200193. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új de-(acetil-glukozaminil)-di(dehidro)-dezoxi-teicoplanin-származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 200193 B mány szerinti eljárással előállítható vegyületek állati növekedést serkentő szerként is használhatók. Ilyen célra megfelelő táplálékba keverve orálisan adjuk be a találmány szerinti egy vagy több vegyiiletet. Az alkalmazott pontos koncentráció normál táplálékfelvétel mellett az állati növekedést serkentő hatás kifejtéséhez elegendő koncentráció. Előnyösen ilyen célra hatóanyagtartalmú premix (előkeverék) készítése, amely aztán pontos arányban keverhető az állati táplálékkal. Az állati premixek és a helyes keverékek az alábbi irodalmakban leírt módon készíthetők el: „Applied Animal Nutrition, W.H. Freedman and Co., S. Francisco, USA, 1969, vagy „Livestock Feeds and Feeding, O and B Bodes, Corvallis, Oregon, USA, 1977. Az alábbi példák a találmány szerinti eljárást szemléltetik anélkül, hogy igényünket ezekre a példákra korlátoznánk. 1. példa 42-a-D-mannozil-56-N-acil-ß-D-glukozaminil- 35,52-didehidro-34-dczoxi-teicoplanin ágiikon (I vegyület) sói a) 50 g (0,75 mól) kereskedelmi 85%-os káliumhidroxid 1 liter metanolban készült oldatát cseppenként, szobahőmérsékleten, keverés közben 23 g (12 mmól) teicoplanin (körülbelül 151% víztartalom) 2,5 liter, 3:2 térfogatarányú dimetil-formami±dimetilszulfoxid keverékben készült oldatához adjuk. A kapott szuszpenziót szobahőmérsékleten ke vetjük 24 óra hosszat (A reakcióedény szódazárral ellátott szeleppel van lezárva.) A reakcióelegyet 48 óra hosszat 10 *C hőmérsékleten tartjuk, majd 1 liter metanolt adunk hozzá és a kapott barna oldatot szobahőmérsékleten 2 óra hosszat keverjük. 1 Mter éter hozzáadására szilárd anyag válik ki, amelyet elkülönítünk és 1 liter metanolban szuszpendálunk. Az oldhatatlan anyagot elkülönítjük, 1 liter éterrel mossuk, majd vákuumban szobahőmérsékleten szárítjuk egy éjszakán át, vízmentes foszfor-pentoxid alatt szárítjuk: ily módon 21 g nyers cím szerinti terméket kapunk a megfelelő kálium só formájában. 7 g nyers kálium sót 400 ml, 1:2 térfogatarányú metil-cianid/víz elegyben oldjuk éfi a kapott zavaros oldatot pH= 2,8 értékre állítjuk jégecetes ecetsav hozzáadásával, majd 25 g szilanizált szilikagélt (Szilikagél 60, Merck Co.; 0,06-0,2 mm) és 500 ml butanolt adunk hozzá. Az oldószereket csökkentett nyomáson teljesen elpárologtatjuk, a maradékot 1,5 kg fenti szilikagéllel töltött (szilikagél 0,01 M vizes ammóniumdihidrogénfoezfátban) oszlopra töltjük. Az oszlopot lineáris grádienssel kifejlesztjük 10%-70% metil-cianiddal 0,5% vizes ecetsavban, 30 óra alatt 300 ml/óra sebességgel 25 ml-es frakciókat gyűjtünk, ezeket HPLC-vel vizsgáljuk. Ací szerinti komplex öt tiszta komponensét tartalmazó frakciókat egyesítjük, butanolt adunk hozzá, majd a keveréket addig koncentráljuk, amíg a metil-cianid és a víz teljesen eltávozik. Ezt követően 511 N sósavat adunk hozzá és az oldatot kis térfogatra koncentráljuk. Végül etilacetát hozzáadásával szilárd anyag csapódik ki, melyet szűréssel elkülönítünk, éterrel mosunk és szobahőmérsékleten egy éjszakán át szárítjuk vákuumban. Ily