201805. lajstromszámú szabadalom • Eljárás UK-6 1689 antibiotikum mikrobiológiai uton történő előállítására valamint a hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

HU 201805 B

Az említett törzsek Actinomadura roseorufa 53 664, ATCC 53 674, ATCC 53 665, illetve ATCC 53 666 azonosító jelöléseket kapták.

Az FD-27684, FD-28474 és FD 28499 törzsek rendszertani meghatározását L.H.Huang végezte az alábbiak szerint:

A ferde agárról a törzseket ATCC 172 táptalajra oltjuk és négy napon át 28 °C hőmérsékleten rázatjuk. 20 percen centrifugálás után a sejteket steril desztillált vízzel mossuk háromszor, majd az Ac tinomycetes-ek meghatározására általánosan használt táptalajokra oltunk.

A tenyészeteket 28 °C hőmérsékleten növesztjük ki, és az értékelést különböző idő elteltével, leginkább 14 nap múlva végezzük. A színek megnevezésére az általánosan használt terminológiát használjuk, de pontosabb a színmeghatározás, ha a Color Harmony Manual (negyedik kiadás) színskálájával való összehasonlításra támaszkodunk. A teljes-sejt aminosav analízise Becker és munkatársai módszerével történik [Appl. Microbiol., 12: 421-423 (1964)]. A teljes-sejt cukrait Lechevalier eljárásával [J.Lab.Clin. Med., 71: 934-944 (1968)] és Staneck és Roberts módszerével [Appl.Microbiol. 28: 226-231 (1974)] határozzuk meg. Összehasonlítási mikroorganizmusként az Actinomadura roseorufa ATCC 39 697 törzset használták.

A tenyészetek tulajdonságainak meghatározásaihoz az alábbi táptalajokat és módszereket használjuk:

1. ) Tripton/élesztőkivonatos táptalaj (ISP1 közeg, Difco);

2. ) Elesztőkivonat/malátakivonatos agar (ISP2 tápközeg, Difco);

3. ) Zablisztes agar (ISP3 tápközeg, Difco);

4. ) Szervetlen só/keményítős agar (ISP4 tápközeg, Difco);

5. ) Glicerin/aszparaginos agar (ISP5 tápközeg, Difco);

6. ) Pepton/élesztőkivonat/vasas gar (ISP6 tápközeg, Difco);

7. ) Szacharózos Czapek agar - S.A. Walksman, the Actinomycetes, 2. kötet; 1. tápközeg; 328. oldal, 1961:

8. ) Glükóz/aszparaginsav agar - A.A. Waksman, The Actinomycetes, 2. kötet. 2. tápközeg, 328. old;

9. ) Bennett-féle agar - S.A. Waksman, idézett mű, 30. tápközeg; 331. oldal;

10. ) Emerson-féle agar - SA. Waksman, idézett mű, 28. tápközeg; 331. oldal;

11. ) Nutrient agar - SA. Waksman, idézett mű, 14. tápközeg, 330. oldal;

12. ) Gordon és Smith-féle tirozinos agar - R.E. Gordon és M.M.Smith, J. Bacteriol., 69: 147-150 (1955);

13. ) Kazeines agar - R.E. Gordon, idézett cikk;

14. ) Kalcium-malátos agar - S.A. Waksman, Bacteriol. Rec., 21:1-29 (1957(;

15. ) Zselatin - R.e.Gordon és J.M. Mihm, J. Bacteriol., 73:15-27 (1957);

16. ) Keményítő - R.E.Gordon és J.M.Mihm, idézett cikk;

17. ) Szerves nitrátos táptalaj - R.E.Gordon és J.M.Mihm. idézett cikk;

18. ) Dextróz/nitrátos táptalaj - SA.Waksman,

5

idézett mű, 1. táptalaj, melyben 3 g dextróz szerepel a 30 g szacharóz helyett és az agart elhagyjuk;

19. ) Burgonya/sárgarépás agar - M.P.Lechevalier, JXab.and Clinical Mcd., 71:934-944 (1968), de a következő módosítással: 30 g burgonya, 2,5 g sárgarépa és 20 g agar.

20. ) 2%-os csapvizes agar;

21. ) Ganze-féle 1. számú ásványisós agar - G.F.Gauze és munkatársai, Problems in the dassifivation of antagonistic Actinomycetes (angol kiadás), 13. oldal (1957);

22. ) Gauze-féle 2. számú szerves komponensű agar - GJF.Gauze, idézett mű;

23. ) Lefölözött tej - Difco;

24. ) Cellulózhasznosítás:

a) HXJensen, Proc.Linn.Soc.N.S.W. 55: 231- 248 (1930);

b) M.Levin és H.W.Schoenlein, A compilation of culture media, 2511. számú táptalaj, (1930);

25. ) Szerves savak hasznosítása-R.E.Gordon és munkatársai, INt.J.Syst.Bacteriol., 24: 54-63 (1974);

26. ) Savtermelés szénhidrátokból-R.E.Gordon és munkatársai (1974), idézett cikk;

27. ) Hippurát és eszkulin hidrolízise - R.E.Gordon és munkatársai (1974); idézett cikk;

28. ) Adenin, hipoxantin, xantin és karbamid lebontása - R:E.Gordon és munkatársai (1974), idézett cikk;

29. ) Lizozim-rezisztencia-R.E.Gordon és munkatársai (1974), idézett cikk;

30. ) Szénhidráthasznosítás - C-2 táptalaj, H. Nonomura és Y.Ohara, LFerment. Technoi., 49:887- 894 (1971);

31. ) Hőmérsékleti igény-ATCC Culture collection catalogue 15. kiadás, 608. oldal (1982), ATCC 172 táptalaj.

Az FD-27684 (ATCC 53666) törzs tenyészetek leírása:

Élesztőkivonat/malátakivonatos agaron - jó növekedés, vöröses rózsaszíntől vörösig (6 l/2ia, 7ia, 6ia); kiemelkedő, ráncos telep fehér légmicélumokkal; fonák oldal vörös (7ia); oldható festékanyag nincs.

Zablisztes agaron - mérsékelt növekedés, krémszínű (2ca), gyengén kiemelkedő, sima, különálló telepek; légmicéliumok nincsenek vagy elszórtan, fehérek; fonák oldal krémszínű (2ca); oldható színanyag nincs.

Szervetlen só/keményítős agar - a növekedés gyenge vagy mérsékelt, színtelentől krémszínűig (2ca), vékony, sima telep; légmicélium nincs vagy csak elszórtan, fehér; fonák oldal olyan, mint a felszíni; oldható színanyag nincs.

Glicerin/aszparaginos agaron - a növekedés gyenge vagy mérsékelt, krémszínű (2ca) telep rózsaszínű-vörös pontokkal (6ea, 6 l/2gal); légmicéllium nincs vagy csak elszórtan, fehér; fonál oldal színtelentől krémszínűig (2ca), vörös pontokkal; oldható festékanyag nincs.

Szacharózos Czapek-féle táptalajon - a növekedés gyenge vagy mérsékelt, krémszínű rózsaszín - vörös pontokkal (5ea, 6 l/2ia); légmicélium nincs vagy csak elszórtan, fehér; fonák oldal színtelen vagy krémszínű (2ca); oldható anyag nincs.

6

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

4