200775. lajstromszámú szabadalom • Eljárás milbemicin-származékok előállítására
17 HU 200775 B 18 Előállítás: a hatóanyagot az olaj egy részével keverés és adott esetben enyhe melegítés közben oldjuk, majd lehűtés után a kívánt térfogatra töltjük, és megfelelő, 0,22 pm pórusméretű membrénszűrűvel sterilre szűrjük. 5 b) vízzel elegyedő oldószer (közepes IDŐTARTAMÚ HA TÓANYAG-FELSZABADiTÁS) H1-H12. példák szerinti hatóanyag 4-hidroxi-metil-l,3-dioxolán (Glycerol Formal) 1,2-propándiol 0.1-1.0 g 40 g 100 ml-re. H1-H12. példák szerinti hatóanyag glicerin-dimetil-ketál 1,2-propándiol 0.1-1.0 g 40 g 100 ml-re. Előállítás: a hatóanyagot az oldószer egy részével keverés közben oldjuk, majd a kívánt térfogatra töltjük fel, és megfelelő, 0,22 um pórusméretű membránszűrón sterilre szűrjük. 10 15 20 25 C) VIZES OLDAT (GYORS HATÓANYAG-LEADÁS) H1-H12. példák szerinti hatóanyag polietoxilezett ricinusolaj (40 etilén-oxid egység)* 1,2-propándiol benzil-alkohol steril víz * = CREMOPHORSfeL (BASF AG) néven kereskedelmi forgalomban. 0.1-1.0 g 30 10 g 20 g 1 g 100 ml-re. 35 H1-H12. példák szerinti hatóanyag polietoxilezett szorbitán-monooleát (20 etilén-oxid egység)“ 4- hidroxi-metil-1,3-dioxolán (Glycerol Formal) benzil-alkohol steril viz 0.1-1.0 g 8 g 20 g 1 g 100 ml-re. “ = TweenßteO (ICI); kereskedelmi forgalomban levő termék. 40 45 50 Előállítás: a hatóanyagot az oldószerben és a tenzidben oldjuk, és vízzel kívánt térfogatra töltjük. Az oldatot megfelelő, 0,22 /um pórusméretű membránszűrón sterilre szűrjük. A vizes rendszereket előnyösen alkalmazhatjuk orális és/vagy bendöbe történő adagolás esetén is. BIOLÓGIAI PÉLDÁK Bl. példa Hatás Lucilia sericata L1 lárvái ellen A vizsgálandó hatóanyag 1 ml vizes szuszpenzióját 3 ml speciális lárva táptalajjal keverjük 50 °C hőmérsékleten, oly módon, hogy 250 vagy 125 ppm hatóanyag-koncentrációjú homogenizátum keletkezzék. Minden egyes, táptalajt tartalmazó kémcsőbe körülbelül 30 Lucilia lárvát (Li) helyezünk. Négy nap elteltével megállapítjuk a mortalitás %-os értékét. Az (I) általános képletű vegyületek, például a H1-H12. példában leírt hatóanyagok 250 ppm koncentrációban 100%-os pusztulást eredményeztek. B2. példa Atkaölő hatás Boophilus microplus (Biarra-törzs) ellen PVC-lemezre vízszintesen ragasztócsikot erősítünk oly módon, hogy arra 10, vérrel teleszivott Boophilus microplus (Biarra-tőrzs) nőstényt egymás mellé hátukkal a lemez felé, felerősíthessünk. Minden kullancsba injekcióstűvel 1 yl folyadékot injektáltunk, mely 1:1 arányú polietilénglikol-aceton elegyböl és 1,0 pg/kullancs hatóanyag-mennyiségből állt. A kontrollként alkalmazott állatok hatóanyag nélküli' injekciót kaptak. A kezelés után az állatokat normális körülmények között, 28 °C hőmérsékleten és 80% relatív nedvességtartalmú levegőjű inszektáriumban tartottuk, a peték lerakáséig, illetve, amíg a lárvák a kontroll állatok petéiből kifejlődtek. A vizsgált anyag hatását IRm értékkel jellemeztük; azaz, meghatároztuk azt a hatóanyag-dózist, amely ahhoz volt szükséges, hogy 30 nap elteltével a 10 kullancs nőstény közül 9 (=90%) olyan petéket rakjon, melyekből nem fejlődött ki lárva. A fenti kísérletben az (I) általános képletű vegyületek, például a H1-H12. példák szerinti hatóanyagok 5 pg/g dózisnál mutatták az IRso értékeket. B3. példa Nematódákkal (Haemonchus contortus és Trichostrongylus colubriformis) fertőzött juhokon végzett kísérlet 60 ^ A hatóanyagot szuszpenzió alakra formáltuk, és gyomorszondával vagy injekcióval adtuk juhoknak, melyeket mesterségesen Haemonchus contortussal és Trichostrongylus colubriformissal fertőztük. Dózisonként 1-3 65 állatot alkalmaztunk. Minden juhot csak egy-11
