200921. lajstromszámú szabadalom • Eljárás imidazolil-származékot tartalmazó vaginális kúp előállítására
HU 200921 B 10. példa A gombaellenes hatású kúpot az 1. példában leírtakhoz hasonló eljárással állítottuk elő, az alábbi összetétellel: 7 Összetevő Mennyiség (mg/kúp) Hatóanyag 600,0 Polietilén 104,0 Poli-(vinil-pirrolidon) 13,0 Hidratált kovasav 52,0 Gliceril-oleát és propilén-glikol 104,0 Butilált hidroxi-toluol 50,0 Witepsol S-55 582,0 WecobeeFS 1995,0 11. példa A gombaellenes hatású kúpot az 1. példában leírtakhoz hasonló eljárással állítottuk elő, az itt következő összetétellel: Összetevő Mennyiség (mg/kúp) Hatóanyag 600,0 Polietién 104,0 Poli-(vinil-pirrolidon) 13,0 Hidratált kovasav 52,0 Gliceril-oleát és propilén-glikol 104,0 Butilált hidroxi-toluol 100,0 Witepsol W-35 582,0 Suppostal Es 1645,0 Az 1. példában ismertetett összetételű kúpok hatékonyságát Candida albicans fertőzések kezelése során vizsgáltuk, hörcsögben. 100-120 g-os kültenyésztett (Charles River) nőstény hörcsögök csoportjait használtuk fel a vizsgálat során A fertőzést okozó organizmust, a Candida albicanst (C-60) Sabourand-féle dextróz-agar ferde táptalajon tenyésztettük 24-28 órán keresztül, 28 °C hőmérsékleten. A sejteket bouillonnal (húslevessel) mostuk ki aferde táptalajról, milliliterenként körülbelül lxl(r sejtet tartalmazó szuszpenzió előállítása céljából. A vizsgálat első napján a hüvelyt száraz vattapálcikával kitisztítottuk a nyák eltávolítása céljából, valamint azért, hogy enyhe irritációt váltsunk ki. A Candida albicans szuszpenziót (0,05 ml) három egymást követő napon (1., 2. és 3. napon) jutottuk be a hüvelybe, tompa végű tűvel ellátott fecskendő segítségével. Két nappal a fertőzés után (5. nap) mintákat vettünk tenyésztés céljára oly módon, hogy steril vattapálcikát vezettünk be a hüvelybe, majd e vattapálcikákat olyan csövekbe helyeztük, melyek az elkészített bouillon táptalajt tartalmazták (0,45 g/1 dkloherimidet és 0,1 g/1 kloramfenikolt tartalmazó Sabouraud-féle dextróz-bouillon). Valamennyi olyan állatot, melynél a tenyésztés eredménye negatív volt, kizártuk a további vizsgálatból, a kezelés megkezdése előtt. A fertőzés befejeződése után 4 nappal (a 7. napon) kúpokat helyeztünk a hüvelybe (a hatóanyaggal végzett kezelés). 10 napi kezelés után steril vattapálcika segítségével mintákat vettünk a hüvelyből. A vattapálcikákat ezután cikloheximidet (0,45 g/1) és kloramfenikolt (0,1 g/1) tartalmazó 10 ml 0,9%-os sóoldatba helyeztük, majd erőteljesen ráztuk, a hüvely-minta eltávolítása céljából. Minden egyes minta 2-2 ml-es, azonos mennyiségét ezután 0,45 mm-es Millipore szűrőn juttattuk keresztül. A szűrők sóoldattal végzett öblítését követően azokat Mycosa agar-lemezekre helyeztük és 37 °C-on inkubáltuk. 48 óra múlva megszámoltuk a szűrőkön lévő Candida albicans telepeket. Eredmények: A találmány szerinti kúpokat összehasonlítottuk ismert 2%, 5%, illetve 10% mikonazolt tartalmazó kúpokkal. A gyógyult hörcsögök százalékos aránya - amint áz a 10. napi tenyészetekből megállapítható (I. táblázat) - azt mutatja, hogy a találmány szerinti kúpok hatásosabbak a mikonazolt tartalmazó kúpoknál. I. Táblázat A hatóanyag és a mikonazol in vivo hatékonysága különböző, Candida albicans fertőzések elleni készítményekben, hörcsögnél Kúp egyszeri alkalommal történt alkalmazásával végzett kezelés - a tenyésztés 10 nap múlva történt 8 Készítmény Koncentráció (%) A gyógyult hörcsögök aránya (50 telep/hörcsög) 10. nap Hatóanyag 2 75 Hatóanyag 5 91 Hatóanyag 10 91 Vivőanyag-50 Mikonazcsl-nitrát 2 42 Mikonazol-nitrát 5 45 Mikonazol-nitrát 10 45 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás hatóanyagként cisz-2-(lH-imidazolilmetil)-3-(2’,6’-difluor-benzil-oxi)-2,3-dihidro-5-fl uor-benzo[b]tiofént tartalmazó hüvelykúp előállítására, azzal jellemezve, hogy 60-80 tömeg% növényi olajat, 1-5 tömeg%polietilént és 1-3 tömeg% hidratált kovasavat megolvasztunk, az olvadékhoz 40-50 °C-on keverés közben 2-20 tömeg% cisz-2- (lH-imidazoliI-metil)-3-(2’,6’-difluor-benzil-ojd) -2,3-dihidro-5-fluor-benzo[b]tiofént, 0,2-1,0 tömeg% poli(vinil-pirrolidont), 3-6 tömeg% felületaktív adalékot és 0-1 tömeg% antioxidánst adunk, majd a meleg homogén keveréket kúpformába kiöntjük és lehűtjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy növényi olajként 10-50 tömeg%, kókuszolajból és pálmamagolajból száramzó trigliceridek és 50-90 tömeg%, 12-18 szénatomos zsírsavból 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
