199860. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gangliozid-származékok és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 199860 B 2 A termék infravörös spektroszkópiája nem mutatja a jellemző észtersávot 1750 cnv'-nél. A kromatografálást szilikagél lemezeken végezve, oldószerként pedig kloroform, metanol és 4 N ammóniumhidroxid 55:45:10 arányú elegyét illetve kloroform, metanol és 0,3 %-os kalciumklorid 60:35:8 arányú elegyét alkalmazva, a termék egységes Gmi gangliozidtól mentes, Rf-értéke 0,32 illetve 0,69, míg a Gmi gangliozid Rf-értéke 0,35 illetve 0,40. 22. példa Gangliozidkeverék benzilamidjainak keveréke Ezt a keveréket 5 g, a 2. példa szerint alkalmazott gangliozidkeverékből és 792 mg (7,4 mM) benzilamidból állítjuk elő a 21. példában a Gmi gangliozid benzilamidjának előállításánál ismertetett módon. A nyers terméket szintén a 21. példában megadott módon tisztíthatjuk. 4,8 g cím szerinti terméket kapunk. A kromatografálást szilikagél lemezeken a 21. példában megadott módon végezzük. A termék Rfértéke 0,10-0,42 illetve 0,55-0,71 (a kiindulási gangliozidkeverék Rf-értéke 0,01-0,15 illetve 0,05-0,40). Az infravörös spektroszkópia nem mutatja a jellemző észtersávot 1750 cm'1 értéknél. 23. példa A Gmi gangliozid izopropilamidja 5 g (3,27 mM) Gmi gangliozid belső észtert 25 ml vízmentes izopropilaminban oldunk, és az egyetlen 24 órán át keverjük a nevesség kizárásával. A reagáltatás befejezése után az oldószert lepároljuk, a maradékot kloroform és metanol 1:1 arányú elegyének 50 ml mennyiségében felvesszük, és a terméket 250 ml aceton hozzáadásával kicsapjuk. A kapott 4,8 g nyers terméket 100 ml 1 %-os nátriumkarbonát- oldattal kezeljük 30 percig 25 °C-on a még meglévő észterkötések hidrolízise érdekében, majd vízben dializáljuk. A dializált oldatot szárazra pároljuk, a maradékot pedig preparatív kromatográfiával tisztítjuk szilikagélen, oldószerként kloroform, metanol és 2,5 N ammóniumhidroxid 60:40:9 arányú elegyét használva. A tiszta terméket tartalmazó frakciókat elegyítjük, bepároljuk, a maradékot kloroform és metanol 1:1 arányú elegyének 15 ml mennyiségében oldjuk, és a terméket 75 ml aceton hozzáadásával kicsapjuk. A kromatografálást szilikagél lemezeken végezve, oldószerként kloroform, metanol és 2,5 N ammóniumhidroxid 60:40:9 arányú elegyét illetve kloroform, metanol és 0,3 %-os kalciumklorid 60:35:8 arányú elegyét használva, s a kimutatáshoz rezorcin reagenst alkalmazva, a kapott 4,2 g izopropilamid egységesnek és a Gmi gangliozidtól mentes bizonyul. A termék Rf- értéke 0,25 illetve 0,66, míg a Gmi gangliozid Rf- értéke 0,42 illetve 0,40. Az infravörös spektroszkópia nem mutatja a jellemező észtersávot 1750 cm'1 értéknél. 24. példa A Gmi gangliozid dimetilamidja 5 g (3,27 mM) Gmi gangliozid belső észtert 25 ml dimetilaminban oldunk. Az elegyet 24 órán át keverjük alacsony hőmérsékleten (-5 °C-on), vízmentes körülmények között. A reakció lejátszódása után az elegyet nátriumkarbonáttal kezeljük majd tisztítjuk a 23. példában leírt módon, azonban a kromatografálásnál első oldószerként kloroform, metanol és 2,5 N ammóniumhidroxid 60:40:9 arányú elegyét, második oldószerként pedig kloroform, metanol és víz 60:40:9 arányú elegyét használjuk. 4,6 g dimetilamidot kapunk. A spektroszkópiás és kromatográfiás vizsgálatokat a 23. példában leírtak szerint végezzük. A termék egységesnek bizonyul, Rf-értéke 0,20 illetve 0,46, s mentes a Gmi gangliozidtól, amelynek Rf-értéke 0,42 illetve 0,40. Az infravörös spektroszkópia nem mutat észtersávot 1750 cm-1 értéknél. 25. példa Gangliozidkeverék dimetilamidjainak keveréke Ezt a keveréket 5 g gangliozid belső észterből, amelyet mint keveréket a 2. példában írtunk le, 20 ml vízmentes dimetilamin felhasználásával állítjuk elő a 24. példában ismertetett módszerrel. A reagáltatás utáni kezelést is a 24. példa szerint végezzük, kivéve a preparatív kromatográfiát, amelyet acetát alakban lévő Sephadex A-25 gyantán vitelezünk ki, oldószerként kloroform, metanol és víz 30:60:8 arányú elegyét használva. 4,9 g tiszta cím szerinti vegyületet kapunk. Az infravörös spektroszkópiát és a kromatografálást a 24. példában ismertetett módszerrel végezzük. A termék Rf-értéke 0,15-0,50 illetve 0,40-0,56, míg az eredeti gangliozidkeverék Rf-értéke 0,15-0,60 illetve 0,05-0,40. 26. példa A Gmi gangliozid dietilamidja Ezt a vegyületet hasonló módon állítjuk elő, mint a 24. példában a dimetilamidot, 5 g Gmi gangliozid belső észterből és 25 ml vízmentes dietilaminból kiindulva. A tisztítást úgy végezzük, mint a 23. példában. Ilyen módon 4,7 g cím szerinti vegyületet kapunk. A 23. példa szerint kivitelezett kromatográfiás vizsgálat azt mutatja, hogy a termék egységes, Rfértéke 0,29 illetve 0,50, és mentes a Gmi gangliozidtól. Az infravörös spektorszkópia nem mutat észtersávot 1750 cm'1 értéknél. 27. példa Gangliozidkeverék dietilamidjainak keveréke A 2. példában felhasznált gangliozid belső észterkeverék 5 g mennyiségéből indulunk ki, amelyet 20 ml vízmentes dietilaminnal reagáltatunk a 26. példában megadott módon. A tisztítást úgy végezzük, mint a 25. példában a dimetilamid keveréknél. 5,0 g cím szerinti terméket kapunk. A 26. példa szerint meghatározott Rf-értékek a következők: 0,18-0,55 illetve 0,43-0,60. Az infravörös spektroszkópia nem jelez észtersávot 1750 cm'1 értéknél. 28. példa A Gmi gangliozid etil-metil-amidja Hasonló módon járunk el, mint a 24. példában, 5 g Gmi gangliozid belső észteréből és 25 ml etil-metil-aminból indulunk ki. A tisztítást is a 24. példában megadott módon végezzük. 4,7 g cím szerinti vegyületet kapunk. A kromatográfiás vizsgálatot szilikgél lemezeken végezzük a 24. példa szerint. A termék egységes és 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 13
