200945. lajstromszámú szabadalom • Készítmény kontaktlencsék tisztítására és fertőtlenítésére
HU 200945 B 4. Példa 3 tömeg/térfogat%-os hidrogén-peroxidban lévő szubtilizin mikrobaellenes aktivitásának értékelése Szubtilizin A-t tartalmazó tablettázott készítmény (részletes ismertetése az 1. példában) hatását vizsgáltuk hidrogén-peroxid mikrobaellenes aktivitására oly módon, hogy a szubtilizin-A tablettát 3 tömeg/térfogat%-os hidrogén-peroxidban (Lensan A, Allergan Pharmaceuticals Inc.) oldva vizsgáltuk azon mikroorganizmusok körével szemben, amelyeket az FDA (USA) előír oldatok kontakt 13 lencsét fertőtlenítő hatásának vizsgálatára. A vizsgálatok során ismert tenyésztési eljárásokat, kinyerési módszereket és mennyiségi mikrobiológiai elemzési eljárásokat alkalmaztunk. A következő 3 mikroorganizmusokat alkalmaztuk: S. marcescens, ATCC14756 vagy 14041; 5. aureus, ATCC 6538; P. aeruginosa, ATCC 9027 vagy 15442; E. coli, ATCC 8739, C. albicans, ATCC 10231 ésÁ niger, ATCC 16404. Egy, az 1. példában ismertetett 133,4 mg-os 10 szubtilizin A tabletta készítményt (0,4 mg szubtilizin/tabletta) alkalmaztunk. A vizsgálat eredményeit a II. táblázatban ismertetjük. 14 I. Táblázat A peroxid-koncentráció hatása a tisztítás hatékonyságára Enzim konc. (mg/ml) pH Tónus tömeg/térf.% peroxid tisztítás% lencse A 0,04 9,025 318 0 9,0 (5,5) B 0,04 9,086 330 0,5 44,0(8,9) C 0,04 9,016 390 1,0 78,0(2,7) D 0,04 9,022 643 1,5 87,0(2,7) E 0,04 9,023 796 2,0 94 0(4,2) F 0,04 9,016 932 2,5 97,0 (2,7)* II. Táblázat Az extrapolált D-értékek* (perc) összehasonlítása Organizmus I. Vizsgálat II. Vizsgálat 3 tömeg/térfogat% H2O2 3% H2O2 3 tömeg/térfogat% H2O2 r tömeg/térfogat% H2O2 + Szub. A + Szub. A S. marcescens 2,5 1,7 3,5 1,3 S. aureus 4,0 3,0 4,0 2,0 P. aerugnosa 0,3 0,5 0,3 0,1 E. coli 2,5 0,9 1,7 0,2 C. albicans 36,5 13,0 15,0 9,0 A. niger 9,5 11,6 6,0 6,0 *A D-érték azt az időt jelöli, amely 5 x 105 organizmus/ml egy nagyságrenddel való csökkentéséhez szükséges. Kontrollként egy sóoldatban oldott enzimtablettát alkalmaztunk, a kontroll a 24 órás vizsgálati időszak alatt nem mutatott mikrobaellenes aktivitást. A vizsgálatot azonos körülmények mellett mégegyszer megismételtük, a második vizsgálat eredményeit is a II. táblázatban közöljük. A III. táblázatban a II. táblázat adatai alapján közöljük az átlagos pusztulási sebességet. III. Táblázat Átlagos pusztulási sebesség (percekben) szobahőmérsékleten (D-értékek) Organizmus 3 tömeg/térofgat% H2O2 3 tömeg/térfogat% H202/Szub. A S. marcescens 3,0 1,5 E. coli 2,1 0,6 P. aemginosa 0,3 0,3 S. aureus 4,0 2,5 C. albicans 26,0 11,0 A. niger 8,0 9,0 Minél alacsonyabbak a D-értékek, annál hatékogálát azt mutatja, hogy a 3 tömeg/térfogat%-os hidnyabb a mikrobaellenes aktivitás. Valamennyi vizsrogén-peroxid és a szubtilizin A együtt lényegesen 8
