201550. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ikerionos szerkezetű 1,8-naftiridin-származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 201550 B 2 Emellett a vegyületek észterei is a találmány körébe tartoznak. Ilyen észterek akkor képződnek, amikor az ikerionos vegyületeket oldószerben, például metilén-kloridban bázis, például trietil-amin jelenlétében savhalogeniddel reagáltatjuk. Az I általános képletű vegyületek szolvatálatlan, valamint szolvatált formában létezhetnek, beleértve a hidratált formákat, így például a hemihidrátot. A hidrátok és más szolvátok úgy jönnek létre, hogy a szolvatálatlan vegyületet oldószerrel hozzuk érintkezésbe. Általában a gyógyászatiig elfogadható oldószerekkel, például vízzel, etanollal és hasonlókkal alkotott szolvatált formák a találmány céljaira a szolvatálatlan formákkal ekvivalensek. Bizonyos találmány szerinti vegyületek izomer és tautomer formákban létezhetnek. A találmány szerinti vegyületeket allergiaellenes szerként például asztma, allergiás vagy időszakos nátha és/vagy krónikus hörgőhurut kezelésére alkalmazhatók. A vegyületek allergiaellenes hatékonyságát olyan kísérletekkel mutatjuk ki, amelyek a vegyület anaphylaxiás hörgőgörcs gátló hatását mérik érzékenyített tengeri malacokban, amelykben antigénnel hörgőösszeszűkülést váltunk ki. Egy ilyen vizsgálati eljárásban 250-300 g-os hím Hartley tengeri malacokat használunk, amelyeket az 1. napon 5 mg ovalbumin (i.p.) és 5 mg ovalbumin I ml sóoldatban (s.c.), valamint a 4. napon 4 mg ovalbumin (i.p.) beadásával érzékenyítünk. Az érzékenyített állatokat 3-4 héttel később használjuk, amikorra már 450-500 g-osak. Az érzékenyített tengeri malacokat egy éjszakán át koplaltatjuk, és a következő reggelen 0,9 ml/kg dialuretán (0,1 g/ml) diallil- barbitursav, 0,4 g/ml etil-karbamid és 0,4 g/ml uretán) i.p. beadásával érzéstelenítjük. A légcsőbe kanült helyezünk, és az állatokat Harvad rágcsáló légzőkészülékkel lélegeztetjük percenként 50 lökettel, amelynek térfogata 5 ml. A kanül oldalcsövét egy Harvard nyomásátalakítóhoz kapcsoljuk az intratracheális nyomás folyamatos mérésére, az adatokat Harvard poligráf segítségével rögzítjük. A nyaki vénába kanült helyezünk az anyagok intravénás beadására. Az állatokat aeroszol formájú antigénnel (0,5 % ovalbumin) kezeljük, amelyet DeVilbiss Model 65 ultraszonikus porlasztóból fejlesztünk és a tracheális kanülön keresztül 30 másodpercig adagolunk. A hörgőösszehúzódást az antigénes kezelést követő 5 percen belül jelentkező intratracheális nyomásnövekedés maximumaként mérjük. Az érzékenyített tengeri malacokba intravénásán 1 mg/kg propranololt, 5 mg/kg indometacint és 2 mg mepiramint 1 ml/kg térfogatban adunk be. A vizsgálandó vegyületeket az ovalbuminos kezelés előtt két órával adagoljuk. 15 perccel később az állatokat porlasztott ovalbuminnal kezeljük. A vizsgálandó vegyületeket az ovalbuminos kezelés előtt két órával adagoljuk. Az anafilaxiás hörgőgörcs visszaszorítását a hordozóval kezelt kontrollcsoporttal való összehasonlítás alapján az intratracheális nyomásnövekedés százalékos gátlásaként fejezzük ki. Például az l-metil-l-(l,2-dihidro-4-hidroxi-l-fenil-2-OXO-1.8- naftiridin-3-il)-pirrolidinium-(hidroxid belső só), hemihidrát ilyen vizsgálatban, 1 mg/kg orális dózisban gátolta