201333. lajstromszámú szabadalom • Eljárás poliamin kelátok ródium-komplexeinek, valamint ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
19 20 mRh(BITC-2,3,2-tet)Ch-CC-49 IgG bioeloszlása LS-174T daganatos egereken mérve HU 201333 B Szerv ««Rh 17 óra 40 óra 66 óra Vér 10.79 ± 0.99 8.62 ± 2.46 10.46 i 1.65 Szív 2.51 ± 0.30 2.16 ± 0.45 1.96 ± 0.53 Tüdő 4.51 ± 0.99 4.30 ± 1.14 3.91 ± 0.95 Máj 10.52 ± 3.28 10.15 ± 1.50 8.22 i 1.30 Lép 5.40 ± 1.14 6.93 ± 1.05 5.14 ± 0.73 Vese 3.43 ± 0.52 2.97 ± 0.36 2.70 + 0.73 Izom 1.92 ± 0.23 1.14 ± 0.30 1.15 + 0.29 Daganat 35.94 ± 5.38 62.03 ± 18.6 85.89 ± 23.15 mRh(BITC-2,3,2-tet)Cb-CC-49 IgG bioeloszlása LS-174T daganatos egereken mérve Szerv WSRh 5,5 óra 24 óra 48 óra 72 óra Vér 23.44 + 1.63 18.12 ± 1.14 13.46 ± 0.57 13.07 ± 1.55 Szív 3.98 ± 0.37 3.30 ± 0.19 2.70 ± 0.46 2.90 ± 1.34 Tüdő 7.11 t 0.91 5.96 ± 0.73 4.95 ± 0.26 4.65 ± 0.76 Máj 6.08 ± 0.85 4.81 t 0.51 3.86 ± 0.26 3,77 ± 0.25 Lép 4.60 ± 0.64 3.95 ± 0.33 3.27 ± 0.32 3.38 ± 0.54 Vese 3.00 ± 0.24 3.18 ± 0.29 2.35 ± 0.36 2.20 ± 0.52 Izom 1.21 ± 0.24 1.53 ± 0.06 1.77 + 0.41 1.52 ± 0.50 Daganat 13.74 t 2.02 28.07 t 1.90 28.46 ± 4.28 34.70 + 10.78 18. Példa P0^Rh(BITC-2,3,2-tet)Cb]1 Cl~ kötése antitest 40 fragmenshez A [105Rh(BITC-2,3,2-tet)Cl2]íCl- komplexet CC-49 antitest F(ab’)2 fragmens lizin csoportjához kötöttük a következő eljárás 45 szerint: 1,5 x 10"5 mmól (0,5 mCi) mennyiségű [-105Rh(BITC-2,3,2-tet)ClzJ*Cl- komplexet nitrogén atmoszférában 1,5 ml-es Eppendorf csőben szárazra pároltunk, majd hozzáadtunk 0,1 ml CC-49 F(ab’>2 fragmenst (10 mg/ml 0,1 mólos NazCOa-ban, pH = 9,5), amelyet enzimatikus emésztéssel Lamoyi és Nisonoff eljárása szerint készítettünk [E. Lamoyi és A. Nisonoff, J, Immunol. Methods, 56, 235-243, (1983)]. A reakciót szobahőmérsékleten 1 55 órán át végeztük. A 105Rh jelzett antitest fragmenst ezután centrifugálásos gélszűréssel választottuk el, és az antitest integritást standard biokémiai immunológiai eljárásokkal igazoltuk. firi 19. Példa 105Rh jelzett CC-49 (Fab’h in vivo lokalizálása A 105Rh jelzett antitest fragmens alkalmazhatóságát athymiás egereken határoztuk meg oly módon, hogy humán tumor xenográffal mértük a felvett anyag mennyiségét. A kísérlethez nőstény athymiás egereket (Nu/Nu) szubkután 0,1 ml-es mennyiségben humán vastagbél karcinóma sejtvonallal (LS-174T, körülbelül 4 x 106 sejt/kísérleti állat) megfertőztünk, majd körülbelül 2 héttel a fertőzés után minden állatnak a farok vénán keresztül 3 /uCi (15 Mg) 105Rh jelzett CC-49 (Fab’)2 antitest fragmenst adagoltunk foszfáttal pufferolt sóoldatban. Az egereket ezután különböző időtartamok elteltével leöltük, a daganatot és a kiválasztott sejtet kivágtuk, mértük és meghatároztuk a radioaktivitásukat gamma számláló alkalmazásával. A beütés/perc/g l05Rh értéket minden szövetre (cpm/g) meghatároztuk és a beinjekciózott mennyiség függvényében fejeztük ki. A kapott eredményeket a következő táblázatban foglaljuk össze. 12
