199786. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a magas vérnyomás kezelésére használható peptid-származékok előállítására
1 HU 199786 B 2 karbonát adagolásával pH = 9 -re állítjuk. Ezután etil-acetáttal kirázzuk, majd a vizes részt jeges fürdőben hűtve etil-acetát jelenlétében 1 n sósavval pH = 2-re savanyítjuk. Ez utóbbi etil-acetátos részt hideg vízzel, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert forgó rendszerű desztilláló készüléken ledesztilláljuk. A maradékot dietil-éter és hexán elegyéből kristályosítva, a cím szerinti vegyülethez jutunk. 2) 2,5 mmól L-prolin és nátrium-hidrogén-karbonát vizes oldatához jeges fürdőben, erélyes keverés közben hozzáadunk 2,5 mmól metakrilsav-kloridot. A beadagolás után az elegyet 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd dietil-éterrel kirázzuk. Ezután a vizes részt 1,0 n sósavval megsavanyítjuk, és etil-acetáttal kirázzuk. Az etil-acetátos oldatról az oldószert csökkentett nyomáson ledesztillálva, a cím szerinti vegyülethez jutunk. 3) 2,5 mmól metakrilsav kétszer desztillált etilacetáttal készült oldatához jég-szárazjég-metanol hűtőfürdőben, -20 °C hőmérsékleten hozzáadunk 2,5 mmól N-etil-morfolint, majd 2,5 mmól klórhangyasav-izobutil-észtert. Az elegyet néhány percig -15 °C hőmérsékleten keverjük, majd hozzáadunk 2,5 mmól L-prolin- tercier-butil-észtert, és a reakcióelegyet másfél órán át -15 °C hőmérsékleten keverjük. Utána hagyjuk lassan szobahőmérsékletre melegedni, és ezen a hőmérsékleten további 2 órán át keverjük. Az elegyhez etil-acetátot adunk, majd jeges fürdőben hűtjük, és az etil-acetátos részt először többször hideg vízzel, majd hideg 1 n citromsav-oldattal, ezután hideg, telített nátrium-klorid- oldattal, majd hideg 1 n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, és végül hideg, telített nátrium-klorid-oldattal mossuk. Utána vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert forgó rendszerű desztilláló készüléken ledesztilláljuk. A maradékot benzol és petroléter elegyéből kristályosítjuk, majd a tercierbutil-észter-csoportot lényegében az 1. példa 6. lépésének a) pontjában leírt módon távolítjuk el. 2. lépés Na-[3-(Na-Benzoil-L-fenil-alanil-merkapto)-2- -D-metil- propanoil]-L-prolin Az 1. példa 4. lépésében leírt módon eljárva, és kiindulási anyagként metakrilsav helyett a jelen eljárásváltozat 1. lépésének termékét használva állítjuk elő a 2-DL-metil-propanoil- származékot. Ezt a terméket ismételt, metanol, benzol és dietil- éter elegyéből történő átkristályosítással, vagy folyadék- kromatográfiával rezolválva, a cím szerinti vegyülethez jutunk. Egy másik módszer szerint kiindulási anyagként az 1. lépés terméke helyett használhatunk Na- 2-metil-propanoil-L- prolin-tercier-butil-észtert. A rezolválás után a rezolvált termékről a védőcsoportot az 1. lépésben leírt módon eltávolítva, a cím szerinti vegyülethez jutunk. 6 6. példa f) módszer 1. lépés Na-Benzoil-L-fenil-alanin A cím szerinti vegyületet úgy állítjuk elő, hogy egyenértéknyi mennyiségű benzoil-kloridot és L-fenil-alanint nátrium-hidroxid- oldatban, ismert módon reagáltatunk [J. Biol. Chem. 138, 627 (1941)]. 2. lépés 3-Merkapto-2-metil-propionsav 50 g tioecetsav és 40,7 g metakrilsav elegyét 1 órán át vízfürdőn melegítünk, majd az elegyet 18 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Miután NMR-spektroszkópiai úton meggyőződünk arról, hogy a reakció lejátszódott, az elegyet csökkentett nyomáson közvetlenül desztilláljuk, a kívánt 3-acetil-merkapto-2-metil- propionsavat 128,5-131 °C között szedjük. E termék 3,4 g súlyú részletét feloldjuk 10,5 ml víz és 6,4 ml tömény ammónium- hidroxid-oldat elegyében, az elegyet 1 órán át állni hagyjuk, majd vízzel hígítjuk, és az oldatlan részeket kiszűrjük. A szűrletet etil-acetáttal kirázzuk, majd a vizes részt tömény sósavval megsavanyítjuk, nátrium-kloriddal telítjük, és végül etil-acetáttal kétszer kirázzuk. Ez utóbbi etil-acetátos részeket telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd az oldószert ledesztilláljuk, ily módon a cím szerinti vegyülethez jutunk. 3. lépés 3-(Na-Benzoil-L-fenil-alanil-merkapto)-2-metil-propinsav 25 mmól Na-benzoil-L-Phe kétszer desztillált etilacetáttal készült oldatához jég-szárazjég-metanol hűtőfürdőben, -20 °C hőmérsékleten hozzáadunk 25 mmól N-etil-morfolint, majd 25 mmól klórhangyasav-izobutil-észtert. A reakcióelegyet néhány percig - 15 ”C hőmérsékleten keveijük, majd hozzáadunk 50 mmól N-hidroxi- szukcinimidet, és a reakcióelegyet másfél órán át -15 °C hőmérsékleten keverjük. Ezután hagyjuk az elegyet lassan szobahőmérsékletre melegedni, és ezután hozzáadunk 25 mmól 3- merkapto-2-metil-propionsav N-etil-morfolinnal semlegesített oldatát, és a reakcióelegyet addig keverjük, míg a vékonyréteg- kromatográfiás vizsgálat szerint a reakció teljesen le nem játszódik. Utána az elegyhez etil-acetátot adunk, majd jeges fürdőben hűtve, 1 n sósavval, pH = 3-ra savanyítjuk. Az etil- acetátos részt többször hideg vízzel, majd telített nátriumklorid-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert forgó rendszerű desztilláló készüléken ledesztilláljuk. A maradékot benzol és petroléter elegyéből kristályosítva a cím szerinti vegyülethez jutunk. 4. lépés Na-[3-(Na-Benzoil-L-fenil-alanil-merkapto)-2 - -D-metil- propanoil]-L-prolin (rezolválás) A cím szerinti vegyületet az 1. példa 5. lépésében leírt módon állítjuk elő. 5. lépés Na-[3-(Na-Benzoil-L-fenil-alanil-merkapto)-2- -D-metil- propanoil]-L-prolin 10 mmól, a 4. lépésben leírt módon kapott termék kétszer desztillált etil-acetáttal készült oldatához jégszárazjég- metanol hűtőfürdőben, -20 °C hőmérsékleten hozzáadunk 10 mmól N- etil-morfolint, majd 10 mmól klórhangyasav-izobutil-észtert, majd néhány perces, -15 ‘C hőmérsékleten végzett keverés után hozzáadunk 10 mmól N-hidroxi-szukcinimidet, és a 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 18
