200798. lajstromszámú szabadalom • Hatóanyagként ciklusos belső anhidridet, vagy annak szabad sav formáját, vagy ennek bázissal képzett sóit tartalmazó herbicid készítmények, és eljárás a hatóanyag előállítására
7 HU 200798 B 8 kalciumsói, vagy maguk a szulfonsavak, így ligninszulfonsav, nátrlum-dodecll-benzolszulfonát vagy nátrium-dlalkil-szulfoszukcinátok; polioxletilón—alkil—arll—éter—szulfátok vagy polioxietilónalkil-óter-szulfátok sói, például nátrium-, amrpónium- és aminsói, vagy maguk a szabad savak; vagy polioxletilón—alkll—arll— -éter-foszfátok vagy polioxietllén—alkll—foszfátok sói lehetnek. A katlonos felületaktív szerek például hosszúszénláncú alifás aminok, vagy a fenti aminok etilón-oxidos kondenzátumal; kvaterner ammóniumsók, például kloridok, N-alkll-amin-acetátok és N-alkil-amin-oxidok lehetnek. Az amfoter felületaktív szerek például betainok vagy aminosav-típusú felületaktív szerek lehetnek. A nemionos felületaktív szerekre példaként a gllcerideket és zsírsavak szacharózzal alkotott észtereit, etilén-oxid hosszúszénláncú alifás alkoholokkal képzett kondenzátumait, etilén— -oxíd alkil-fenolokkal vagy alkll-naftolokkal képzett kondenzátumait, hosszúszénláncú zsírsavak amidjait vagy etoxilezett amidjait, szorbltán vagy etoxilezett szorbitán hosszúszónláncú zsírsavakkal képzett észtereit, glicerin-borátok vagy etoxilezett glicerin-borátok hosszúszénláncú zsírsavakkal képzett észtereit, vagy az etilón-oxid-propilón-oxid-kopolimereket említhetjük. A találmány szerinti mezőgazdasági készítmények kívánt esetben egyéb komponenseket is tartalmazhatnak, például védőkolloidokat, így zselatint, gumiarábikumot, kazeint, poli/vlnll—alkohol/—t vagy karboxi-metil-cellulózt; diszpergálószereket, így bentonitot vagy végumit; stabilizálószereket; kötőanyagokat; és fagyásgátló anyagokat. A szólesebbkörű alkalmazhatóság és a munka megtakarítása érdekében a találmány szerinti készítményeket kívánt esetben egy vagy több más mezőgazdasági készítménnyel — például fungiciddel, inszekticiddel, herbiciddel, növényi növekedésszabályozóval vagy műtrágyával — is kombinálhatjuk. A kornexisztin, szabad sav formája és ennek sói előállítását — a korlátozás szándéka nélkül — az alábbi példákban ismertetjük közelebbről. A kornexisztint tartalmazó készítmények előállítását ezt követően a formálási példákkal, míg a kornexisztin aktivitását a kísérletekkel szemléltetjük. 1 1. példa 80 ml alábbi összetételű tápközeget tartalmazó, 500 ml-es ledugaszolt lombikba 1 kacsnyl Paecllomyces variotil SANK 21086 tenyészetet oltunk, és a tenyésztést 26°C-on, rotációs rázógépen 200 fordulat/perc sebességgel rázatva 168 órán keresztül folytatjuk. Tápközeg összetétele: glicerin 50 g friss burgonya 50 g élesztő-kivonat 5g maláta-kivonat 5 g ionmentes víz 1 liter (pH=6,5) Az így kapott Inokulum 0,5 ml-ével beoltunk 25 darab, 80 ml fenti tápközeget tartalmazó 500 ml-es bedugaszolt lombikot, és a lombikokat 26°C-on 192 órán keresztül 200 fordulat/perc sebességű rotációs rázógépen rázatjuk. A kapott, összesen 2 liter tenyészetet egyesítjük, és hozzáadunk 200 g CeliteR 545 szűrési segédanyagot (Johns Manville Products Corp., U.S.A.). A kapott elegyet ezután szűrjük. 1,7 liter szűrletet kapunk, pH-ja 6,0. A szűrletet 300 ml Diaion HP20-at (Mitsubishi Chemical Industries Co.) tartalmazó oszlopon átfolyatva adszorbeáljuk a hatóanyagot. Az oszlopot 1 liter ionmentes vízzel mossuk, majd 1 liter 80 térfogat%-os vizes acetonoldattal eluáljuk. A kapott 1 liter eluátumot csökkentett nyomáson bepároljuk, majd fagyasztva szárítjuk. 3 g hatóanyagot tartalmazó nyersterméket kapunk, por formájában. A fenti por 2,7 g-ját 400 ml ionmentes vízben oldjuk, és az oldat pH-ját 2,5-re állítjuk. Az oldatot ezután kétszer 400 ml etil-acetáttal extraháljuk. 800 ml etil-acetátos oldatot kapunk, amely kornexisztint tartalmaz. Az etil— -acetátos oldatot kétszer 300 ml 0,1 mól/l koncentrációjú vizes dinátrium-hidrogén-foszfát—oldattal, majd ismét kétszer 300 ml telített, vizes nátrlum-klorid-oldattal mossuk. Az oldatot vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, majd csökkentett nyomáson bepárolva kon centráljuk. 650 mg, kornexisztint tartalmazó olajos anyagot kapunk. A kapott olajos anyagot etil-acetát és kloroform 1:1 térfogatarányú elegyében oldjuk, majd 150 ml Sephadex LH-20-szal töltött oszlopon (amelyet előzőleg etil-acetát és kloroform 1:1 térfogatarányú elegyével ekvilibráltunk) átfolyatva adszorbeáljuk. Az oszlopot a fenti oldószereleggyel eluáljuk. Az eluátumot 10 ml-es frakciókban szedjük, és a korrexisztlnt tartalmazó frakciókat (22 — 28. frakció) egyesítjük és csökkentett nyomáson bepároljuk. 100 mg kornexisztint kapunk, amelynek tisztasága kb. 70%-os. 2. példa Az 1. példában ismertetett tenyésztési műveletet megismételve 1,8 liter szűrletet kapunk. A szűrlet pH-ját 2,5-re állítjuk, majd kétszer 1,5 liter etil-acetáttal extraháljuk. 3 liter, kornexisztint tartalmazó etil-acetátos oldatot kapunk. A kapott oldatot kétszer 1 liter 0,1 mól/l koncentrációjú vizes dinátrium-hidrogén-foszfátoldattal, majd ismét kétszer 1 liter telített, vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk. Az oldatot vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, majd csökkentett nyomáson bepárolva koncentráljuk. 700 mg olajos anyagot kapunk. A kapott olajos anyagot 80 ml Sephadex LH-20-szal töltött oszlopon — amelyet előzőleg etil-acetát és kloroform 1:1 térfogatarányú ele5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
