200930. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfino-szénhidrogének arany-, ezüst- és rézkomplexeit tartalmazó, daganatos sejtek szaporodását gátló gyógyászati készítmények előállítására
HU 200930 B sejt szarkóma. Ebben a rendszerben B6D2F nőstény egereket 0,5 ml 10 t/térf%-os M5076 tenyészettel ferrőzünk be - amelyet C57B1/6 donorokból kimetszett, összegyűjtött körülbelül 21 napos szubkután tumorokból készítünk. A vizsgált vegyületeket ip. adjuk be. A kezelést a sejtek beültetését követően 24 órával kezdjük meg és 10 napon át naponta végezzük. Az M5076 modellben a kezelés időtartama azért hosszabb, mint a P388 modellben, mert a sejtek szaporodási sebessége kisebb és az M5076 daganattal fertőzött kontroll állatok túlélési ideje hosszabb. Ezen a modellen vizsgáltuk meg az (I) általános képletfi vegyületeket. Hatásosnak azokat a vegyületeket tartjuk, amelyek ő 25% 'Xet-TOpTafJ. V X tSJEKEÖ'OT mKXTOtVOK KI. Az X helyettesítőként kloridiont tartalmazó (I) általános képletfi vegyület hatását vizsgáltuk M5076 retikulumsejt szarkómára, 1,6 mg/kg MTD érték mellett 60%-os élettartam növekedést észleltünk (ip. qDxlO). Az (I) általános képletfi vegyület citotoxikus hatását in vivo B16 melanomasejteken vizsgáltuk meg. 8-8 B6D2Fi egérből álló csoportokat ip. 0,5 ml 10 t/térf.%-os B16 melanomasejt tenyészettel fertőzünk be, amelyet C67Bi/6 donor egerekből kimetszett összegyűjtött, 14-21 napos se. tumorból készítünk. A tumorsejtek beültetése után 24 órával kezdjük meg a kezelést és 10 napon át naponta végezzük. A vegyületeket ip. adjuk be. Az egereket 60 napon át tartjuk megfigyelés alatt, az elhullást naponta feljegyezzük. A tumorellenes hatást az átlagos túlélés idő növekedésével értékeljük. Hatásosnak azokat a vegyületeket tekintjük, amelyek ő 25% 'Xst-TapTCEg-V X WEKEÖ'OT UrKkTOEVOHC KI. Az X helyettesítőként kloridiont tartalmazó (I) általános képletfi vegyületek B16 melanomasejteken vizsgálva 1 mg/kg MTD melett 54%-os élettartam növekedést észleltünk (ip. qDxlO). A találmány szerint előállított gyógyászati készítmények hatásos mennyiségű tumorsejt növekedést gátló (I) általános képletfi vegyületet és közömbös, gyógyászati célra alkalmas hordozó és/vagy segédanyago(ka)t tartalmaznak. A készítményeket parenterális adagolásra alkalmas egységdózássá formáljuk. A találmány szerint előállított, parenterális adagolásra alkalmas készítmények lehetnek steril vizes vagy nemvizes oldatok, szuszpenziók vagy emulziók. A készítményekben az aktív anyagot minimális térfogatú dimetil-acetamidban vagy etanolban például 5 térf%-ra oldjuk, majd mogyoróolajjal vagy normál sóoldattal egészítjük ki a kívánt térfogatra. A hatóanyag oldására használhatunk polietoxilák ricinusolajat is például 2-5 térfogat% koncentrációban. Ezen kívül a készítmény szuszpenzió formájú is lehet, például hidroxi-propil-cellulózt vagy más szuszpendáló anyagot is tartalmazhat. Emulgeálószerként például lecitint alkalmazhatunk. A készítményeket steril szilárd anyagok formájában is elkészíthetjük és közvetlenül használat előtt oldjuk steril injekciós közegben. Az (I) általános képletfi vegyületeknek a készítményekben alkalmazott aktuális előnyös dózisa az alkalmazott komplextől, az adott készítménytől, az adagolás módjától, a kezelés helyétől, a kezelt 3 egyedtől (fajtól) és betegségtől függően változó. A belsőleges adagolás módját úgy választjuk meg, hogy a fémkomplex a tumorral hatásos tumor-növekedést gátló mennyiségiben kerüljön érintkezésbe. Az optimális dózist szakember a szokásos dózismegválasztó vizsgálatokkal, az előzőekben ismertetett kísérleti adatok ismeretében meg tudja határozni. Parenterális adagolás esetén általában 5 mg -10 mg/m2 testfelület/nap dózist alkalmazunk 1-5 napig, és a kezelést körülbelül minden negyedik héten megismételve négy kezeléssort végzünk. Az (I) általános képletfi vegyületekre érzékeny tumorsejtek növekedését a találmány szerinti készítménnyel úgy gátoljuk, hogy az említett tumorsejteket hordozó gazdaállatnak hatásos mennyiségű (I) általános képletfi vegyületet tartalmazó készítményt adunk be. Amint azt az előzőekben ismertettük, a kezelés tartama alatt a hatóanyagot parenterálisan, 300-1000 mg mennyiségben adjuk be. A következőkben a találmány szerint előállított készítmények hatóanyagául szolgáló (I) általános képletfi vegyületek előállítását, valamint a készítmény előállítását mutatjuk be példákban. A példák nem korlátozó jellegűek. 1. Példa [Trisz{l,2-bisz(difenil-foszfino)-etán}-diréz(I) ]-klorid előállítása 0,88 g, 2,2 mmól [l,2-bisz(difenil-foszfino)-etán] (a Strem Chemicals, Inc., Danvers, Massachusetts terméke) 10 ml kloroformban készült oldatához 0,087g, 0,88 mmól szilárd réz(I)-kloridot adunk. Az elegyet állandó nitrogéngázáramban két órán át keverjük, ezalatt a szilárd anyag feloldódik. Az elegyhez 5 ml hexánt adunk és hőmérsékletét 0 °C-ra hűtjük. Az így kapott fehér csapadékot kiszűrjük, majd vákuumban szárítjuk. A cím szerinti terméket 50%-os hozammal nyerjük. A kapott termék olvadáspontja 260-270 °C. 2. Példa [Trisz{l,2-bisz(difenil-foszfino)etán]-diréz(I)] -nitrát előállítása A cím szerinti terméket Carty és munkatársai eljárásával /Can. J. Chem. 49,761-766 (1971)/ állítjuk elő a következő módon: réz(ü)nitrátot 1,2- bisz(difenil-foszfino)-etán felesleggel forró etanolban redukálunk, majd a reakcióelegyhez n-hexánt adunk. Ily módon a cím szerinti terméket színtelen kristályok formájában nyerjük. A kapott termék olvadáspontja 131-135 °C. 3. Példa Gyógyászati készítmény előállítása Hatóanyagként egy rész 1. példa szerint előállított komplexet 5 rész dimetil-acetamidban és 5 rész polietoxUált ricinusolajban oldunk és normál sóoldatot adunk hozzá, majd parenterálisan 5 mg/m2 testfelület mennyiségben adagoljuk a hatóanyagra érzékeny tumorsejtekkel fertőzött állatok tumorsejtjei szaporodásának gátlására. 4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55' 60 65
