201807. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biomasszamentes avoparcin antibiotikum előállítására
HU 201807 B 11 12 V táblázat A kísérlet sorszáma Az elsődleges eluátum pH-ja Eluátum frakció Kapott g Az eluátum eluátum g^g Az eluátum hatóanyagtartalma g 1. 10,3 L 452,7 43,69 19,78 2. 332,0 36,81 12,22 3. 314,1--2. 10,8 1. 499,2 41,41 20,67 2. 341,5 26,50 9,05 3. 315,5--3. 10,6 1. 495,2 42,08 20,84 2. 334,8 29,64 9,92 3. 310,6--4. 10,5 1. 469,4 43,02 20,19 2. 330,1 36,40 12,02 3. 306,2-. -5. 10,6 1, 488,3 41,93 20,47 2. 334,5 32,26 10,79 3. 304,3 6,97 2,12 Összes kinyert avoparcing-ban 158,07 összes bevitel az adszorbens iszapban g-ban: 157,5 Az eluátumfrakciókat egyesítjük, és a terméket 2 méter átmérőjű kísérleti berendezsébcn, fúvóka alkalmazásával porlasztva szárítjuk. A levegő bevezetési hőmérséldete 250 ‘C, kivezetési hőmérséklete 100 "C. A termék hatóanyagtartalma 52%. Az avo- 30 parcin kinyerése a szárítási lépésben lényegében kvantitatív. Optikai forgatóképesség: [a]2 d - -95" (± 3,8")(c-0,780,vízben). 9. példa 35 Avoparcin közvetlen adszorpciója fermentléből savval aktivált montmorillonit-kalcium alkalmazásával: az „üres” adszorbens reciklizálásának a befolyása (A fermentálást a 2. példában megadottak szerint 40 végeztük) Kísérletsorozatot végeztünk az eljárás hatékonyságának a vizsgálatára reciklizált, „üres” adszorbens alkalmazásával. A kísérletsorozat első kísérletében a következő- 45 képpen járunk el: 500 g, avoparcin fermentációs gyártásából származó fermentlevet 100 g vízzel hígítunk, és pH-értékét 98%-os kénsav hozzáadásával 1,9-2,1-re állítjuk. Ezután 150 g montmorillonit-kalcium adszor- 50 benst (Fulmont 300 C, Laporte Earths Ltd.) adunk hozzá, és a szuszpenziót 15 percig keverjük. Az avoparcinban dús adszorbenst az „üres” fcrmentlétől csőcentrifugában elkülönítjük, azoldatlan részt vízben reszuszpendáljuk, s az így kapott 800 g szusz- 55 penziót második centrifugálásnak vetjük alá, hogy a micélium szilárd anyagait az adszorbcnstől teljesen elkülönítsük. A centrifugamaradékot 500g vízben reszuszpendáljuk, és a pH értékét 36%-os vizes ammóniaoldat- 60 tál 10,6-ra állítjuk. Hozzáadunk 5 ml 0,1 tömeg/térf.%-os A150 flokkuláns poliakrilamid-oldatot a szűrés elősegítésére, majd vákuumszűréssel kapjuk az elsődleges eluátumot. A szűrőkalácsot kétszer mossuk egyenként 150 ml híg vizes ammó- 65 niaoldattal, így másodlagos és harmadlagos eluátumfrakciót kapunk. A harmadlagos eluátumot reciklizáljuk, és a következő előállítás során az első mosáshoz használjuk. Az így kapott „üres” adszorbenst megtartjuk, és reciklizáljuk a kísérletsorozat következő kísérletébe. A kővetkező kísérleteket a fentiekben leírt eljárással végezzük a következő kivétellel: a. az előző kísérletből származó üres adszorbenst alkalmazzuk, azonban 15 g friss montmorillonitkalciumot (Fulmont 300 C) adunk hozzá; b. az adszorbens hozzáadása után a pH értékét 98%-os kénsavval 2,3-ra visszaállítjuk; c. az eluáló lépésben első mosófolyadékként az előbbi kísérletből reciklizált, harmadlagos eluátumot használjuk. E kísérletsorozatunk 12 kísérletből állt, és ezeknek összesített eredményei az alábbiak: Avoparcin Összes fennentlé-bevitel 135,1 A vizes fázisban összesen jelen van 128,8 Veszteség az 1. „üres” fermentlében 11,1 Yeszteség a 2. „üres” fermentlében 2,4 Összes veszteség 13,5 Összesen kinyert hatóanyag az cluátuinban 116,0 Hatásfok (kinyerés) fermentlé/eluátum% 85,9 A sorozatban az adszorpciós képesség nem romlik, valamint az cluálás során a szuszpenzió szűrhetősége sem változik. A visszanyert adszorbens végső száraz tömege 174,5g. A kinyert avoparcin jellemzői: [aj d - -95* (± 3,8") (c - 0,780, vízben). 7
