199837. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-(biciklusos heterociklusos-alkil)-N-benzimidazolil-, vagy-N-imidazopiridinil-4-piperidinamidok és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 199837 B 2 nista hatását a következő vizsgálati eredményed demonstrálják. Patkányok megvédése a 48/80. sz. vegyidet által kiváltott lethális hatástól Az Int. Arch. Allergy, 13. 336 (1958) szakirodalmi helyen a 48/80 sz. vegyületet (mely 4-metoxi-N-metil-fenil-etil-amin és formaldehid kondenzálásakor kapott oligomerek elegye) igen hatásos hisztamin-kiváltó ágensként írják le. A hatására kiváltott lethális keringési kollapszustól való megvédés egy kísérleti vegyület hisztamin-antagonista hatásának kvantitatív kiértékelésére igen előnyös módszernek látszik. Kísérleti állatként Wistar-törzsbeli, 240-260 g súlyú hím patkányokat használunk. Egy éjszakán át tartó éheztetést követően a patkányokat légkondicionált laboratóriumokban (hőmérséklet=211 °C, relatív páratartalom=655 %) helyezzük el. A patkányokat szubkután vagy orálisan kezeljük a kísérleti vegyülettel vagy az oldószerrel (0,9 %-os nátrium-klorid oldat). A kezelés után 1 órával intravénásán injektáljuk 0,5 mg/kg (0,2 ml/100 testsúlykg) dózisban a vízzel frissen oldott 48/80 sz. vegyületet Az állatoknak mindössze 2,8 %-a élt túl 4 órát olyan kontrolikísérletekben, amelyeknél 250, oldószerrel kezelt állatnak a 48/80 sz. vegyületből az említett standard dózist injektáltuk. így a több mint 4 órás túlélést tekintjük egy kísérleti vegyület beadásakor jelentkező védő hatás biztos kritériumának. Az (I) általános képletű vegyületek EDso-értékeit az 1. táblázat első oszlopában soroljuk fel. Ezek az EDso-értékek olyan, mg/testsúlykg egységekben kifejezett értékek, amelyeknél a kísérleti vegyületek a kísérleti állatok 50 %-át megóvják a 48/80 sz. vegyület által kiváltott lethális hatástól. Az (I) általános képletű vegyületek és gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóik ugyanakkor hatásos szerotonin-antagonisták. E vegyületek szerotonin-antagonistakénti hatását a következkő vizsgálati eredményekkel kívánjuk bemutatni. Gyomorsériiléses tesztben a szerotonin hatásával szemben kifejtett antagonista aktivitás A. A 48180 sz. vegyület által indukált sérülések ( léziók) A 48/80 sz. vegyület az endogén tárolóhelyekből felszabadítható vazoaktív aminok, például a hisztamin és a szerotonin vonatkozásában hatásos leadás elősegítő anyag. A 48/80 sz. vegyülettel injektált patkányok esetében a véráram egyenletes változása jelentkezik különböző vérárampályákon, így a fülek és a végtafok cianózisa a vegyület injektálását követő 5 percen belül nyilvánvalóvá válik és a patkányok sokktól elpusztulnak 30 percen belül. A halál által követett sokk elkerülhető, ha a patkányokat előzetesen egy klasszikus H 1 antagonistával kezeljük. A gyomorsavkiválasztásra kifejtett serkentő hatás azonban nem nyomódik el, így a 48/80 sz. vegyülettel kezelt és a sokktól egy H 1 antagonistával megvédett patkányok esetében a gyomormirigyek intenzív működésének minden jele megfigyelhető: teljes boncolásnál olyan felpuffadt gyomor található, amely abnormális tartalmú és durva élénkvörös csíkok találhatók mindenütt a hámszöveten, az elpusztult mirigyek területének megfelelően. Számos ismert szerotonin-antagonista, például a Methysergide, Cyproheptadine, Cinanserin, Mianserin, Pipamperone, Spiperone, Pizotifen vagy a Metergoline tökéletesen meggátolja a fülek és a végtagok cianózisát, továbbá a gyomor glanduláris (mirigyes) részein a sérülések kialakulását és az abnormális gyomorfelfúvódást. B. Kísérleti módszer Wistar-törzsbe tartozó, 220-250 g súlyú hím patkányokat egy éjszakán át éheztetünk. Víz tetszés szerinti mennyiségben áll rendelkezésükre. A kísérleti vegyületeketz orálisan, vizes közeggel képzett oldat vagy szuszpenzió formájában adjuk be. Egy kontrollpatkánynak és egy „vakminta” patkánynak adjuk be a kísérleti vegyületet. Egy órával később szubkután mindegyik patkánynak 2,5 mg/kg dózisban 5-[4-(difenil-metil)-1 -piperazinil- metil]-1 -metil-2-(hidroximetil)-lH-benzimidazolt adunk be. Két órával a kísérleti vegyület orális vagy szubkután beadását követően intravénásán mindegyik patkánynak 1 mg/kg dózisban beinjektáljuk a vízben frissen 0,25 mg/ml koncentrációban oldott 48/80 sz. vegyületet, kivéve a „vakminta” patkányokat. A 48/80 sz. vegyület intravénás injektálását követő 4 óra elteltével a patkányokat dekapituláljuk és a gyomrukat eltávolítjuk. Ezt követően a gyomrokat megvizsgáljuk a felfűvódottság és a gyomortartalom (vér, folyadék, táplálék) tanulmányozása céljából, majd alaposan átmossuk. Ezután a makroszkopikus sérüléseket 0 és +++ közötti értékek alapján kiértékeljük, ahol 0 a látható sérülések teljes hiányának és a +++ érték a glanduláris terület több mint felét borító, durva vöröses csíkoknak felel meg. Az 1. táblázat 2. oszlopában nagyszámú (I) általános képletű vegyületre adjuk meg mg/testsúlykg egységekben kifejezve azokat a dózisokat, amelyeknél a kísérleti patkányok 50 %-ának esetében a gyomor felfúvódása, illetve a gyomor glanduláris területén a sérülések egyáltalán nem észlelhetők. Ez a dózis tehát az EDso-érték. 1. táblázat A vegyület 1, oszlop 2. oszlop sorszáma 48/80 sz. vegyügyomorsériiléses lettel végzett teszt ED50 lethalitási teszt (mg/testsúlykg) ED50 (mg/testsúlykg) 142. 0,16 0,63 4. 0,16 0,31 109. 0,04 0,04 147. 0,31 0,63 110. 0,16 0,31 m. 0,02 0,08 112. 0,02 0,16 113. 0,04-114. 0,02 0,63 24. 0,08 0,63 25. 0,16-5. 0,16 0,04 22. 0,16-26. 0,08-6. 0,08 0,63 7. 0,04 0,31 1. 0,31 0,63 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 22
