199876. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-metil-4,5-dihidro-orotil-hisztidil-prolin-amid és ezt tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 199876 B 2 3. példa (1) 900 mg 3-benzoil-l-metil-L-4,5-dihidroorotsavat, 449 mg N-hidroxi-szukcinimidet és 782 mg diciklohexil-karbodiimidet 13 ml dimetil-formamidban oldunk, és az oldatot 0 °C hőmérsékleten 40 percen keresztül, majd szobahőmérsékleten 80 percen keresztül keverjük. A reakciókeveréket —5 °C hőmérsékletre hűljük, I, 4 g L-hisztidil-L-prolinamid-dihidrobromidot és 0,94 ml trietil-amint adunk hozzá. A reakciókeveréket 0 °C hőmérsékleten 3 órán keresztül, 10 °C hőmérsékleten egy napon át keverjük. A nem oldódó anyagot kiszűrjük, és a szűrletből bepárlással eltávolítjuk az oldószert. A bepárlási maradékot 50 ml 1%-os sósavban oldjuk és kloroformmal mossuk. A vizes fázis kémhatását nátrium-hidrogén-karbonáttal pH = 8 értékre állítjuk be., és egy napon keresztül hagyjuk állni hűtőszekrényben. A csapadékot szűréssel összegyűjtjük, vízzel mossuk, 50 °C hőmérsékleten szárítjuk, így 1,05 g (3-benzoil-l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidil-L-prolinamidot kapunk. Op.: 228 - 230 °C (bomlik). í,il23p= +27,2°(c= 0,5; dimetil-formamid). IR ^loroformmax (cm4): 3400, 3200, 1738, 1680,1620. 'H-NMR (DMSO-d6, ü): 1,6-2,2 (m, 4H), 2,6-3,8 (m, 6H), 3,00 (s, 3H), 4,0-4,8 (m, 2H), 4,9-5,1 (m, 1H), 6,9-7,1 (m, 2H), 7,3-7,8 (m, 6H), 8,1 (széles, 1H), 8,65 (széles, d, 1H). (2) 510 mg (3-benzoil-l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidil-L-prolinamidot oldunk 3 ml metanolban, és 136 mg 15% ammóniát tartalmazó metanolt adunk hozzá. A reakciókeveréket 30 percen keresztül keverjük szobahőmérsékleten, majd desztillálóval eltávolítjuk a metanolt. 5 ml vizet adunk a bepárlási maradékhoz, és az oldhatatlan anyagot kiszűrjük. A vizes fázist etil-acetáttal mossuk és 1 ml térfogatra töményítjük. Miután egy napon keresztül hagytuk hűlőszekrényben állni, a kristályos csapadékot szűréssel összegyűjtjük, vízzel mossuk és 25 °C hőmérsékleten szárítjuk egy napon keresztül. 400 mg (1- -metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidil-L-prolinamid-víz(7/2)-et kapunk. A termék fizikai-kémiai adatai megegyeznek a 2. példa (3) termékének adataival. 4, példa (1) 6,37 g l-metil-L-4,5-dihidroorotsavat és II, 3 g 95%-os pentaklór-fenolt 80 ml dimetilformamidban oldunk - 5 — 0 °C hőmérsékleten 8,3 diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá, és a reakciókeveréket ugyanezen a hőmérsékleten keverjük egy órán keresztül. 21,8 g benzil-hisztidinál-ditozilátot |Bull. Chem. Soc. Jap., 31, 784 (1958)] és 75 mg trietil-amint adunk hozzá -5 és 0 °C közötti hőmérsékleten. A reakciókeveréket 5 °C hőmérsékleten 2 órán keresztül, szobahőmérsékleten egy napon át keverjük. A nem oldódó anyagot kiszűrjük, és a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A bepárlási maradékot 80 ml vízben oldjuk, az oldatot 80 ml éterrel mossuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A bepárlási maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografálva szárítjuk (eluens: kloroform-metanol, 4:1) és metanolból átkristályosítjuk. 6,0 g benzil-(l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidinátot kapunk. Op.: 194-195 °C. [a]21o= +2l,8°(c= 0,5; dimetil-formamid). IR ‘'nuiolmax (cm'1): 3300, 3200, 1735, 1710, 1660. (2) 2,7 g benzil-(l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidinátot 50 ml vízben oldunk és 50 mg palládiumkormot adunk hozzá. A hidrogénezést a 2. példa (2) pontjában leírtak szerint végezzük. 1,8 g (l-melil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidin-víz(l/4)-et kapunk por formájában. [a)21D= +68,8° jc= 0,5; H2ü). IR r'nuj°1max (cm4): 1720,1660. (3) 1,23 g diciklohexil-karbodiimidet adunk 1,56 g (l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidinből, 565 mg N-hidroxi-szukcinimidből és 15 ml dimetil-formamidból álló keverékhez —10 és — 5 °C közötti hőmérsékleten, és ezen a hőmérsékleten keverjük a reakciókeveréket 30 percen keresztül. 570 mg L-prolinamidot adunk hozzá, és a reakciókeveréket — 5 és 0 °C közötti hőmérsékleten 2 órán keresztül, szobahőmérsékleten egy napon át keverjük. A reakció után a nem oldódó anyagot kiszűrjük és 50 ml vízzel mossuk. A szűrletet és a mosófolyadékot egyesítjük és kloroformmal mossuk. Az oldat kémhatását nátrium-hidrogén-karbonáttal pH = 8 értékre állítjuk be, és CHP-20P gyantával töltött oszlopon engedjük át. Az oszlopot 200 ml vízzel mossuk, majd a kívánt terméket 20%-os metanollal eluáljuk. A Pauly-reakciót pozitiven adó frakciókat egyesítjük és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot lehűtjük, és a kivált kristályos anyagot szűréssel összegyűjtve, 1,17 g (1-metil-L-4,5-dihidroorotil)-L-hisztidil-L-prolinamid-víz(7/2)-et nyerünk. A termék fizikai-kémiai adataii megegyeznek a 2. példa (3) termékének adataival. 5. példa (1) 516 mg l-metil-L-4,5-dihidroorotsavat és 345 mg N-hidroxi-szukcinimidet 9 ml dimetil-formamidban oldunk, és 0-5 °C hőmérsékleten 680 mg diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá. A reakciókeveréket ezen a hőmérsékleten 40 percig, majd szobahőmérsékleten 80 percig keverjük. 1,6 mg Nim-tozil-L-hisztidil-L-prolinamid-trifluor-acetátot [Bull. Chem. Soc. Jap., 49, 1595 (1976)] és 0,5 ml trietil-amint adunk a keverékhez és 10 °C hőmérsékleten kevertetjük 1 napon keresztül. A reakciót követően a keveréket csökkentett nyomáson bepároljuk, és a maradékot 30 ml kloroformban oldjuk. Az oldhatatlan anyagot szűréssel eltávolítjuk, a szűrletet vízzel mossuk és szárítjuk. A csökkentett nyomáson történő bepárlás maradékát szilikagél oszlopon kromatografálva (eluens: kloroform/etil-acetát/ /metanol, 5:4:2) tisztítjuk, 1,2 g (l-metil-L-4,5- -dihidroorolil)-Nim-tozil-L-hisztidil-L-prolinamidot nyerve por alakjában. [opp“ +8,3°(c~ 1; dimetil-formamid). IR v““iolmiU( (cm'1): 1720,1680,1670,1640. (2) 1,2 g (l-metil-L-4,5-dihidroorotil)-N,m-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
