201097. lajstromszámú szabadalom • Eljárás humán inzulin-származékok és az azokat tartalmazó nyújtott hatású gyógyszerkészítmények előállítására
HU 201097 B 6 cióban tartalmazzák az (II általános képletű vegyületet. A C-terminális helyzetben karboxaniino-csoport van. Egy ilyen csoport van például a ThrB30-NH2 humán inzulinban, amely intermedierként ismeretes a humán inzulin szintézisében llásd: Carlsberg Kés. Commun. 49, 463, (1984)]. Neutrális pH-nál az -X^-Pro^-Lys2“-Y«-Zn-R rész töltése +1 a ThrB30-NH2 humán inzulinban, Thr^-OBu’ humán inzulinban, ThrB30(But)-OBut humán inzulinban és LysB2“-NH2, dez-(B30) humán inzulinban, +2 a LysB30-NH2 humán inzulinban, ArgB30-NH2 humán inzulinban, Orn^-Nllz humán inzulinban, Lys®27, ThrB3U-Nll2 humán inzulinban és Arg®27, ThrB3u-NH2 humán inzulinban, és +3 a Lys®27, LysB30-Nll2 humán inzulinban, humán humán humán humán humán humán inzulinban, inzulinban, inzulinban, inzulinban, inzulinban, inzulinban, és LysB27, ArgB30-NH2 Arg®27, LysB3ű-NH2 Arg®27, ArgB30-NH2 LysB30-LysB31-NH2 ArgB30-LysB31-NH2 OmBM-OrnB31-NH2 DabB30-DabB31-NH2 humán inzulinban DapB30-NH2 humán inzulinban. A találmány egyik kedvező kivitele szerint az Y-nal és Z-vel jelzett aminosavrészek olyan L-aminosavrészek, amelyeket nukleotid szekvencia kódol. Az (I) általános képletül előnyös vegyulelek egyik csoportjában Y és/vagy Z jelentése egy bázikus aminosavrész (ni = 1). Az (1) általános képletíi, előnyös vegyültetek másik csoportjában n értéke nulla és Y jelentése egy bázikus aminosavrész (m = 1). Az (I) általános képletül, előnyös vegyületek további csoportjában mind Y mind Z jelentése bázikus amonosavrész (m = 1, n = 1). Előnyös (I) általános képletül vegyületek a következők: GlnAl7, ArgB27, ThrBJÜ-NH2 humán inzulin, GlnAl1, Gin®13, ThrB30-Nll2 humán inzulin, GlnA17, Lys®27, ThrB30-NH2 humán inzulin, GlnA17, LysB30-NH2 humán inzulin, GlnA17, Thr^-NHz humán inzulin, Gin®13, Arg®27, ThrB30-NH2 humán inzulin, Gin*13, Lys®27, ThrB3U-NH2 humán inzulin, Gin®13, Lys®30--Nl)2 humán inzulin, Gin®13, LysB30-Nll2 humán inzulin, Gin®13, ThrB3ü-NHz humán inzulin, Arg®27, ArgB30-NH2 humán inzulin, Arg®27, LysB30-NH2 humán inzulin, Arg®27, ThrB30-Nll2 humán inzulin, Lys®27, Arg®30--NH2 humán inzulin, Lys“27, LysB30-Nll2 humán inzulin, Lys®27, Th-NH2, Lys“30--ArgB31-NH2 humán inzulin, Lys®30, Lys®31--NH2 humán inzulin, Arg“30-.NH2 humán inzulin, Arg®30, Arg®31-NIl2 humán inzulin, vagy ArgB30-LyS®31-NH2 humán inzulin. A találmány egy másik előnyös kivitelét képezik az olyan készítmények, amelyek olyan (I) általános képletül vegyületet tartalmaznak, melyben E2 és/vagy E3 jelentése egy glutaminrész és/vagy X jelentése Lys vagy Arg és az (I) általános képletül vegyületek ezen alcsoportján belül, egy további előnyős kivitelt képeznek az olyan készítmények, amelyek olyan (I) általános képletül vegyületet tartalmaznak, ahol az -Y»-Zn-R él- 5 talános képletül csoport jelentése -TI11—NH2 vagy Lys-Nlh. Előnyös vegyületek a Gin®13, ThrB30-Nll2 humán inzulin, a Gin*17, Thr®30--NII2 humán inzulin, a Lys®27, ThrB3u-NH2 humán inzulin, és az Arg®27, ThrB3U-NH2 10 humán inzulin. Az (1) általános képletül előnyös vegyületek egyik csoportjában E3 glutaminsav csoport. Az (I) általános képletül előnyös vegyülő letek másik csoportjában E2 jelentése egy glutaminrész. Az (I) általános képletül előnyös vegyületek egy még további csoportjában X jelentése egy arginin- vagy lizinrész. 20 Amint az a szakmában jól ismeretes, a humán inzulinban nem minden aminosavrész elengedhetetlen az inzulinhatás szempontjából. Valójában a sertés inzulint és a marha 25 inzulint, amely aminosavcsoportjaiban eltér a humán inzulintól, alkalmazzák cukorbetegek kezelésére. A fajták szerint figyelemre méltó variációk vannak az inzulinmolekulában. Így a humán inzulinmolekulában sok peptidfrag- 30 mens megváltoztatható anélkül, hogy túlságosan csökkenne az inzulinaktivitás, beleértve néhány olyan peptidfragmenst, amelyek fontosak a molekula izoelektromos pontja szempontjából. 35 Az ismert kétfázisú inzulin készítményekben általános az, hogy gyorsan ható, oldható inzulint, hosszabban ható, kristályos inzulinnal kombinálnak ugyanabban az injekcióban. A találmány szerinti (I) általános 40 képletű vegyületeket alkalmazva, egy hasonló kombinált gyors és elnyújtott hatást érhetünk el egyetlen (1) általános képletü, vegyüld oldatával. A gyors és a hosszú hatás közötti arány csökken, ahogy az oldatban lé- 45 vő cinkionok koncentrációja megnő. Az (I) általános képletű vegyületeket előállíthatjuk egy transzpeptidezési reakcióval, melyben sertés inzulint vagy más (II) általános képletű bioszintetikus prekurzor 50 vegyületet, mely rendelkezik a korrekt inzulin-diszulfid-hidakkal. B( l-12)-E3-B(14-20)-E4-B(22-26)-X-B(28-29)-(Qq-R)r-A( 1-3)-El-A( 5-16 l-E^At 18-21) (II) 55 ahol az A és B betűk, melyeket a zárójelben lévő számok követnek, az A- illetve B-láncok megfelelő peptidfragmenseit jelölik, amint azt a zárójelben lévő számok mutatják, Q jelentése egy q számú aminosavbó! álló peptid- 60 lánc, q jelentése egy 0-33 közötti egész szám, R jelentése Lys vagy Arg, és r értéke nulla vagy egy, és E1, E2, E3, E4 és X jelentése a fentiekben definiált - reagáltatunk egy (111) általános képletü aminovegyülettel: 65 H-Y«—Zn—R 5
