200607. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 23-dezoxi-LL-F28249 jelű vegyületek epoxi-származékai és a hatóanyagként ezeket a vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 200607 B 2 mentációs maradékok, őrölt kagylóhéj, búzaderce, oldható melaszfélék, kukoricacsutka liszt, ehető bab-őrlési-maradék, szójadara és őrölt mészkő. A hatóanyagokat ezekkel a hordozóanyagokkal bensőségesen diszpergáljuk, ehhez például őrlést, keverést, aprítást vagy koptatást alkalmazunk. Különösen alkalmasak takarmánypremixként való felhasználásra a 0,005-2,0 tömeg% hatóanyagot tartalmazó készítmények. Az állatoknak közvetlenül beadható takarmányadalékok mintegy 0,0002-0,3 tömeg% hatóanyagot tartalmaznak. Az ilyen adalékokat olyan mennyiségben adjuk hozzá az állat takarmányához, hogy a végső állapotú takarmány a hatóanyagot a parazitás megbetegedés kezelésére, megelőzésére és/vagy ellenőrzésére szükséges koncentrációban tartalmazza. Bár a hatóanyag kívánt koncentrációja a korábban említett tényezőktől függőén változó, valamint függ a konkrét esetben felhasznált hatóanyagtól, a találmány szerint előállított vegyületeket a tápba kevert 0,00001-0,02 tömeg% mennyiségben etetve érjük el a kívánt parazita-ellenes hatást. A találmány szerint előállított vegyületek alkalmazhatók oldat formájában az állatok bőrére öntve. Általában a hatóanyagot megfelelő közömbös oldószerben, például dimetil-szulfoxidban, propilénglikolban vagy hasonló oldószerekben oldjuk fel, vagy más megoldás szerint oldószerek kombinációjában oldva használjuk a leöntéses kezeléshez. A továbbiakban a találmányt példákkal világítjuk meg. A példák nem korlátozó jellegűek. 1. Példa 5,23-0.0-Bisz(terc-butil-dimetil-szilil)-LL-F28249a előállítása 20 ml dimetil-formamid, 2,0 g LL-F28249a, 3,72 g terc-butil-dimetil-szilil-klorid és 2,38 g imidazol elegyét nitrogéngáz atmoszférában, olajfürdőben 60 °C hőmérsékleten 6 órán át melegítjük. Az elegyet ezután lehűtjük, 5 ml vizet adunk hozzá és 100 ml vízzel és 50 ml sóoldattal meghígítjuk. A terméket a vizes elegyből 2x50 ml dietil-éterrel extraháljuk. Az egyesített dietil-éteres extraktumokat 2x25 ml vízzel, majd 10 ml sóoldattal mossuk, és magnézium-szulfáton szántjuk. Az oldatból a dietil-étert eltávolítva a cím szerinti vegyületet nyerjük. A terméket tömegspektrometriás és magmágneses rezonancia spektrometriás (NMR) vizsgálatokkal azonosítjuk. 2. Példa LL-F28249a-C(26,27)-epoxid előállítása 105,4 mg 5,23-0,0-bisz(terc-butil-dimetil-szilil>-LL-F28249a-t 5 ml diklór-metánban oldunk és az oldatot szárazjég-aceton fürdőben hűtve 27,8 mg m-klór-peroxi-benzoesavat adunk hozzá. A reakcióelegyet nitrogéngáz atmoszférában 1 órán át keverjük, hőmérsékletét -42 °C-ra emeljük, 2 órán át ezen a hőmérsékleten, majd 1 órán át -20 °C hőmérsékleten tartjuk az elegyet. Az oldatot 1 ml telített nátrium-szulfit-oldattal, 1 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd 1 ml sóoldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, majd bepároljuk. A visszamaradó anyagot szilikagélen flash-kromatografáljuk, eluensként 5 % etil-acetát tartalmú hexánt, majd 10 % etil-acetát tartalmú hexánt alkalmazunk. A 16-20. frakciókból 45 mg monoepoxidot nyerünk. 