201962. lajstromszámú szabadalom • Eljárás renin-gátló dipeptidek és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 201962 B légtelenségek kezelésére. A találmány szerint előállított (I) általános képletű vegyületet elsősorban gyógyszerkészítmény formájában alkalmazzuk főemlősöknél, elsősorban embereknél. A gyógyszerkészítmények a hatékony mennyiségű (I) általános képletű vegyület mellett szervetlen vagy szerves gyógyászatiig alkalmnazható intranazálisan, intravénásán, szubkután, orálisan vagy intraduodenálisan. A hatóanyag mennyisége a kezelt fajtól, a testtömegtől, a kortól és az adagolás módjától függ. A gyógyszerkészítményeket a találmány értelmében a szokásos oldási, keverési, granuláló és drazsírozó eljárásokkal állíthatjuk elő. Orális adagoláshoz a hatóanyagot szokásosan adalékanyagokkal, így hordozóanyagokkal, stabilizátorokkal, vagy inert hígítóanyagokkal keverjük, és a szokásos módon alkalmas formára alakítjuk, így tablettává, drazsévá, kapszulává, vizes, alkoholos vagy olajos szuszpenzióvá vagy vizes, alkoholos vagy olajos oldattá. Inert hordozóanyagként alkalmazható gumiarábikum, magnézium, magnéziumkarbonát, kálium-foszfát, tejcukor, glükóz, magnézium-sztearil-fumarát vagy keményítő, előnyösen kukoricakeményítő. A készítmény lehet száraz vagy nedves granulátum is. Olajos hordozóanyagként vagy oldószerként például növényi vagy állati olajokat, így napraforgóolajat vagy csukamájolajat használunk. Szubkután vagy intravénás adagoláshoz a hatóanyagot vagy azok fiziológiailag alkalmazható sóit kívánt esetben alkalmas anyagokkal, így oldásközvetítőkkel, emulgeátorokkal vagy további segédanyagokkal oldattá, szuszpenzióvá vagy emulzióvá alakítjuk. Oldószerként alkalmazhatunk vizet, fiziológiás konyhasó oldatot, alkoholt, például etanolt, propándiolt vagy glicerint, valamint cukoroldatot, így glükóz vagy mannitoldatot, vagy ezek keverékét. A példákban a következő rövidítéseket alkalmazzuk: AcOH ecetsav Boc terc-butoxi-karbonil-csoport DCI Desorption Chemical Ionisation (kémiai ionizálás deszorpciója) DNP 2,4-dinitro-fenil-csoport DMF dimetil-formamid El Electron Impact (elektronbecsapódás) FAB Fas atom bombardment (gyors atombombázás) M molekulacsúcs MeOH metanol MPLC közepes nyomású oszlopkromatográfia MS tömegspektrum Az aminosavak megjelölésére a peptidkémiában szokásos hárombetűs kódot [Eur. J. Biochem. 138, 9-37 (1984)] alkalmazzuk. Ellenkező értelmű megjelölés hiányában a megadott aminosav L-konfigurációjú. Az Rf értékek meghatározását Kiesel-gélen végeztük. A találmány szerinti eljárást közelebbről az alábbi példákkal világítjuk meg anélkül, hogy az oltalmi kör a példákra korlátozódna. 5 1. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-am ino-tiokarbonil-Phe-His)-amino]-3S-hexanol la) H-His(DNP)-OH 0,42 g (1 mmól) Boc-His(DNP)-OH 5 ml dimetoxi-etánban felvett oldatához 0-5 °C hőmérsékleten 4 ml sósavval telített dimetoxietánt csepegtetünk és 1 órán keresztül 0-5 °C hőmérsékleten, majd 3 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet vákuumban bepároljuk és a maradékot toluolban felvesszük, ismét bepároljuk és toluolban ismét felvesszük. így 0,5 g cím szerinti vegyületet kapunk hidroklorid formájában. Rf = 0,16 (metilén-klorid/MeOH/AcOH/víz 70:30:1:1) lb) Boc-Phe-His(DNP)-OH 0,5 g (1 mmól) H-His(DNP)-OH-hidroklorid 12,5 ml 0,25 n nátrium-hidrogén-karbonát oldatban felvett elegyéhez szobahőmérsékleten 0,362 g (1 mmól) Boc-Phe-hidroxi-szukcinimid-észter 5 ml etanolban és 5 ml THF-ben felvett oldatát adagoljuk. A reakcióelegyet 3 napon keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd 0,83 gcitromsawal elegyítjük, amelynek hatására a cím szerinti vegyület olajos formában kiválik. A terméket metilén-kloriddal extraháljuk, a szerves fázist vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk és a maradékot kevés etil-acetáttal elegyítjük. Diizopropil hozzáadásával kicsapjuk, majd szűrjük a cím szerinti vegyületet. Kitermelés 0,74 g (83%). Rf = 0,43 (metilén-klorid/MeOH 7:3) MS (FAB): 569 (M +1). le) 2S-Amino-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol 214 mg (0,513 mmól) 3-Boc-4S-ciklohexil-metil- 2,2-dimetil-5-(3-(2-piridil)-propil)-oxazolidin 10 ml dimetoximetánban felvett elegyéhez jeges hűtés közben 5 ml sósavval telített dimetoxietánt csepegtetünk és az clegyet egy órán keresztül 0 °C hőmérsékleten, majd 5 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. Ezután vákuumban bepároljuk, a maradékot toluolban felvesszük, ismét bepároljuk és toluolban ismét felvesszük, így 179 mg cím szerinti vegyületet kapunk hidroklorid formájában. 1 d) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-(Boc-Phe- His(DNSP))-amino)-3S-hexanol 1,5 g (3,18 mmól) 2S-amino-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol-dihidroklorid (le. példa) és 1,8 g (3,18 mmól) Boc-Phe-His(DNP)-OH (lb példa) 15 ml abszolút dimetil-formamidban felvett oldatához 0,59 g (6,36 mmól) 1-hidroxi-benzotriazol-hidrátot adunk, jégfürdőn mintegy 4 °C hőmérsékletre hűtjük, majd ezen a hőmérsékleten egymásután 2,44 ml (19,1 mmól) N-etil-morfolint és 0,65 g (3,18 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk. A reakcióelegyet egy órán keresztül fürdőn, majd 7 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd egy éjszakán keresztül állni hagyjuk. Ezután újabb 0,9 g (1,59 mmól) Boc-Phe-His(DNP)-OH-t, 0,28 g (3,18 mmól) 1-hidroxi-benzotriazol-hidrátot és 0,32 g (1,58 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá és további 10 órán keresztül szobahő6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
