201953. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új nukleozidszármazékok és azokat hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 201953 B midinból kiindulva. Ez utóbbi anyagot J. J. Fox eljárásával [J. Org. Chem. 28, 936 (1963)] állítjuk elő. 0,52 g, 22,4 mmól nátrium 1,21 száraz etanolban készült oldatához hozzáadunk 10,5 g, 22,4 mmól 2,3’-0-anhidro-5’-tritil-timidint, és a reakcióelegyet 6 órán át visszafolyatás mellett forraljuk. Ezután az elegyet lehűtjük, és 1 n hidrogén-kloriddal semlegesítjük. Az elegyről az oldószert vákuumban lepároljuk, és a kapott olajat szilikagélen kromatográfiás eljárással (flash-kromatográfia) tisztítjuk. Eluensként 96:4 térfogatarányú kloroform, metanol elegyet alkalmazunk. Az l-(2’-dezoxi-5’-tritil- D-lixofuranozil)-2-etoxi-timidint 30%-os hozammal nyerjük. 3,5 g, 16,8 mmól 2-etoxi-timidin-származékot 2,2 ml trietil-amint tartalmazó 35 ml DMF-ben oldunk. A hideg oldatot kén-hidrogénnel telítjük. A reakcióelegyet acélbombába helyezzük, és 95°C hőmérsékletre melegítjük. 27 óra reagáltatás után vékonyrétegkromatográfiás eljárással ellenőrizve már nincs jelen kündulási anyag. A reakcióelegyet néhány órán át nitrogéngázzal öblítjük, majd jeges vízbe öntjük. A kapott terméket kiszűrjük, és szilikagélen kromatografálással (flash-kromatográfia) tisztítjuk. Eluensként 97:3 térfogatarányú kloroform-metanol elegyet alkalmazunk. Az l-(2’-dezoxi-5’-tritil-ß-D-lixofuranozil)-2-tio-timint 37%-os hozammal nyerjük. A pH 1-nél kapott 277 nm és a pH 11-nél kapott 241 nm UVmax 2-tio-timidin jelenlétére utal. A tio-timidin-származék 3’-helyzetű hidroxilcsoportját a következő módon mezilezzük: 1,25 g l-(2’-dezoxi-5’-tritil-ß- D-lixofuranozil)-2-tio-timidin 15 ml száraz piridinben készült oldatához 5 °C hőmérsékleten négy részletben, 6 óra alatt hozzáadunk 665 ml, 3,5 ekvivalens metán-szulfonil-kloridot. A reakcióelegyet éjszakán át 5 °C hőmérsékleten tartjuk, majd jeges vízre öntjük. A képződött terméket kiszűrjük. A terméket szilikagélen kromatografálva (flash-kromatografálás) tisztítjuk. Eluensként 1:1 térfogatarányú etil-acetát, hexán elegyet alkalmazunk. A terméket 50%-os hozammal nyerjük. 0,3 g, 6 mmól lítium-azidot 20 ml száraz DMF- ben oldunk, és 0,72 g, 1,2 mmól l-(2’-dezoxi-3’-mezil-5’-tritil-ß-D-lixofuranozil)-2-timidint adunk hozzá. A kapott oldatot 85 °C hőmérsékleten 2,5 órán át melegítjük. A reakcióelegyet ezután jeges vízbe öntjük, és a kapott terméket kiszűrjük. A terméket szilikagélen kromatografálva (flash-kromatografálás) tisztítjuk. Eluensként 98:2 térfogatarányú kloroform, metanol elegyet alkalmazunk. A terméket 78%-os hozammal nyerjük. A 2100 cm^-nél kapott IR sáv alkil-azid jelenlétét mutatja. UV vizsgálattal megerősítettük a 2-nitrotimidin jelenlétét. A végterméket úgy állítjuk elő, hogy 0,1 g 3’-azido-3’-dezoxi-2-tio-5,-tritil-timidinről a védőcsoportot 5 ml 80%-os ecetsawal 45 percig gőzfürdőben végzett kezeléssel eltávolítjuk. 