200487. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új demetil-avermektin-származékok előállítására
1 HU 200487 B 2 két termelnek. Ezekhez a mutánsokhoz úgy juthatunk hozzá, hogy az itt ismertetett mutánsokat, melyek az ultraibolya fény és/vagy kémiai mutagén ágensek, mint amilyen az N-metil-N-nitrozo-uretán, nitrozo-guanidin, etil-metánszulfonát vagy más, fentebb felsorolt ágens hatására az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitásukat elvesztették, mutagenizáljuk. Alternatív módon kiindulhatunk olyan mutánsokból, melyek az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz aktivitással rendelkeznek, de hiányzik az egyik vagy mindkettő O-metil-transzferáz aktivitásuk. Ezeket a mutánsokat ultraibolya fénnyel vagy mutagén ágensekkel kezeljük, hogy olyan mutánsokhoz jussunk, melyek nem rendelkeznek az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz és/vagy az elágazó láncú-aminosav-transzamináz aktivitással. Az ezek a mutánsok által előállított nem-természetes avermektineket az jellemzi, hogy az ágiikon 5-ös szénatomján és/vagy az oleandróz 3’ és/vagy 3” szénatomján hidroxilcsoportot találunk. A fent leírt mutánsokat Schulman és munkatársai [Antimicrobiol Agents and Chemotherapy, 29: 620- 624 (1986)] módszerével határozzuk meg. Ugyanazon céllal és módon használjuk fel őket, mint az ismert avermektinekkel kapcsolatban tették. A vegyületek hatásosak endoparaziták okozta különféle megbetegedések kezelésére, ideértve a helmintiázist, melyet leggyakrabban a parazita férgek egy csoportja, a nematódák okoznak. A helmintiázis súlyos gazdasági károkat okoz sertéseknél, juhoknál, lovaknál és szarvasmarháknál, valamint felléphet más háziállatoknál és a baromfiaknál is. A vegyületek más nematódákkal szemben is hatásosak, így például a kutyákban élősködő Dirofilaria-val szemben. Hatásosak az ember gyomor-bél rendszerében élő Acylostoma, Necator, Ascaris, Strongyloides, Trinchinella, Capillaria, Trichuris. Enterobius ellen, továbbá a vérben és más szövetekben és szervekben élő paraziták, például a Filaria férgek és a bélrendszeren kívüli állapotban levő Strongyliodes és Trichinella ellen. Sikerrel alkalmazhatók a vegyületek ektoparazitákkal szemben is, ideértve elsősorban az emlősök és madarak ízeltlábú ektoprazitáit, mint amilyenek az atkák, kullancsok, tetve, legyek, húslegyek, csípő rovarok és a kétszárnyúak; szarvasmarhákon, lovakon élősködő migráló lárváik. A vegyületeket hatásos inszekticidként használhatjuk a háztartásban előforduló rovarokkal, például csótányokkal, ruhamollyal, múzeumbogárral és háziléggyel szemben, de hatékonyak a raktározott gabonát és mezőgazdasági növényeket károsító rovarok elpusztításában is, mint amilyenek az atkák, levéltetvek, hernyók, és a vándorló egyenesszárnyúak, például a sáskák. Az (I) általános képlett! vegyületek beviteli módja függ a készítmény megformáltságától, különösen a kezelendő gazdaállattól és a kérdéses parazitától. Antelmintikumként alkalmazva a vegyületeket bejuttathatjuk szájon keresztül, azaz kapszula, bólusz, tabletta vagy ivóié alakjában, de injekcióval vagy beültetéssel is. Ezeket a készítményeket az állat-gyógyszertechnológiában szokásos módon állítjuk elő. így a kapszulákat, bóluszokat vagy tablettákat úgy állíthatjuk elő. hogy a hatóanyagot finoman elporított alkalmas hígító- vagy vivőanyaggal keverjük össze, mely szétesést elősegítő anyagot és/vagy kötőanyagot, például keményítőt, laktózt, talkumot, magnézium-sztearátot, stb. tartalmaz. Az ivóié elkészítéséhez a hatóanyagot vizes oldatban diszpergáljuk, mely diszpergáló vagy nedvesítő anyagot, stb. is tartalmaz. A befecskendezésre alkalmas készítményt steril oldatként készítjük el. ami más anyagokat is tartalmazhat, például az oldatot a vérrel izotóniássá tevő sókat vagy glükózt. A kezelendő állatfajtól, a fertőzöttség súlyosságától, a gazdaállat tömegétől függően a készítmények eltérnek egymástól a hatóanyag mennyiségét illetően. Szájon keresztüli adagolásnál testtömegkilogrammonként általában 0,001- 10 mg hatóanyagot juttatunk be egyszeri vagy osztott dózisként 1-5 napos időtartamra számolva, de alkalmazhatunk alacsonyabb vagy magasabb dózist is, ez a találmány oltalmi körét nem korlátozza. Az előzőektől eltérő módon a vegyületeket bejuttathatjuk az állatok táplálékával is. E célból tömény tápadalékot vagy premixet készítünk, amit a szokásos takarmányhoz keverhetünk. Inszekticidként vagy a mezőgazdasági kórokozók elleni szerként a vegyületeket alkalmazhatjuk permetként, porzószerként, emulzióként vagy a mezőgazdasági gyakorlatban szokásos hasonló készítményként. Az elágazó láncú-2-oxosav-dehidrogenáz hiányos S. avermitilis 1-3 (ATCC 53567) törzset az alábbi lépéseken keresztül állítottuk elő: 1. lépés: Az S. avermitilis ATCC 31272 törzset összefüggő telepekké növesztjük 12 nap alatt 30 °C hőmérsékleten New Patch Agar Medium táptalajon. A táptalaj összetétele: V-8 tápléa 200 ml kalcium-karbonát 3 g agar 15 g vízzel kiegészítve 1000 ml-re Nutrient broth 1,0 g/1 nátrium-acetát-3-víz 1.4 g/1 izovaleriánsav 50 mg/1 izovajsav 50 mg/1 2-metil-vajsav 50 mg/1 izoleucin 250 mg/1 leucin 250 mg/1 valin 250 mg/1 nyomelemoldat* 1 ml/1 a A V-8 táplé nyolc növényi levet (paradicsom, sárgarépa, zeller, répa, petrezselyem, saláta, vízitorma és spenót), aszkorbinsavat, citromsavat és természetes ízesítőszereket tartalmaz (Campbell Soup Company, Camden, NJ. USA). * A nyomelemoldat összetétele: vas(III)-klorid-6 víz 2.7 a mangán(II)-szulfát-víz 4,2 g réz-szulfát-5 víz 0,5 a kalcium-klorid 11.0 g bórsav (H3BO3) 0.62 a kobalt-klorid-6 víz 0.24 g cink-klorid 0.68 g nátrium-molibdenát (Na^MoO-O 0,24 g 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
