200611. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az inzulin-prekurzorok diszulfidhíd-képzéssel történő előállítása során kapott reakcióelegyek feldolgozására, a helytelen rekombinánsok hasznosításával

(19) Ország kód

SZABADALMI

(11) Lajstromszám

HU

LEÍRÁS

200611 B

(22) Bejelentés napja: (1986.01.11.) (21) (1143/86)

(51)

(86) Nemzetközi bejelentési szám: PCT/EP86/Ö0008

(87) Nemzetközi közzétételi szám: W086/04335

Int Cl5 C07K 3/12 C07K 7/40

MAGYAR

KÖZTÁRSASÁG

Bejelentés elsőbbsége: (33) DE

(32)1985.01.19. (31) (P 35 01 641.8)

ORSZÁGOS

TALÁLMÁNYI

HIVATAL

(41) (42) Közzététel napja: 1988. 09. 28.

(45) Megadás meghirdetésének dátuma

a Szabadalmi Közlönyben: 1990. 07. 30.

(72) Feltaláió(k): (71) Szabadalmas:

Dr. GRAU, Ulrich, Hofheim/Taunus, DE Hoechst AG, Frankfurt/Main, DE

(54) ELJÁRÁS AZ INZULIN-PREKURZOROK DISZULFIDHÍD-KÉPZÉSSEL TÖRTÉNŐ ELŐÁLLÍTÁSA SORÁN KAPOTT REAKCIÓELEGYEK FELDOLGOZÁSÁRA A HELYTELEN REKOMBINÁNSOK HASZNOSÍTÁSÁVAL

(57) KIVONAT

A találmány tárgya új eljárás a teljes inzulinvázat tartalmazó inzulin-prekurzoroknak a megfelelő nyíltláncú, az inzulin A-láncot és az inzulin B-láncot a cisztein-kénatomokon képezett S-szulfonátok alakjában tartalmazó előtermékből, valamely merkaptán jelenlétében, a nyíltláncú S-szulfonátot lefeljebb 10 mg/ml kocentrációban tartalmazó vizes közegben, 0 “C és 37 "C közötti hőmérsékleten, 7 és 11 közötti pH-értéknél lefolytatott diszulfidhíd-kapcsolási reakció útján történő előállítása során kapott reakcióelegyek feldolgozására, a helytelen rekombinánsok elkülönítésével az újbóli hasznosításával, amelynek során a kapott reakcióelegyet, kívánt esetben 1-400 mg/1 fiziológiailag ártalmatlan felületaktív anyag, előnyösen polietilén- és/vagy polipropilén-glikol típusú vízben oldódó polimer hozzáadása után, 4 és 6 közötti pH- értékre állítják be. A levált csapadékot elkülönítik és szulfolízis útján visszaalakítják az inzulin A-láncot és inzulin B-láncot tartalmazó, újbóli diszulfidhíd-képzési reakciónak alávethető S-szulfonáttá.

{A—1)

(Jly -NH ——---------------------<

(A-6

)

^yS_S_® (A-20) (A-21)

(A—7)

Cys----Cys--------Cys—Asn-OH

s S

S s

(8

-1)

1 1-HN- Phe-Cys---------------Cys------------i

(B-19)

(1)

(A — 1)

Gly-Nh

(A-S)

cys-s-so; s-so;, ,, ,. 1 J| 4 (A-20) (A-21)

CO

(A-7!

Cys--------Cys— Cys-Asn-OH

1 (A—

11) 1 6—SO3" S-SO3

(B-1)

S-SOf S—SO3'

R—HN— Phe-Cys----------------Cys------------V

<0

(0-7) (B-19)

(II)

0

0

CM

A leírás terjedelme: 8 oldal, 1 ábra