199784. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-acil-pirrolidin-származékok és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 199784 B 2 keresztül vízfürdőben rázva 37°C hőmérsékleten inkubáljuk, végül a reakciót 2 ml 1 mól/1 nátrium-acetát pufferrel (pH=4,0) leállítjuk. Azonos körülmények között hatóanyag nélküli, de egyéb szempontból azonos összetételű kontrol mintát készítünk. Az inkubációs elegy háttér fluoresszenciájának meghatározásához az elegyhez acetát puffert adunk a szubsztrátum előtt. Az oldatok fluoresszenciáját Perkin Elmer LS-3 fluoresszensz spektrométeren 370 nm gerjesztő hullámhosszal 435 nm-nél mérjük. A vizsgált hatóanyagok gátló hatását IC50 értékben fejezzük ki, amely a prolil-endopeptidáz aktivitás 50%-os csökkentéséhez szükséges moláris koncentrációnak felel meg. Az IC50 értékeket grafikusan határoztuk meg a 4-5 különböző koncentrációnál három práhuzamos alapján felvett logaritmikus koncentráció/hatás görbéről. Hatóanyag példaszáma IC50 (M) 1. 1,8 x KL8 2. 2,3 x KL6 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás (I) általános képletű 2-acil-pirrolidin-származékok előállítására, a képletben R1 jelentése adott esetben 1-4 szénatomos alkoxicsoporttal szubsztituált fenilcsoport, R2 és R5 jelentése hidrogénatom, R3 és R4 együtt egy trimetiléncsoportot képeznek, R6 jelentése fluoratom, n értéke 0 vagy 1, s értéke 0 vagy 1, X jelentése oxigénatom, m értéke 0, 1, 2, 3 vagy 4, azzal jellemezve, hogy (IV) általános képletű vegyületet, a képletben R1, R2, R3, R4, R5, R6, X, m, n és s jelentése a tárgyi körben megadott, előnyösen dimetil- szulfoxiddal oxidálunk. 2. Eljárás gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely 1. igénypont szerint előállított (I) általános képletű 2-acil-pirrolidinszármazékot a képletben R1, R2, R3, R4, R5, R6, X, m, n és s jelentése az 1. igénypontban megadott, gyógyszerészeti hordozóanyaggal és gyógyszerészeiben alkalmazható segédanyaggal keverjük össze és a keveréket adagolásra alkalmas készítménnyé alakítjuk. 5 10 15 20 25 4
