200890. lajstromszámú szabadalom • Hatóanyagként naftimidazolon-származékokat tartalmazó fungicid készítmények és eljárás a vegyületek előállítására
1 HU 200890 B 2 Példaszám Ri R2 Op. °C Elemanalízis 33 (CH2)5CN H 153-5 szám.: C 62,3; H 4,3; N 12,8 talált: C 61,3; H 4,7; N 13,4 34 CH(CH3)CH20CH3 H 134-6 szám.: C 59,1; H 4,3; N 9,2 talált: C 57,6; H 4,6; N 9,8 32. példa A találmány szerint előállított vegyületek fungicid hatását a következő tesztek segítségével vizsgáltuk. a) Közvetlen védőhatás szőlőperenoszpóra ellen (Plasmopara viticola, Pvp) A teszt közvetlen védőhatást vizsgál és lombpermetet használ. A teljes szőlőnövények (Cabernet Sauvignon) leveleinek alsó felületét bepermetezzük a hatóanyag 0,04 tömeg % „Triton X-155” (oktilfenolpoli-oxietilén felületaktív anyagot) tartalmazó víz és aceton 1:1 térfogatarányú elegyével készített oldatával, 20 ha hektáronként 1 kg hatóanyag dózist alkalmazunk. Olyan permetezőkészüléket használunk, amely 620 litert adagol hektáronként, majd 24 óra múlva normális üvegházi körülmények között a levelek alsó felületét beoltjuk 104 zoosporangia/ml tartalmazó vizes oldat- 25 tál. A beoltott növényeket 24 óra hosszat nagynedvességű helyiségben, majd 5 napig normális üvegházi körülmények között tartjuk és ezután visszavisszük további 24 órára a nagy nedvességtartalmú helyiségbe. A kiértékelést a kontroli-levelekhez képest végezzük, 30 úgyhogy, százalékosan kifejezzük a spórákkal befedett levélfelületet. b) Búzalevél foltosság elleni hatás (Leptosphaeria nodorum, Ln) A teszt közvetlen antisporuláns, lombpermetezést használunk. A búzanövények leveleit (cv Mardler) egyetlen levél állapotban beoltjuk 1 x 106 spóra/ml-t tartalmazó vizes szuszpenzióval történő permetezéssel. A beoltott növényeket 24 óra hosszat nagy nedves- 40 ségtartalmú helyiségben tartjuk a kezelés előtt. A növényeket 1 kg hatóanyag/hektár dózisban permetezzük be, és az a) pontban említett permetezőt használjuk. Szárítás után a növényeket 6-8 napig 20-25 °C és mérsékelt nedvességtartalom mellett tart- 45 juk, majd kiértékeljük az eredményeket. Az eredményeket a sérülések sűrűségére alapítjuk levelenként, összevetve a kontrollnövények leveleivel. c) Árpa lisztharmat elleni hatás (Erysiphe graminis 50 f. sp. hordei; Eg) A közvetlen antisporulánsés és lombpermetezést hasnzálunk. Az árpapalánták (Golden Promise) leveleit beoltjuk olymódon, hogy beporozzuk a lisztharmat konidiumokkal a teszt vegyülettel történő kezelés 55 előtt 1 nappal. A beoltott növényeket egész éjjel üvegházban szobahőmérsékleten és nedvesség mellett tartjuk, majd a következő nap a növényeket bepermetezzük 1 kg hatóanyag/hektár dózisban az a) pontban használt permetezőt alkalmazva. Szárítás után a 60 növényeket visszahelyezzük a 20-25 °C és mérsékelt nedvességtartalmú helyiségbe, maximum 7 napig, majd kiértékeljük az eredményeket. Az eredményeket a spórákat fedett levélfelület százalékos értékével fejezzük ki a kontrollnövények leveleivel összevetve. 10 d) Rizs levél vész elleni hatás (Pyricularia oryzae, Po) A teszt közvetlen pusztító teszt, lombpermetezést használunk. A rizspalántákat - cserepenként kb. 30 palántát - a levélen bepermetezzük 105 spóra/ml-tar- 15 talmú vizes szuszpenzióval a teszt-vegyülettel végzett kezelés előtt 20-24 órával. A beoltott növényeket egész éjjel magas nedvességtartalmú helyiségben tartjuk, majd a permetezés előtt hagyjuk megszáradni, és bepermetezzük 1 kg hatóanyag/hektár dózissal az a) pontban használt permetező segítségével. A növényeket a kezelés után rizs helyiségben tartjuk 25-30 °C-on nagy nedvességtartalom mellett. 4-5 nappal a kezelés után kiértékeljük az eredményeket és az eredményt az elhalt, sérült felületek sűrűségére alapítjuk összevetve a kontrollnövényekkel. e) Paradicsom korai üszkösödés elleni hatás (Altemaria solani; As) A teszt arra szolgál, hogy a tesztvegyületek kontakt profilaktikus hatását méri lombpermetezés alkalmazásával. Outdoor Girl paradicsompalántákat olyan stádiumig fejlesztünk, melynél a második igazi levél fejlődik ki. A növényeket az a) pontban megadott módon 35 permetezve kezeljük. A tesztvegyületeket oldat vagy szuszpenzió formájában alkalmazzuk 50:50 térfogat arányú elegyben acetonnal és vízzel készítve, amely 0,04 % Tween 20 felületaktív anyagot tartalmaz. A kezelés után 1 nappal a palántákat beoltjuk úgy, hogy az A solani konidiumok szuszpenziójával bepermet«zzük a levelek felső felületét. A szuszpenzió 104 spórát tartalmaz ml-enként. 3 napra a beoltás után a növényeket üvegházban tartjuk 100 % relatív nedvességtartalom mellett és 21 °C-on. Ezután a növényeket nedves, de nem telített nedvessgétartalmú helyiségben tartjuk. A betegséget 7 nappal a beoltás után értékeljük ki a sérülések elterjedési sűrűsége alapján. f) Búza szártő betegség elleni hatás (Pseudocercosporella herpotrichoides; PhI) Ez a teszt a vegyületek in vitro hatását méri búza szártő betegséget okozó gomba ellen. A tesztvegyületet acetonban oldjuk vagy szuszpendáljuk és olvasztott félerősségű burgonyadextróz agárhoz adjuk és így 100 ppm hatóanyagkoncentrációjú elegyet kapunk, amely 3,5 % acetont tartalmaz. Az agar beállása után a lemezeket 6 mm átmérőjű agar/micélium dugókkal oltjuk be, amelyeket P. herpotrichoides 14 napos tenyészetéből vettünk. A lenezeket 20 °C-on 12 napig inkubáljuk és a beoltási dugó radiális növekedését lemérjük. A fungicid hatás mértékét a fenti testekben a hígítóval bepermetezett kontrolihoz viszonyítva fe- 65 jezzük ki a következő kritérium alapján: 5
