200763. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, helyetesített benzinidazolszármazékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

HU 200763 B

27

28

stimulált ATPáz aktivitást a fenti preparátumokban, pH 6,1-nél és 7,4-nél.

B.Aminopirin (AP) felhalmozódás épgyomormirigyekben

Az (I) általános képletű vegyület egyetlen koncentrációjának (100 |iM) a dibutiril-dklusos adehozin 5’-monofoszfát-stimulált aminopirin (AP) metabolizmusra gyakorolt hatását határoztuk meg. Az előnyös (I) általános képletű vegyületeket széles koncentrációtartományban vizsgáltuk az IC50 érték meghatározása céljából.

(i) Ép gyomormirigyek előállítása

Ep gyomormirigyeket „New Zealand törzsű fehér nyulakból preparálunk Berghindh és munkatársai módszerével (Acta physioL Scand. 95, ISO /1976/). Gyomornyálkahártyakaparékot 37 #C-on 45-00 percig kollagenázzal (100 E, Type I, Sigma cég) emésztünk és a mirigyeket durva szemcsés szűrőn átszűrve és leülepítve gyűjtjük össze.

(ii) AP felhalmozódás

A vizsgálandó vegyületet a mirigyekkel és 100 mM dibutiril-cAMP-vel inkubáljuk 30 percig 37 °C- on. Az inkubációs közeg; 132^ mM NaCl, 5,4 mM KC1,1,0 mM NaH2P04,1,2 mM MgSO«,1,0 mM CaCl2,11,1 mM glukóz, 2,0 mg/ml nyúl-albumin, 10 jjLg/ml fenolvörös, körülbelül 0,3 pM 14C-aminopirin (110 mCi/mmól), pH 7,4.

Inkubálás után a mirigyeket lecentrifugáljuk és a felülúszót elválasztjuk. A mirigyeket megszárítjuk, leméijük és nátrium-hidroxid-okiatban feloldjuk. A radioaktivitásnak a felülúszó és a mirigyek közötti megoszlását használjuk fel az AP arány kiszámítására, Berglindh és munkatársai módszere szerint (Acta physioL scand. 97,401 /1976/)Az ICso érték a vegyület azon mennyisége, amely az aminopirin hisztamin-stimulált felhalmozódását 50%-kal csökkenti.

(iii) Eredmények

Példa vegyülete

IC50 (fJuM)

2

6,6

4

11,0

6

16,3

8

4,2

10

2,0

12

1-10,0

14

2,6

16

3,7

18

1,6

20

1,3

22

9,2

23

1,9

Példa

vegyülete

Adagolás

útja

ED50

pmól/kg

2

i.v.

1,46

4

i.v.

1,17

6

i.d.

1,94

8

i.d.

2^8

14

i.v.

0,82

16

i.d.

1,46

18

i.v.

0,85

20

i.v.

0,86

22

i.d.

4,55

A fenti próbák egyikében sem észleltük a toxikusság nyílt jeleit.

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

20

1. Eljárás (I) általános képletű vegyületek—melyekben

R2 és R3 egyike hidrogénatom és a másik 1-4 szénatomos alkoxicsoport, vagy 3-5 fluoratommal 25 szubsztituált etoácsoport, vagy R2 vagy R3 a szomszédos 4-es helyzetű szénatomhoz kapcsolódva difluor-metilén-dioxi-csoportot képez; n értéke 0 vagy 1;

R5 és R6 azonosak és jelentésük hidrogénatom, 30 1-4 szénatomos alkilcsoport, vagy R5 és R° a nitrogénatommal együtt, amelyekhez kapcsolódnak, pirrolidino-, piperidino- vagy morfolinocsoportot képez; és

R7 és R8 egyike halogénatom, a másik pedig hid- 35 rogén- vagy halogénatom vagy 1-4 szénatomos a!

kilcsoport—és gyógyászatiig elfogadható sóik előállítására, azzal jellemezve, hogy

olyan (I) általános képletű vegyületek előállítására, amelyekben n értéke 0, egy (II) általános kép- 40 letű vegyületet egy (III) általános képletű vegyülettel reagáltatunk, amelyekben R2-R8 jelentése megadott, és L1 és L2 egyike merkaptocsoportot és másika merkaptánnal kiszorítható, távozó csoportot jelent; 45 és kívánt esetben

(i) a képződött (I) általános képletű vegyületet, ahol n = 0, olyan (I) általános képletű vegyületté oxidáljuk, ahol n= 1, és/vagy

(ii) gyógyászatiig elfogadható sót képezünk.

50 (Elsőbbsége: 1985.11.01.)

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan (II) és (III) általános képletű vegyületeket alkalmazunk kiindulási anyagként, amelyekben

55 R2 és R3 közül egyiknek a jelentése hidrogénatom és a másik 1-4 szénatomos alkoxicsoport,

n értéke 0 vagy 1.

R5, R6, R7, R , L1 és L2jelentése pdig az 1. igény-C. Patkány: Gyomorperfüzió (hisztamin-stimu- 60

Iáit gyomorsavkiválasztás)

Ghosh és Schild (Brit. J. Pharmacol. 13, 54 /1958/) módosított eljárását használva intraduodenális (i.d.) vagy intravénás (i.v.) alkalmazás után a következő ED50 értékeket kapjuk: 65

pontban megadott.

(Elsőbbsége: 1984.11.02.)

3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan (II) és (III) általános képletű kiindulási anyagokat alkalmazunk, amelyekben

R* 1 2 és R3 * közül, az egyik hidrogénatom és a másik 3-5 fluoratommal szubsztituált etoxicsoporí

15