201565. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-alkilezett dipeptid-származékok előállítására
7 HU 201565 B 8 karbonátokat vagy foszfátokat is alkalmazhatunk. Oldószerként bármely, a peptidszintéziseknél szokásos inert oldószer felhasználható, például metilén-klorid, ecet-észter, kloroform, dimetil-formamid, dimetil-acetamid, dioxán vagy tetrahidrofurán van. A szintézis elvégezhető kevert-vizes oldószerrendszerekben is. Ezalatt vizből és vízzel keverhető szerves oldószerből álló rendszereket értünk, igy dioxán-viz, tetrahidrofurán-víz vagy dimetilformamid-víz keverékét. "Meglepő módon az olyan kétfázisú rendszerek, mint a CH2CI2-VÍZ, ecetészter-víz vagy 3-metil-tetrahidropirán-víz, bázisként nátrium-karbonát vagy kálium-karbonát jelenlétében, jó eredménnyel alkalmazható (intenzív kevertetés szükséges). A reakció általában szobahőmérsékleten kielégítő sebességgel lejátszódik. Enyhe melegítés nem káros. Magasabb hőmérsékletek, mintegy 50 °C feletti hőmérsékletek, a racemizálódás veszélye miatt nem ajánlottak, és feleslegesek is. Az eljárás során a foszfinsav-anhidrideket előnyösen feleslegben alkalmazzuk, mintegy 1,2-2,5 mól foszfinsav 1,0 mól kiindulási anyagra számolva. A foszfinsav-anhidrideket önmagukban vagy szerves oldószerben oldva csepegtetjük a reakcióelegyhez. Előnyösen alkalmazható az etil-metil-foszfinsavanhidrid, mivel az mind vízben, mind szerves oldószerekben oldható, és a belőle karbonsavakkal képzett vegyes anhidrid szobahőmérsékleten is biztosítja a kívánt közepes aktivitást. Ez a vegyület előnyösen alkalmazható egylépcsős eljárásban, mivel az anhidrid semmilyen reakciót nem mutat az aminocsoporttal. A (II) általános képletü vegyietekből bázis jelenlétében in situ képződő (VI) általános képletü vegyes anhidrid kizárólag és szinte kvantitatív kitermeléssel reagál a (VI) általános képletü arainosav-észterekkel. A vegyes anhidrid közepes aktivitása azzal a technikai előnnyel is jár, hogy csak csekély mértékű hóemelkedés figyelhető meg, és így nem lépnek fel hűtési problémák. A találmány szerinti eljárás egyik előnyös megvalósítási módja szerint a reakciót két fázisban, vízben és vízzel nem, vagy csak csekély mértékben elegyedő oldószerben, így CH2CI2, AcOEt-ben végezzük, amelyekben az (I) általános képletü reakciótermék oldódik, azonban a kiindulási anyagok és a további reagensek (szerves tercier bázisok sói, szóda, foszfinsavas sók és mások) nem vagy csak kismértékben oldódnak. A reakció racemizálódás nélkül (kisebb, mint 2%) játszódik le, és az oldószerek és reagensek víztartalma nem zavar, mivel az eljárás megvalósítható vízben vagy kétfázisú rendszerekben is szerves (NEM, EüN és második) vagy előnyösen szervetlen bázisok (pl. szóda) jelenlétében. Szerves vagy vegyes szerves közeg alkalmazása esetén a reakció után a szerves fázis vizes KHS04/K2S04-oldattal (pH=2), majd ezt követően szóda-bikarbónát oldattal végzett kirázással a kiindulási anyagoktól, valamint a szennyeződésektől megszabadíthatok. A keletkezett termék olaj formájában marad vissza a szerves fázis bepárlása után, és például hidrogénezéssel (R3=benzil- vagy nitrobenzilcsoport) vagy savas kezeléssel (R3=terc-butilcsoport) biológiailag aktiv anyaggá alakíthatók. Az (I) általános képletü vegyületek kiválóan gátolják az Angiotensin Converting Enzymes-t (ACE), illetve ilyen gátló anyagok előállításához köztitermékként szolgálnak, és így különböző típusú magas vérnyomások csökkentéséhez felhasználhatók. Ilyen vegyületek ismertek például a 4 344 949 US, 4 374 874 US, 4 350 704 US szabadalmi iratokból, az 50 800 EP, 31 741 EP, 51 020 EP, 49 658 EP, 49 605 EP, 29 488 EP, 46 953 EP és 52 870 EP közre bocsátási iratokból. Ezek a vegyületek továbbá a következő NSZK szabadalmi bejelentések tárgyát képezik: P 32 26 768.1, P 31 51 690.4, P 32 10 496.0, P 32 11 397.8, P 32 11 676.4, P 32 27 055.0, P 32 42 151.6, P 32 46 503.3 és P 32 46 757.5. A következő példák közelebbről megvilágítják a találmány szerinti eljárást, anélkül, hogy a találmány köre a felsorolt példákra korlátozódna. 1. példa Homogén eljárás 85 g S,S,S-2-aza-biciklo[3.3.0]oktán-3- -karbonsav-benzil-észter-hidrokloridot és 88 g S,N-(l-etoxikarbonil-3-fenil-propil)-alanint 500 ml metilén-kloridban szuszpendálunk. Ehhez 1 óra alatt keverés közben 120 ml etil-metil-foszfinsav-anhidridet (50X-os metilén-kloridos oldat formájában) és 200 ml trietil-amint adagolunk. 2 óra múlva vékonyréteg-kromatográfiésan (Kiesel-gól, CHCb/MeOH/AcOH 50:10:3) ellenőrizzük a reakció lefutását. Abban az esetben, ha az aminosav-benzilészter még kimutatható, további 20 ml anhidridet és 50 ml trietil-amint adagolunk a reakcióelegyhez. Ezután a reakcióelegyet néhány órán keresztül (adott esetben 1 éjszakán keresztül) szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd vákuumban bepároljuk, a maradékot metilén-kloriddal (500 ml) mintegy 1 liter össztérfogatra hígítjuk, és egyszer 500 ml káliumhidrogén-szulfát/káliumszulfát oldattal (50 g KHSO4 és 100 g K2SO4 1 liter vízben), majd kétszer 500 ml vizes 5X-os NaCOs-oldattal extraháljuk. A szerves fázist szilárd nátrium-szulfáton szárítjuk és 2- -3 cm-es Kiesel-gél rétegen szűrjük. Ezt 250 ml metilén-kloriddal vagy etil-acetáttal 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
