199856. lajstromszámú szabadalom • Eljárás difoszfonsav-származékok és az ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 199856 B 2 Termelés Olvadáspont Végtermék 3-(N-butil-N-metil-amino)-propán-1 -hidroxi-1,1- -difoszfonsav Mrei: 0,39 65% 116-121*C C. Közbenső termékek 4-(N-metil-N-nonil-amino)-vajsav 47% olaj Végtermék 1 -hidroxi-4-(N-metil-N-nonil-amino)-bután-1,1 -difoszfonsav-dinátriumsó-dihidrát Mrei: 0,25 11 % >300 ’C D. Közbenső termékek 3-N-undecil-amino-propionsav 3-N-metil-N-undecil-amino-62% 76-80 °C -propionsav 59% viasz Végtermék l-hidroxi-3-N-metil-N--undecil-amino)-propán-1,1 -difoszfonsav-dikáliumsó-dihidrát 23 % 238 -C (felhabzás közben) Az olajos közbenső termékeket desztilláció nélkül közvetlenül tovább reagáltatjuk. A szerkezetet spektroszkópikusan igazoltuk. A végtermékeket ioncserélő-kromatográfiával tisztítjuk. 35 16. példa 3- (N\N-diizopropil- amino)-propán- 1,1- -difoszfonsav-tetra-izopropil-észter 20 g (0,1 mól) 2-diizopropil-amino-etil-klorid-hid- 40 roklorid és 34,4 g (0,1 mól) metánfoszfonsav-tetraizopropil-észter 120 ml abszolút tetrahidrofuránnal készített szuszpenziójába 485 g (0,2 mól) nátriumhidridet adagolunk kisebb részletekben. A hozzáadás befejezése után a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 45 1 órán át keverjük és 48 órán át visszafolyató hűtő alkalmazásával forraljuk. Lehűlés után 300 ml éterrel meghigítjuk, 100 ml vízzel többször kirázzuk és a szerves fázist nátrium-szulfáton végzett szárítás után bepároljuk. Az olajos maradékot kovasavgélen ősz- 50 lopkromatográfiásan tisztítjuk diklór-metán/metil-alkohol 19 : 1 arányú elegyével. Kitermelés 18,4 g (az elméleti 39 %-a). 3-(N Jl-diizopropil-amino)-propán-l ,1 - 55-difoszfonsav A megfelelő tetraizopropil-észter 10 g-ját 100 ml 6n hidrogén-klorid-oldattal elegyítjük és 12 órán át 100 "C-on keverjük. Ezután forgó elpárologtatóban bepároljuk, a visszamaradó barna olajat 200 ml izo- 60 propanollal elegyítjük és az üveg falának erőteljes dörzsölésével megindítjuk a kristályosodást. Kevés etanolt tartalmazó vízből végzett átkristályosítással 3,1 g (az elméleti 48 %-a) terméket kapunk. Op.: 300 ‘C felett (bomlik). 65 Farmakológiai vizsgálati eredmények Mintegy 160 g súlyú Whistar-hímpatkányokból az 1. nap kimetszettük a mellékpajzsmirigyet. Az 5. napon azzal ellenőriztük a műtét eredményességét, hogy 1 napi koplalást követően meghatároztuk a kalcémiát. Ettől a naptól kezdődően valamennyi állat ugyanolyan mennyiségű táplálékot kapott Ezenkívül 3 nap egymást követően szubkután injekciókat adtunk be az állatoknak, amelyek közül az egyik 25 mikrogram szintetikus retinoid volt (hipeikalcémia redukálása céljából), a másik pedig a vizsgálandó difoszfonátot tartalmazta. Ezen túlmenően valamennyi állat a kezelés első és utolsó napján, 2 mikrogram tiroxint kap. Az utolsó retinoid- és difoszfonát-injekció után 24 órával és egynapi koplalást követően retroorbitálisan vért veszünk éteres altatás közben. A plazma-kalcium koncentrációját atomabszorpcióval határozzuk meg. A difoszfonátszármazékokat először 0,1 mg P/kg dózisban és 2 ml/kg térfogatban adjuk be, kevésbé aktív vegyületeknél járulékosan 1 és 10 mg P/kg dózisban is. TÁBLÁZAT A hiperkalcémia csökkenése (mg %-ban), különböző dózisoknál Az alábbi példa Dózis [mg P/kg] szerinti vegyület 0,01 0,1 1 2. 1,75 5,74 6. 2,26 5,90 8. 0,49 1,74 7