az anafilaxiás hörgőgörcsöt. Ez a vegyület gátolta tengeri malacban és humán érzékenyített szövetben az allergén-indukált hisztamin felszabadulást is. A vegyületek hatásos nem adrenerg, nem antikolinerg, antianafilaxiás szerek. Orálisan adagolva kb. 0,1-10 mg/kg testsúly közötti mennyiségben hatásosak; parenterális például intravénás adagolás esetén a vegyületek hatásos dózisa kb. 0,05 és 5 mg/kg testsúly között van; belélegezve (aeroszol vagy porlasztó) a vegyület permetadagonként 0,25-5 mg mennyiségben hatásos és 4 óránként 1-4 ilyen permetadag lélegezhető be. A találmány szerinti vegyületek gyulladás kezelésére is használhatók. így alkalmasak ízületi gyulladás, nyálkatömlőgyulladás, (bursitis), ingyulladás (tendonitis), köszvény és más gyulladásos megbetegedések kezelésére. A találmány szerinti vegyületek gyulladásgátló hatását az RPAR (Reversed Passive Arthus Reaction) ízületi hártyagyulladásos módszerrel szemléltetjük, amelyhez hím 200-250 g-os Lewis patkányokat (Charles River Breeding Laboratories) használunk. A vegyületek hatásának meghatározásához indometacint alkalmazunk standardként. A vizsgálati eredmények alapján orális adagolás esetén napi kb. 5 és 50 mg/kg testsúly közötti mennyiség osztott dózisban, 4 órás időközönként beadva ajánlható. Az adagolás módja és dózisa az alkalmazott vegyülettől, a beteg korától és általános egészségi állapotától, valamint a gyulladás súlyosságától függ. így a dózis meghatározását végül is a gyakorlott egészségvédelmi szakemberre kell bízni. RPAR ízületi hártyagyulladásos módszer Lewis patkánynak orálisan vizsgálandó vegyületet vagy placébót adunk, majd intravénásán 0,2 ml pirogénmentes sóoldatban 2,28 mg borjú szérum albumint (BSA), azt követően pedig 0,03 ml pirogénmentes sóoldatban 0,54 mg nyúl anti-BSA antitestet injektálunk intraartikulárisan az egyik térdízületbe. A másik térdízületbe 0,03 ml pirogénmentes sóoldatot injektálunk. Minden injekció beadásakor az állat enyhén érzéstelenített állapotban van. Három órával később a patkány ismét vizsgálandó anyagot vagy placébót kap orálisan. Minden hatóanyagadagot osztunk, azaz az adag egyik felét a beavatkozás előtt, a másik felét pedig utána adjuk be. Másnap reggel (kb. 17 órával az antitest beadása után) a patkányt megöljük, és a két térdízületet kivágjuk. A térdkalács alatti, udvarral körülvett szövetet az ízületi hártyával együtt kimetsszük és megmérjük. Az antitesttel és sóval kezelt térdek súlya közötti különbséget tekintjük minden állat esetében a gyulladás-válasz mértékének (delta ízületi hártya súly). Az antitestet kapott kontrollok és a vizsgálandó anyaggal kezelt patkányok ízületi hártyája közötti különbségeket variációs analízissel értékeljük. A realtív hatásokat lineáris regessziós módszerrel határozzuk meg. A találmány szerinti vegyületek emésztéses fekélyek kezelésére is alkalmasak. A kemoterápiás hatásuk következtében az emésztéses fekélyes megbetegedések és stressz által kiváltott fekélyesedés tüneteit megszüntetik, és a gyomor- és/vagy bélfekélyek gyógyulását elősegítik. A találmány szerinti vegyületek fekélyellenes hatását olyan vizsgálatokkal mutattuk ki, amelyek a sejtvédő hatást mérik patkányokban. A vegyületek gyulladásellenes/analgetikus szerekkel, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