0,021 g 3’-azido- 3’-dezoxi-2-tio-timidint nyerünk szilikagélen végzett kromatografálással. Eluensként 96:4 térfogatarányú kloroform, metanol elegyet alkalmazzuk. A terméket 37%-os hozammal nyerjük. 11 6. Példa 3’-Azido-3’-dezoxi-2-etoxi-timidin előállítása 25 ml száraz etanolban oldott 2,6 g, 7,5 mmól 3’-azido-3’-dezoxi-5’-mezil-timidinnek 2 ekvivalens, 1,08 g, 7,5 mmól kálium-karbonáttal 5 órán át való visszafolyás mellett végzett forralásával 3’-azido-3’-dezoxi-2-etoxi-timidint állítunk elő. Az oldatot semlegesítjük, és vákuumban olajjá pároljuk be. A kapott olajat szilikagélen kromatografálva (flashkromatografálással) tisztítjuk. Eluensként etü-acetát, metanol elegyet alkalmazunk. A kívánt terméket 39%-os hozammal különítjük el, A kapott termék olvadáspontja 98-100 °C. 7. Példa 3’-Azido-3’-dezoxi-2-metoxitimidin előállítása 1,6 g, 4,6 mmól 3’-azido-3’-dezoxi-5’-mezil-timidinből a 3. példában ismertetett eljárással 3’-azido- 3’-dezoxi-2-metoxi-timidint állítunk elő. A terméket 42%-os hozammal nyerjük. A kapott termék olvadáspontja 47-51 °C. 8. Példa 3’-Azido-2’,3’-didezoxi-5-metil-izocitidin előállítása 0,35 g, 1,4 mmól 2,5’-0-anhidro-3’-azido-3’-dezoxi-timidint ammóniával előzetesen telített 15 ml meanolban oldunk, és bombába helyezzük, olajfürdőben 77 °C hőmérsékleten tartjuk 48 órán át [Skaric és Matulic-Adamic, Helv. Chim. Acta. 62,2179 (1980)]. A reakcióelegyet vékonyrétegkromatográfiás vizsgálattal elemezve, eluensként 6:1 térfogatarányú kloroform, metanol elegy alkalmazásával azt találtuk, hogy a reakció nem zajlott le teljesen. A reakcióelegyről az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a visszamaradó olajat szilikagél oszlopon kromatografáljuk. Eluensként 6:1 térfogatarányú kloroform, metanol elegyet alkalmazunk. A megfelelő frakciókat egyesítve 38%-os hozammal 0,14 g, 0,53 mmól cím szerinti terméket nyerünk. A kapott termék olvadáspontja 107- 108 °C. 9. Példa 3’-Azido-5-klór-2’-3’-didezoxiuridin előállítása 0,25 g , 1 mmól 3’-azido-2’,3’-didezoxiuridint 2 ml száraz dimetil-acetamidban (DMAC) oldunk, az oldatot 0 °C-ra hűtjük, és 2 ml DMAC-os 0,5 mól/l-es hidrogén-klorid-oldatot adunk hozzá. A reakcióelegyhez ezután 2 részletben 10 perc alatt 0,277 g, 1,6 mmól m-klór-perbenzoesavat adunk, és az elegyet hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni. 2 óra múlva 4 ml vizet adunk az elegyhez, majd az oldatot szűrjük. A vizes DMAC-os oldatot 3x3 ml dietil-éterrel extraháljuk, az extraktumról a dietilétert vákuumban lepároljuk, és a visszamaradó olajat szilikagél oszlopon kromatografáljuk. Eluensként 15:1 térfogatarányú kloroform, metanol elegyet alkalmazunk. A megfelelő frakciókról vákuumban lepároljuk az oldószert, majd az így kapott olajad dietil-éterből kristályosítjuk. íly módon 20%-os hozammal 58,5 mg, 0,2 mmól terméket nyerünk. A kapott termék olvadáspontja 169-170 °C. UV (nm): pH 1-nél 7max= 276 (e= 7400), ■ymin = 276 (e = 500); 12 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
