200455. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pirimidin-származékok előállítására
3 HU 200455 B 4 szerben, igy metanolban, amely 1 ekvivalens szerves tercier amint, igy trietil-amint tartalmaz. A reakciót szobahőmérsékleten végezzük, a reakcióidő körülbelül 12-14 óra. A reakció befejeződése után a reakciókeveréket vízhez vagy vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldathoz és vízzel nem elegyedő szerves oldószerhez adjuk. A termék, amit a szerves fázisból izolálunk, kívánt esetben átkristályositással vagy oszlopkromatográfiával tisztítható. Az (I) általános képletű új vegyületek gyógy szerészetileg elfogadható savaddiciós sóinak az előállítása ugyancsak a találmány tárgyát képezi. A sókat könnyen előállíthatjuk úgy, hogy a szabad bázist vizes oldatban vagy egy megfelelő szerves oldószerben megfelelő ásványi vagy szerves savval reagáltatjuk. A szilárd sót kicsapással vagy az oldószer lepárlásával állíthatjuk elő, kiváltképpen előnyös sók a hidrokloridok és maleátok. A találmány szerint előállított vegyületek mint fekélyek elleni szerek alkalmazhatósága in vitro kitűnik kutyák gyomor-nyálkahártyájából izolált H*/K’ ATP-áz gátlásából. Az enzimaktivitást kis módosításokkal Beil és munkatársai eljárása szerint mértük [Brit. J. Pharmacol., 82, 651-657 (1984)]. Az enzimet (1-2 mikrogram) 37 °C-on 45 percig előinkubáltuk egy olyan táptalajban, amely 2xl0‘3 M MgCl2-ot, 0,05 M trisz-Cl puffert (pH=7,5), adott esetben 0,01 M KCl-dal és savval aktivált kísérleti vegyületet tartalmazott 0,590 ml végső térfogatban. A reakciót 0,010 mmól ATP bevitelével kezdtük meg (a végső koncentráció 3xl0‘3 M). A reakciót 4,2% koncentráció eléréséig beadagolt triklór-ecetsavval leállítottuk. A felszabadult szervetlen foszfátot meghatároztuk (Fiske and Subarow Reducer-1 használva, például Sigma Chemical Co., P. 0. Box 14508, St. Louis, MO 63178, U.S.A.). Ebben a kísérletben a vegyüle'teket előnyösen először savval aktiváltuk úgy, hogy ezeket dimetil-szulfoxid és 0,02 n sósav 1:1 arányú keverékében 37 °C-on 30 percig inkubáltuk. Az alábbi táblázatban feltüntetjük néhány (I) általános képletű vegyületnek az enzimaktivitásét 50%-ban gátló mennyiségét (uM). 5 10 15 20 25 4