módon 5,04 g tiszta cím szerinti terméket kapunk 15 hidroklorid só formában. b) A belső só előállítása 1,7 g (1 mmól) fenti módon előállított hidrokloridot200ml, 1:1 térfogatarányú víz:metil-cianid elegyben oldunk, az oldat pH-ját pH= 6 értékre állítjuk, 0,1 N nátrium-hidroxid hozzáadásával 80 ml butanol hozzáadása után az elegyet körülbelül 40 ml végtérfogatra koncentráljuk. A kivált szilárd csapadékot szűréssel elkülönítjük, 50 ml vízzel és 1:2 térfogatarányú aceton:etil-éter eleggyel mossuk, majd 48 óra hosszat szárítjuk vákuumban, szobahőmérsékleten. íly módon 1,4 g cím szerinti vegyületet kapunk, belső so formájában. 2. példa 42-a-D-mannozil-35,52-didehidro-34-dezoxi-teicoplanin ágiikon (H vegyület) sói al L 17054 antibiotikumból 13 g (27 mmól) kereskedelmi 85%-os kálium-hidroxid200ml metanolban készült oldatát szobahőmérsékleten, keverés közben 1,1 g (0,7 mmól) L 17054 antibiotikum 300 ml, 3:2 térfogatarányú dimetil-formamiidimetil-szulfoxid elegyben készült oldatához adjuk. A keletkezett szuszpenziót szobahőmérsékleten 30 óra hosszat keverjük, majd 800 ml etil-étert adunk hozzá. A csapadékot elkülönítjük, éterrel mossuk, majd szobahőmérsékleten vákuumban szárítjuk egy éjszakán át. íly módon 13 g nyers, cím szerinti terméket kapunk kálium só formájában, ezt oszlopkromatográfíával tisztítjuk. Az oszlopot 750 g szilanizált szilikagéllel töltjük. A kromatografálási körülmények az előbbiekből az I. vegyülemél leírtakkal azonosak, de az eluciót 5%-35% acetonitriles vízzel képezett lineáris grádienssel végezzük 24 óra alatt, 250 ml/óra sebességgel A tiszta cím szerinti vegyületet tartalmazó frakciókat összegyűjtjük, egyesítjük és az előző példában leírt módon dolgozzuk fel. Az acetonitril és a víz eltávolítása után 1 ml 1N sósavat adunk a kapott butanolos oldathoz, amelyet aztán körülbelül 40 ml végtérfogatra koncentrálunk. Éter hozzáadására csapadék képződik, amelyet szűréssel elkülönítünk, éterrel mossuk és egy éjszakán át 35 *C-on szárítjuk, vákuumban. íly módon 0,6 g cím szerinti vegyületet kapunk, hidroklorid só formájában, b) I Yegyületbffl i) 5 g (3 mmól), az 1. példa szerint előállított I vegyületet 60 ml 90%-os vizes trifluor-ecetsavban (IFA) készült oldatát 10 percig keverjük 5 ‘C-on és 90 percig szobahőmérsékleten. Ezután 240 ml etilétert adunk hozzá és a keletkezett csapadékot elkülönítjük, majd 200 ml metanolban újra feloldjuk. Az oldhatatlan anyagot szűréssel eltávolítjuk, a szűrletet csökkentett nyomáson kis térfogatra koncentráljuk. Éter hozzáadására szilárd anyag válik Id, amelyet elkülönítünk, éterrel mosunk és vákuumban, 35 *C- on egy éjszakán át szárítunk. íly módon 3,96 g tiszta cím szerinti vegyületet, trifluor-acetátot kapunk. ii) 6 g (3 mmól) nyers I vegyület kálium só 100 ml 90%-os vizes trifluor-ecetsavban készült oldatát 15 percig keverjük 0 *C-on és 2 óra hosszat szobahőmérsékleten. Az oldószereket szobahőmérsékleten, csökkentett nyomáson teljesen eltávolítjuk. Az olajos maradékot 150 ml, 1:1 térfogatarányú víz:metil-cianid elegyben feloldjuk és a kapott oldatot 300 ml vízzel hígítjuk és kromatografáló oszlopra öntjük, amely 16 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
