat. A végül kapott vetőmag képezi azután a találmány szerinti kamilla szaporító anyagát. A dugványos szaporítást a következőképpen végezzük: A dugványos szaporításhoz a kiinduló növényeket (klónolt anyanövényeket) rövid napos viszonyok között bimbó nélküli rövid hajtásokként kell kiképezni. Ezt a téli félévben melegházban, járulékos világítás nélkül vagy klímakamrákban 6-10 órás, előnyösen 8 órás naphosszak mellett és 10-15 °C, előnyösen 12 *C hőmérsékleten végezzük. A klónoláshoz, illetve szaporításhoz alkalmasaka levél-, hajtás- és főként a rövid hajtás(oldalhajtás-)dugványok. A meggyökereztetésük 12-18 °C, előnyösen 15 “C hőmérsékleten és 12-16 órás, előnyösen 14 órás naphosszaknál, körülbelül 100% relatív nedvességtartalmú légtérben történik. Talajként például 1:1 arányban összekevert tőzeg és homok keverék alkalmazható, használható azonban tiszta kvarchomok, kőgyapot-dugványkocka, tőzeg-dugványkocka és hasonló is. A kivetéshez például a következő talajféleségek alkalmazhatók: Kertiföld, humusz, közepesen kötött agyagos talaj, agyagos vagy humuszos homoktalaj. A kivetést melegházban lehet végezni, azonban végezhető szabadföldön is. A növények csírázásához és növeléséhez kellő hőmérséklet 12-14 'C, előnyösen 18 - 20 °C között van. Ha a vetés szabadföldön történik, ezt előnyösen ősszel (szeptember, október) vagy tavasszal (március, április) végezhetjük. Ezek az időpontok a kamilla termesztéséhez alkalmas valamennyi területre érvényesek (így az északi félgömbre, a mérsékelttől a szubtrópusi tájakig terjedő területekre is). Az új, a találmány szerinti kamilla a valódi kamillák kultúrnövény csoportjában tartozik. A botanikai megjelölés Matricari chamomilla L. (szinonima: Chamomilla recutita (L.), Rauschert) és az 1. igénypontnak a hatóanyagokra vonatkozó adataival van meghatározva. A kamazulén, (-)-a-biszabolol és biszabololoxid hatóanyagokra megadott értékek arra a virág-kifejlődési állapotra vonatkoznak, amit akkor ér el a növény, amikor egy virágfej valamennyi csővirágának 30-70%-a, főként 40-60%-a már Irinyiit. A hatóanyagok meghatározásához használt virágokat ebben az időben takarítjuk be és ezután 40 °C hőmérsékleten 72 óráig szárítószekrényben szárítjuk. Ha a kamilla virágok aratását olyan időben végezzük, amikor a virágok nyílása már előrehaladott állapotban van, azaz egy virágfej csővirágának már közel 100%-a ki van nyílva (például a virágfej már teljesen kinyílt állapotban van) és/vagy ha a betakarított virágok szárítását 40 °C-nál magasabb hőmérsékleten végezzük, akkor a kamazulén és (-)-a-biszabolol hatóanyagtartalom kisebb lehet, mert magasabb szárítási hőmérsékleteken és/vagy az ideálisnál későbbi aratás esetén az azulén és biszabolol erősebb leépülése következhet be. Az 1. igénypontban az „egyéb biszaboloidok” kifejezés alatt főként (-)-a-biszabololoxid A és B anyagot, valamint (-)-a-biszabololoxid A anyagot értünk. A találmány szerinti kamilla fajta éterikus olajának további részei az en-in-diciklo-éter, famezen, spatulenol és kisebb koncentrációkban különböző könnyen illő terpén-szénhidrogének. Az előbbiekben ismertetett módon aratott találmány szerinti kamilla 40 °C hőmérsékleten szárítószekrényben szárított virágai például 100-200 mg % kamazulént, 200-450 mg % (-)-a-biszabololt és csak kevés, 5-50 mg % közötti mennyiségű más biszaboloidot tartalmaznak. A adatok a virágok abszolút száraz tömegére vonatkoznak. Ezt az abszolút száraz tömeget a találmány szerinti kamilla virágaiból vett külön mintának szárítása révén határozzuk meg, amely szárítást szárítószekrényben 105'C hőmérsékleten a tőmegállandóság eléréséig (72-96 óráig) végezzük. A például 35-50 ”C hőmérsékleten szárított virágok (gyógynövények) hatóanyagtartalmát azután átszámítjuk a 105 ’C hőmérsékleten szárított virágtömeg értékeire. A találmány szerinti kamilla fenotípus szempontjából hasonló az eddig ismert tetraploid kamilla faj-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
