201095. lajstromszámú szabadalom • Az immunrendszer működését gátló új peptidek, az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények, valamint eljárás ezen peptidek és készítmények előállítására
6 HU 201095 B 2. Az elsődleges ellenanyag-termelésre gyakorolt hatás A vizsgálatokat CFLP (LATI) egereken végeztük. A 23-30 g-os him egereket háromszor mosott 0(5 ml lX-os birka vörösvértest szuszpenzióval i.p. immunizáltuk, majd a vizsgálandó anyagokból 100 mg/kg dózissal i.p. kezeltük az állatokat. A kezelést követó 3. napon az állatoktól 0,60-0,70 ml vért vettünk. 30 perc állás után a savókat centrifu-5 gálással leválasztottuk és Takátay módszerével [Acta MikcrobioL Acad. Sei. Hung., 3, 191. (1955)] meghatároztuk a haemagglutinációs titert. A 2. táblázat foglalja össze a kapott 5 adatokat, melyek a nem kezelt állatokhoz képest mutatják az elsődleges ellenanyag-termelésre gyakorolt gátló hatást X-ban. Ugyanebben a tesztben a ,B‘ és a .C’ immunstimuláló anyagok hatása éppen . ellenté- 10 tes. 2. táblázat Az elsődleges ellenanyag-termelésre gyakorolt hatás Szám/jel A peptid neve Az elsődleges ellenanyag-termelésre gyakorolt hatás X 4. Arg-D-Lys-D-Asp-15 5. D-Arg-Lys-Asp-15 11. Arg-D-Lys-A8p-Val-20 B. Arg-Lys-Asp-Val +31 C. Arg-Lys-Asp-Val-Tyr +29 ülepitést 1000/perc fordulatszámon 5 percig tartó centrifugálással végeztük. Ezután az egyes sejtszuszpenziók koncentrációját 106 sejt/ml-re állítottuk be, és a szuszpenziót 37 °C-on, 5X szén-dioxidot tartalmazó atmoszférában 30 percig Boyden-kamrában ülepítettük. Az üvegfalra kitapadt makrofágok fölé opszonizált élesztőt rétegeztünk. A nem fagocitált részecskék eltávolítása után sejtenként megszámoltuk a makrofágok által bekebelezett részecskéket. A 3. táblázatban a nem kezelt állatokból izolált makrofágokhoz, mint kontrolihoz képest megadjuk a fagocitált élesztősejtek számának X-os csökkenését. 3. táblázat Nyugvó makrofág sejtek fagocitáló képességére gyakorolt hatás Szám/jel A peptid neve A nyugvó makrofágok fagocitáló képességére gyakorolt hatás X 1. D-Arg-Lys-D-Asp-41 2. Arg-D-Lys-Asp-63 6. D-Arg-D-Lys-Asp-11 7. Arg-Lys-D-Asp-21 8. Arg-Lys-D-Asp-Val-14 10. D-Arg-Ly8-Asp-Val-25 11. Arg-D-Lys-Asp-Val-19 12. Lys(Arg)-Asp-42 13. Lys(Arg)-D-Asp-50 3. Nyugvó makrofág sejtek fagocitáló képességére gyakorolt hatás A vizsgálatokat NZB (OLAC-SzKB) egere- 30 ken végeztük a J.Immunopharmacol., 4, 265. (1982-83) helyén leirt módon. A 6 hónapos him álatokat 4 napon át naponta, s.c. 1 mg/kg-os dózisban kezeltük a vizsgálandó anyagokkal. Ezután az egereket elvéreztettük, 35 majd 8 ml, 10 NE heparint tartalmazó, 7,2 pH-jú PBS pufféi—oldattal kimostuk a peritoneumot. Desztillált vizes sokkolással a peritoneumból kimosott sejtszuszpenziót vörösvértest-mentesítettük, majd PBS puffer-ol- 40 dattal háromszor mostuk. Mosások között az 5
