201800. lajstromszámú szabadalom • Eljárás t-PA és SCU-PA termelésének növelésére
HU 201800 B nációját közvetlenül a vérrög vagy a lehetséges vérrög helyén szolgáltatjuk. így a beadás intravénás, koszorúéren belüli vagy hasonló útja (pl. injekcióval vagy infúzióval) az előnyös. Amint a jelen találmány hátterét vizsgálva megemlítettük, a t-PA és az SCU-PA endogén trobolitikus szerek, amelyek a véredényekben úgy működnek, hogy a plazminogént átalakítják plazminná. Magát a heparint alkalmazzák a kezelésben, gyakran a sebészi beavatkozás különböző típusaival együtt, beleértve a koszorúérsebészetet, trombózisellenes szerként. A jelen találmánynak ezen szempontja szerint heparint vagy kis molekulatömegű heparint és egy endotéliális sejtnövesztő faktort alkalmazunk a t-PA és/vagy SCU-PA endogén (in vivo) termelésének stimulálására. így a jelen találmány szerint heparin vagy kis molekulatömegű heparin és egy endotéliális sejtnövesztő faktor beadása hasznos a trombózis kezelésére. Ezen kívül a heparin és egy endotéliális sejtnövesztő faktor közti potencirozó hatás t-PA és/vagy SCU-PA termelésében lehetővé teszi a heparin (vagy kis molekulatömegű heparin) alacsonyabb szintű beadását trombózis elleni szerként, mint ez jelenleg szükséges. A heparin terápia fő mellékhatása a vérzés. Ezen kívül Spann J.F. és munkatársai (Drugs, 28, 465-483 és 478 /1984/) beszámolnak arról, hogy egy koszorúér vérrög eloszlatása után (sztreptokináz koszorúéren belüli beadásával) újra elzáródás ment végbe egy 159 betegből álló tanulmányozott csoport átlag (17%-ában a korai intravénás heparin kezelés ellenére. A heparin vagy kis molekulatömegű heparin és egy endotéliális sejtnövesztő faktor beadása jelen találmány szerint hasznos lehet az ilyen újra elzáródás megelőzésére a t-PA vagy SCU-PA endogén szintjének stimulálásával. Hogy megkíséreljék az ilyen újra elzáródás megelőzését, Spann és munkatársai (lásd fentebb idézett munka) beszámoltak 30000 egység/naptól felfelé terjedő heparin-dózis alkalmazásáról egészen addig az adagig, hogy eléljék: a részleges tromboplasztinidő a normálisnak 2-3-szorosa legyen. A heparinnak vagy kis molekulatömegű heparinnal és egy endotéhális sejtnövesztő faktornak azon képessége következtében, amikor a jelen találmány szerint beadjuk, hogy stimulálja a t-PA és SCU-PA endogén termelését, magának a heparinnak az adagját az ilyen újra elzáródás megelőzésében a jelen találmány szerint nagy mértékben lehet csökkenteni. A jelen találmány előnye abban a képességben van, hogy stimulálja az endogén t-PA és SCU-PA termelését olyan körülmények között, amelyben a nagy heparin-adagnak tulajdonítható vérzés szisztematikus fenyegetése csökken (lásd Bergmann S.R. és munkatársai: Science, 220 1181-1183 /1983/). A t-PA és/vagy SCU-PA in vitro termelésének stimulálásában való felhasználásnál emlősökben, beleértve az embert is, ha erre szükség van, a heparin vagy kis molekulatömegű heparin előnyös adagja 0,1-5,0 mg/kg/nap (mintegy 1100-50000 egység/nap), és az endotéliális sejtnövesztő faktor előnyös adagja 0,1-5,0 mg/kg/nap. A heparin előnyösebb adagja 0,1-2,0 mg/kg/nap. Az ilyen adagok változhatnak a szóbanforgó betegtől és az állapot 17 súlyosságától függően. Trombózis kezeléséhez nagyobb adagok lehetnek szükségesek, hogy elvégezzék a teljes trombolizist (a rög feloldását). Az előnyös emlős a beadáshoz az ember. A heparin vagy kis molekulatömegű heparin és egy endotéliális sejtnövesztő faktor hatásos adagjának meghatározása egy adott terápiához a gyógyszerészeti és orvosi szakterületen belüli jártasság keretén belül van. Az ilyen meghatározások a t-PA, SCU-PA, fibrinolizis, és más vér- és keringési faktorok szintjeinek megfigyelésén alapulnak. Az adott trombózisok, amelyeket a jelen találmány szerint kezelni lehet, magukban foglalják a tüdő-, koszorúér-, mélyvénás-, és agyi trombózisokat. Ezek közül a tüdő- és koszorúér trombózisok kezelése előnyös, és a tüdő-trombózis kezelése a legelőnyösebb. Egy még további szempont szerint a jelen találmány gyógyászati kompozíciót nyújt, amely egy endotéliális sejtnövesztő faktort, heparint vagy kis molekulasúlyú heparint, t-PA-t és SCU-PA-t tartalmazó sejtmentes tenyészfolyadékot tartalmaz, ahol az említett tenyészfolyadék normál humán diploid tüdő fibroblaszt tenyészetből származik, amelyhez heparint vagy kis molekulatömegű heparint és endotéliális sejtnövesztő faktort adtak. A t-PA és SCU-PA az emh'tett tenyészet általi termelődése következtében van jelen a tenyészfolyadékban. Ennek a gyógyászati kompozíciónak egy finomított formája, amelyből a 75000 feletti és 50000 alatti molekulatömegek el vannak távolítva, és ezáltal lényegében az emh'tett tenyészet által termelt t-PA és SCU-PA-t tartalmazza, előnyös. Az ilyen finomítás eltávohthatja a heparin vagy kis molekulatömegű heparin és az endotéliális sejtnövesztő faktor és proteáz-inhibitorok, mint pl. proteáz-nexin vagy plazminogén aktivátor inhibitorok jó részét. Az ilyen gyógyászati kompozíciók közül azok, amelyben az említett tenyészet által termelt t-PA és SCU-PA koncentrációja legalább 1000 ng/ml, az előnyösek. Az ECGF, p-ECGF és heparin vagy kis molekulatömegö heparin koncentrációi és előnyös koncentrációi, amelyeket a találmány in vitro szempontjainál fentebb leírtunk a t-PA és SCU-PA termelésének módszerére tekintettel, alkalmazhatók a jelen találmány gyógyszerészeti kompozíciókat illető szempontjaihoz is. Hasonlóképpen az ECGF, savas FGF, EDGF-II, a-HGF, savas HDGF és RDGF endotéliális sejtnövesztő faktorok előnyösek a jelen találmány ideillő szempontjához is. Az EDGF, savas FGF és EDGF-II a legelőnyösebbek, és az ECGF különösen rendkívül előnyös. Előnyösek továbbá a WI-38, MRC-5, IMR-90 és IMR-91 normál humán diploid tüdősejtek, amelyek közül a WI-38 a legelőnyösebb. A találmány szerinti finomítatlan és finomított gyógyászati kompozíciók főleg trombolitikus terápiában (eloszlatni vagy feloldani a vérrögöket), vagy a trombózis-ellenes terápiában (megelőzni, hogy vérrögök képződjenek vagy újra képződjenek) lehet alkalmazni. Amikor ilyan terápiában alkalmazzuk, a finomított kompozíció előnyös adagja 1-20 -1-20 mg t-PA-t és SCU-PA-t tartalmazzon. Kisebb mennyiségű t-PA és SCU-PA lehet szükséges a finomítatlan kompozícióban a heparinnak 18 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
