201032. lajstromszámú szabadalom • Eljárás transzglutaminázgátló izoxazolok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására

HU 201032 B

és 20 °C közötti hőmérsékleten, így a 2 általános képletű amin trifluor-ecetsav sóját kapjuk. A ve* gyületet tozilsawal is kezelhetjük szerves oldószerben 30 és 60 °C közötti hőmérsékleten (például forró etil-acetátban), akkor a 2 általános képletű amint szerves oldószerben, például metilén-kloridban oldjuk és az I. reakcióvázlat A lépéséhez vagy a II. reakcióvázlat D lépéséhez hasonlóan 0 és 20 °C közötti hőmérsékleten R2X’ általános képletű vegyülettel reagáltatjuk, így R2 helyén Boc csoporttól eltérő helyettesítőt tartalmazó (I) általános képletű célvegyületet állítunk elő. Ezeket a vegyületeket az

I. vagy n. reakcióvázlat szerint is megkaphatjuk.

A következő előállítási példákhoz az N-védett alfa-aminosavakat a kereskedelemben a Sigma Chemical Co., Chemical Dynamics Corp., Bachem Inc. stb. cégektől szereztük be vagy ismert eljárásokkal, így például a Cbz csoportot tartalmazókat M. Bergman, L. Zervas (Bér. Dtsch. Chem. Ges., 1932, 1192, ld. Greenstein és Winitz cikkét is),

a Boc csoportot tartalmazókat M. Itoh, D. Hagiwara, T. Kamiya (Tetrahedron Lett. 1975,4394) módszere szerint állítottuk elő. A következő kísérleti részletek a találmány bemutatására szolgálnak, a korlátozás szándéka nélkül.

1. előállításmód (I. reakcióvázlat—A lépés)

N-(Benzil-oxi-karbonil)-meta-tirozm

3,0 g D,L-meta-tirozin jéghideg vizes oldatához részletekben 2,6 ml klór-hangyasav-benzil-észtert és 4,2 ml nátrium-hidroxidot adunk úgy, hogy a pH kb. 9 körül legyen. A reakció befejeződése után a reakcióelegyet 25 ml éterrel extraháljuk. A vizes fázist ezután metilén-kloriddal alkotott kétfázisú rendszerben 5 mólos sósavval kongóvörösre megsavanyítjuk. A vizes fázist még 3 alkalommal 25-25 ml metilén-kloriddal extraháljuk, az egyesített szerves extraktumot 20 ml vízzel, 20 ml telített nátriumklorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. így 1,8 g terméket kapunk.

IR (tiszta): 3500-2400 (széles, -OH, -COOH, - NH), 1740-1680 (-CO);

*H NMR (80 MHz, CDCb): delta 3,05 (AB, 2H, -CH2-), 4,6 (m, 1H, -CH), 5,1 (s, 2H, PhCH20-), 5,3 (széles d, 1H, -NH), 6,25 (széles s, 2H, -OH, -COOH), 6,6-73 ppm (m, 4H, Ph).

A D,L-meta-tirozmt más aminosawal helyettesítve más, N-benzil-oxi-karbonil-védőcsoportot tartalmazó közbenső terméket kapunk. Például erre a célra számításba jöhet számos, a természetben előforduló aminosav, így a glicin, treonin, fenil-alanin, para-tirozin, triptofán, risztéin, glutaminsav, glutamin, hisztidin, lizin, hidroxi-lizin, dihidroxi-fenil-alanin (DOPA) és hasonlók. Abban az esetben ha az aminosavak oldalláncában másik funkciós csoport, például amino-, karboxil-, hidroxi-, tiol-, imidazol- vagy mdolcsoport van, még egy védőcsoportot bevivő lépésre és egy azt eltávolító lépésre is szükség van, mint ahogy ez a szakterületen ismert.

A fentebb említett (vagy más) aminosavakkal kapcsolatban a védőcsoportok, például a Boc, Cbz, toluol-szulfonil- és más csoportok bármilyen variációit haspiálhatjuk.

Az R2 csoportot a kiindulási anyag változtatásával variálhatjuk. Például az ezen előállításmódban

13

alkalmazott meta-tirozin helyett nem egyetlen aminosavat, hanem inkább dipeptidet használunk, így (i) általános képletű védett dipeptidet kapunk, amelynek képletében a helyettesítők jelentése a korábban megadott.

Ezzel az eljárással például a következő aminosav-származékokat állítjuk elő:

N-(benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalanin;

N-(benzil-oxi-karbonil)-L-para-tirozin;

N-(benzfl-oxi-karbonil)-D-(para-klór-fenil)-al

anin;

N-(terc-butoxi-karbonil)-L-fenilalanin; N-(benzil-oxi-karbonil)-Ncpsz“cm- (terc-butoxikarbonil)-L-lizin;

N-(benzil-oxi-karbonil)-glicin;

N-(benzil-oxi-karboml)-L-treonin;

N-(benzil-oxi-karbonil)-L-alanil-L-fenilalanin;

N-(benal-oxi-karbonil)-D-fenilalanin;

N-(benzil-oxi-karbonil)-L-gamma-glutamm;

N-(benzil-oxi-karbonil)-D,L-meta-tirozin;

N-(benzil-oxi-karbonil)-L-meta-tirozm;

N-(benzil-oxi-karbonil)-L-(3-metoxi-fenil)-ala

nin;

N-(benzil-oxi-karbonil)-L-(3,4-dihidroxi-fenil)-alanin;

N-(benzil-oxi-karbonil)-L-3-metoxi-tirozin;

N-(benzü-oxi-karbonil)-L-(4-metoxi-fenil)-ala

nin;

N-(benzil-on-karbonil)-L-triptofán és N-(benzil-oxi-karbonil)-L-5-hidroxi-triptofán.

2. előállításmód (I. reakció vázlat—B lépés) N*-(Benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalanin-allil - amid

A következő kísérleti részletek az olefin-amid előállítását mutatják be.

4,7 g l-(3-dimetilamino-propil)-3-etil-karbodiimidhidroklorid (EDCI), 3,0 g N-(benal-oxi-karbonil)-L-fenilalanin, és 30 mg 4-(dimetil-amino)-piridin (DMAP) 50 ml etil-acetáttal készült jéghideg oldatához 0,8 ml allil-amint adunk keverés közben. 30 perc eltelte után a reakcióelegyet szobahőmérsékletre melegítjük és egy éjszakán át állni hagyjuk. A reakcióelegyet ezután etil-acetáttal hítítjuk, két alkalommal 20-20 ml 5%-os sósavval, vízzel, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és telített nátrium-klorid-oldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk és bepároljuk. A kapott maradék állás közben kristályosodik; [alfaj^D = +1,9°. A cím szerinti amid előállítására másik módszerként a vegyes anhidrides eljárást használjuk (Id. N.L. Benoiton és munkatársai, J. Org. Chem. 1985,48.2939 és Org. Reactions, Vol. 12,195/1962/).

Az 1. előállításmódnál felsorolt aminszármazékoknak megfelelő allil-amidokat ezzel a módszerrel állítjuk elő.

N-(benzü-oxi-karbonil)-L-fenilalanin-allil-ami

d;

N-(benzil-oxi-karbonil)-L-para-tirozm-allil-am

id;

N-(benzil-oxi-karbonil)-D-(para-klór-fenil)-al

anin-allil-amid;

N-(terc-butoá-karbonil)-L-fenilalanin-allil-am

id;

14

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

8