30,3 mg epoxidot 1 ml metanolban 10,2 mg p-toluolszulfonsav-monohidráttal, nitrogéngáz atmoszférában 7,5 órán át keverünk. Az elegyet 1 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és 5 ml vízzel meghígítjuk, majd háromszor 2 ml dietil-éterrel extraháljuk. Az egyesített dietil-éteres extraktumokat sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szántjuk, szűrjük, majd szárazra pároljuk. A visszamaradó anyagot flash-kromatográfiás berendezésen szilikagélen kromatografáljuk 2 % izopropanolt tartalmazó diklór-metán alkalmazásával. így 43 %-os hozammal 9,4 mg LL-F28249a-C(26,27)-epoxidot nyerünk, amelyet tömegspektrometriás és NMR spektroszkópiás eljárásokkal azonosítunk. 3. Példa 5-0~terc-Butil-dimetil-szilil-LL-F28249o.-C(2627)-epoxid előállítása 200 mg LL-F28249a-C(26,27)-epoxidot 5 ml diklór-metánban 130 mg imidazollal reagáltatunk, majd nitrogéngáz atmoszférában szobahőmérsékleten 5 ml diklór-metánban lévő 140 mg terc-butil-dimetil-szilil-kloridot (TBDMS-klorid) adunk hozzá. A reakcióelegyet keverjük és az átalakulás százalékos mértékét nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással végzett vizsgálattal követjük nyomon. A reakcióelegybe további 2,5 ekvivalens imidazolt és TBDMS-kloridot adunk, és a keverést további 5 napon át folytatjuk. Az elegyet ezután 2x10 ml vízzel, majd 20 ml sóoldattal mossuk, és a diklór-metános fázist magnézium-szulfáton szántjuk. Az oldatot szárazra pároljuk, és a visszamaradó anyagot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként 1; 1 arányú heptán-diklór-metán elegyet alkalmazunk. így a cím szerinti vegyületet nyerjük, amelyet tömegspektrometriás és NMR-spektroszkópiás eljárással azonosítunk. 4. Példa 23-0[(4-Metil-fenoxi)-tiokarbonil]-LL-F28249(x-C(26,27)-epoxid előállítása 2 ml száraz piridinben levő 120 mg 5-0-terc-butil-dimetil-szilil-LL-F28249a-C(26,27)-epoxidot 4 mg 4-dimetil-amino-piridinnel nitrogéngáz atmoszféra alatt jégfürdőben keverünk, és fecskendőből 0,24 ml 0-p-tolil-klór-tioformiátot adunk hozzá. Az elegyet 3- 10 °C hőmérsékleten keverjük. 1 óra elteltével az elegyhez 0,2 ml 0-p-tolil-klór-tioformiátot adunk, és az elegyet 45 °C hőmérsékleten 1 órán át keverjük. Az elegyhez ezután 20 ml jeges vizet adunk, 10 percig keverjük, majd 3x20 ml dietil-éterrel extraháljuk. Az egyesített éteres fázisokhoz ecetsavat adunk, egymást követően vízzel, nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd sóoldattal mossuk. Az éter lepárlása után a szililezett tiokarbonát-származékot nyerjük, amelyet kromatográfiás eljárással tisztítunk és tömegspektrometriás és NMR spektroszkópiás eljárással azonosítunk. A 2. példa szerint végzett deszililezéssel a cím szerinti vegyületet nyerjük. 5. Példa 23-Dezoxi-LL-F28249a-C(26,27)-epoxid előállítása 2 ml toluolban lévő 6,2 mg 23-0[(4-metil-fenoxi)-tiokarbonil]-LL-F28249a-C(26,27)-epoxidhoz 3 pl tributil-ón-hidridet és katalitikus mennyiségű azo-bi-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
