201064. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-amino-alkil-1,2-benzizotiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid-származékok és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
7 8 HU 201064 B 2-{4-[(2,3-dihidvo-l,4-benzodioxin-2-il)-metil-amino )- b u til}-l,2~ benzizotiazol-3( 2H)-on~l, 1 - - dioxi d-hi droklori d 10 ml N,N-dimetil-formamidban (DMF) elkeverünk 0,965 g (5,48 mM) 2-amino-metil-1,4-benzodioxént 3 g kálium-karbonátot és 1,43 g (4,5 mM) - a fenti módon előállított - N-(4-bróm-butil)-szacharint. A reakcióelegyet egy éjszakán át 100 °C-os hőmérsékleten keverjük, majd lehűtjük, leszűrjük és szárazra pároljuk. A maradékot etil-acetátban oldjuk, vízzel mossuk, majd hig sósavval megsavanyítjuk. Az elváló olajat éterrel, 5X-os sósav-oldattal, majd vízzel mossuk, megszárítjuk és szárazra bepároljuk, így 1,3 g nyers, sárga színű szilárd anyagot kapunk. Ezt az anyagot szabad bázissá alakítjuk, majd szilikagélen metilén-klorid és metil-alkohol 97:3 arányú elegyével gyorskromatográfiás eljárással tisztítjuk, így megkapjuk a kívánt vegyületet (0,91 g). A vegyület sósavas sóját izopropanolos etil-acetát oldatból átkristályosítva megkapjuk a címben jelzett vegyületet, melynek olvadáspontja 210 °C. Lényegében ugyanezt az eljárást követve, de az N-(4-bróm-butil)-szacharin helyett N-(2-bróm-etil)-szacharint alkalmazva a 2-{2- -[(2,3-dihidro-l ,4-benzodioxin-2-il)-metil-amino]-etil}-l,2-benzizotiazol-3(2H)-on-l,l-dioxidot kapunk, aminek olvadáspontja 181 °C. 2. Példa 2-{4-[2-(l,2,3,4)-tetrahidro-0-karbolinil]-butilj-1,2- benzizotiazol-3 (2H)-on-l, 1 -dioxid Lényegében az 1. példában leírt eljárást követve, de a 2-amino-etil-l,4-benzodioxán helyett l,2,3,4-tetrahidro-/3-karbolint alkalmazva előállítjuk a cím szerinti vegyületet, és sósavas só alakjában kikristályositjuk. A só olvadáspontja 272 °C. 3. Példa 2-[4-(8-metoxi-tetralin-2-amino)-buLil]-l,2--benzizotiazol-3(2H)-on-l,l-dioxid Lényegében az 1. példában leírt eljárást követve, de 2-amino-etil-l,4-benzodioxán helyett 8-metoxi-2-amino-tetralint alkalmazva előállítjuk a cím szerinti vegyületet, és sósavas só alakjában kikristályosítjuk. A só olvadáspontja 233 °C. 4. Példa 2-{4-[2-(5-metoxi-indol-3-il)-etil-amino]-biitil}-l,2-benzizoliazol-3(2H)-on-l,l-dioxid 5 Lényegében az 1. példában leírt eljárást követve, de 2-(amino-etil-l,4-benzodioxán helyett 5-metoxi-triptamint alkalmazva előállítjuk és sósavas só alakjában kikristályositjuk 10 a cím szerinti vegyületet. A só olvadás előtt elbomlik. 1H NMR (szabad bázis, CDCI3+CD3OD, 360 MHz, ppm): 8,4 (1H, s), 8,0-7,7 (4H, m), 7,2- -6,75 (4H, m), 3,8 (3H, s), 3,8-3,6 (2H, m), 15 3,15 (4H, m), 2,9 (2H, t), 1,85 (4H, m). 5. Példa 20 2-{4-[(2,3-dihidro-l,4-benzoxazin-3-il)-metil-amino]-butil)-l,2-benzizotiazol-3(2H)-on~l,l- dioxid Lényegében az 1. példában leirt eljárást 25 követve, de 2-amino-etil-l,4-benzodioxán helyett 2-amino-metil-benzoxazint alkalmazva előállítjuk és sósavas só alakjában kikristályosítjuk a cím szerinti vegyületet. A só olvadáspontja: 209 °C. 30 6. Példa Szorongásgátló tulajdonságok in vitro meg- 35 határozása 5-H71* kötés útján Az 5-HTu receptorhelyek radioligandumos kötési vizsgálatait a következőképpen végeztük: normotenziv hím Sprague-Dawley 40 patkányok frontális cortexét kimetszettük, folyékony nitrogénben megfagyasztottuk, és felhasználásig -20 °C-on tároltuk. A 4-8 patkányból kimetszett szöveteket összegyűjtöttük, és 70 térfogatrész Tris-sósav puffer 45 (50 mM pH=7,7) hozzáadásával, a maximális sebesség 2/3-ára beállított Polytron készülékkel 20 másodperc alatt homogenizáltuk. A homogenizátumot 36 500 g-vel 10 percig centrifugáltuk, a kapott pelle tét azonos tér- 50 fogatú puffer hozzáadásával újra homogenizáltuk, és ezt a folyamatot még kétszer megismételtük. A második és harmadik centrifugálás között a szövethomogenizátumot 37 °C-on 10 percig inkubáltuk. A legvégül kapott 55 pelletet azonos térfogatú Tris-pufferben szuszpendáltuk, amely 10 M pargilint, 5,7 mM kalcium-kloridot és 0,1% aszkorbinsavat is tartalmazott. Ezt a szuszpenziót 10 percen át 37 °C-on inkubáltuk, majd a kötés vizsgála- 60 tához történő felhasználásig hűtve tároltuk. 0,7 ml szövethomogenizátumot, 0,1 ml radioaktív ligandumot és 0,1 ml, megfelelő koncentrációjú vizsgálandó vegyületet puffer-oldattal 1 ml végső térfogatra feltöltve 15 per- 65 cen át 37 °C-on inkubáltunk. Az inkubálást 6
