201544. lajstromszámú szabadalom • Eljárás indol-2-onok, kinolin-2-onok, benzo/b/azepin-2-onok, benzimidazol-2-onok és kinazolin-2-onok 1-hidroxi-2-piperidino-alkil-származékainak és az ezeket a származékokat tartalmazó gyógyszerkészítményeknek az előállítására
1 HU 201544 B 2 hidroxi-fenil)-N-(l-propil)-piperidin - rövidítve 3H-(+)-3-PPP - patkányagy receptorokhoz való kötődése gátlásának meghatározására irányul. 150-200 g tömegű Sprague-Dawley hím patkányokat elpusztítunk és az agykérget 25 térfogatnyi Trisz-HCl pufferben (pH 7,4, 50 mM, 25 °C-on) homogenizáljuk Ultra-Turrax készülékkel, hűtés közben. A centrifugálást 10 percen át végezzük, 45000 g sebességgel; eközben a keveréket kétszer mossuk, a csapadékot friss pufferben szuszpendálva. A mosott csapadékot 20 térfogatnyi 50 mM-os Trisz- HC1 pufferben (pH 8,0, 22 °C-on) szuszpendáljuk, és 75 pl térfogatú frakciókat 250 pl végtérfogatban 2 nM töménységű 3H-(+)-3-PPP-ben inkubálunk (fajlagos aktivitás 90 Ci/mmól; gyártó cég: New England Nuclear) 90 percen át 25 °C-on, adott esetben kompetitiv anyagok jelenlétében. Inkubálás után a membránokat Whatman GF/B’” szűrőn való szűréssel kinyerjük (a szűrőket előzetesen 0,05 %-os polietilén- imin oldattal kezeljük Skatron Cell Harevester’” berendezés segítségével és a membránokat kb. 2,5 ml jéghideg Trisz-HCl pufferrel (pH 7,7, 0 °C) mossuk. Meghatározzuk az 1 pM mennyiségű haloperidollal kialakult aspecifikus kötődést, a szokásos módszerekkel elemezzük az adatokat és mindegyik vegyületre vonatkozóan meghatározzuuk azt a koncentrációt - CI50-, amely 50 %-ban gátolja a 3H-(+)-3-PPP kötődését. Az előbbiekben ismetetett három vizsgálat - GIS, GMP és SGRB teszt - kvantitatív eredményeit a következő táblázatban foglaljuk össze. Vegyület száma GIS (DE3", mg/kg) GMP (CI50, pM) SGRB (CI50, pM) 1 14,50 5,000 0,186 2 2,10 3,500 — 3 39,00 >10-4->10 — 5 >60 1,000 0,083 6 60 1,500 — 7 60,00 1,500 — 8 36,00 3,000 —. 9->10 _ 10 17,00 2,00 _ 11 3,70 5,000 — 12-0,800 — 13 17,50 9,000 — 14 >60 1,000 0,2600 15 >60 0,600 0,0200 16-0,270 0,0210 17 >60 0,400 0,0340 18->10 0,2050 19 11,00 >10 — 20 15,00 >10 _ 21 >60 10,000 _ 22 6,10 >10 — 23 20,00 >10 — 24 23,00 2,00 0,0840 25 >60 0,400 0,0580 26 >60 0,350 0,1000 27 22,00 2,000 — Vegyület száma GIS (DE3", mg/kg) GMP (CI50, mM) SGRB (CI50, mM) 28 14,00 3,500 — 29 >60 0,300 0,1000 30 >60 1,000 0,0880 31 >60 1,000 0,2090 32 — 10,000 0,2220 33 19,50 1,500 0,1490 34 6,60 >10 — 35 7,70 5,000 — 36 22,00 10,000 — 37 13,00 5,000 — 39 17,00 >10 — 40 33,50 >10 _ 41 48,00 >10 — 42 4,10 >10 — 43-0,080 0,0270 44-0,250 0,1300 45-0,100 0,0870 46-0,080 0,0340 47 50,00 0,270 0,1270 48-1,000 0,0350 49 _ 0,080 0,1100 50-0,050 0,0280 51-0,065 0,0068 52 14,00 4,000 0,3160 53 >60 2,500 0,0920 54 55,00 5,000 0,1570 55 >60 1,500 0,1000 56-2,000-57-0,650 0,0120 58 >60 3,00 — 59 8,00 >10 — 60-4,000-61 — >10-62-0,560 0,0090 63 >60 1,500 0,0200 64-2,200 0,0780 65 — 5,00 0,1360 66-0,400 0,0840 67-0,100 0,0210 68-1,300 0,0270 69->10 0,0560 70 52,00 4,000 0,1610 71-1,000 0,1150 72-6,000 0,1830 73-1,500 0,1990 74-0,130 0,3000 75-1,500 0,1290 76-0,260 0,2050 77-1,700 0,3050 78-6,000 0,1570 79 28,00 7,000 0,6050 80-0,270 0,0970 81-0,100 0,1500 82-6,000 0,7740 83-0,520 0,3850 84 — 0,120 0,0410 Az általunk elvégzett vizsgálatok eredményei igazolják, hogy a találmányunk szerinti eljárással előállítható vegyületeket fel lehet használni agyi rendelleneségek kezelésére és megelőzésére. Ilyen rend5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
