199783. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vinblasztin-antitest konjugátumok és ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 199783 B 2 107 tumorsejtet ültetünk be. A beültetés utáni 7., 10., 14., és 17. napokon egyes egerekbe olyan adag konjugátumot injektálunk, hogy a vinka gyógyszerből 3 mg/kg-ot szolgáltassunk. A beültetéssel indukált tumorok méretét különböző időpontokban mérjük, egészen a beültetés utáni 42. napig. Az egyes kezelt csoportok 5 egérből állnak, kivéve a kezeletlen kontroll csoportot, amely 10 egérből áll. Egy olyan csoport is szerepel a vizsgálatban, amely nem konjugált 4-dezacetil-VLB-3-karboxi- hidrazidot kap. 42 nap után a kontroll egereknek nagyon nagy tumorja van, átlagosan 23,5 g tömegű. Az összes egér, amely a 6. példa konjugátumát kapja, elpusztul. Egy állat pusztul el azok közül, amelyek a 7. példa konjugátumát kapták, a többi négy átlagos tumormérete 4,5 g. A nem konjugált gyógyszert kapott egerekből három pusztul el, a további kettő átlagos tumor-mérete 4,5 g. Egy másik vizsgálatban, amelyet azonos módon hajtunk végre, a tumor sokkal lassabban nő. A beültetés után 34 nappal a kontroll egerek tumorja 3,7 g átlagos méretű. Az összes olyan egér, amely nem konjugált gyógyszert kapott, elpusztul. Azoknak az egereknek, amelyek a 6. és 7. példák konjugátumait kapták, átlagosan csak 0,1 g tömegű tumorjuk van, ám a 6. példa konjugátumát kapott egerek közül négy elpusztul, viszont a 7. példa konjugátumát kapott egerek közül egyik sem pusztul el. Hasonló vizsgálatban a konjugátumokat olyan arányban adjuk be, hogy csak 2 mg/kg vinka gyógyszert adunk. Itt a kontroll egerek tumorjainak átlagos mérete 23,5 g, akárcsak az első vizsgálatban. A szabad vinka gyógyszert vagy a 7. példa konjugátumát kapott egerek egyike sem pusztul el a 42. napi mérési pontig; a 6. példa konjugátumát kapott egerek közül is csak egy pusztul el. A szabad vinka gyógyszert kapott állatok tumorjainak átlagos mérete 8 g a 42. napon, a 6. és 7. példa konjugátumait kapott állatok tumorjainak átlagos mérete egyaránt 5 g. Úgy találjuk, hogy a jelen találmány konjugátumai teljesen biztonságosak, és egyáltalán nem várt módon, azok a konjugátumok, amelyeknek a konjugációs aránya magas, még biztonságosabbak, mint azok, amelyeknek vinka gyógyszer tartalmuk kisebb. Következésképpen ezek a konjugátumok nyújtják a legelőnyösebb utat a neoplazma-ellenes vinka gyógyszerek viszonylag nagy adagjának bevezetéséhez, meglepően nagy biztonsággal a beteg szempontjából. A jelen találmány szerinti új konjugátumok használhatók a rák kezelésében és mint ilyeneket, előnyösen injekcióhoz alkalmas kiszerelések formájában állítjuk elő. így a jelen találmány magában foglal egy gyógyászati kiszerelést is, pl. egy olyan injektálható készítmény előállítását, amely a jelen találmány szerinti konjugátumot egy gyógyászatiig elfogadható hordozóval, vagy hígítóval együtt tartalmazza, az ilyen segédanyagok a szakterületen jól ismertek. A kiszerelés egységnyi adagok formájában előnyös, ahol egy-egy adag pl. 0,01-10 mg aktív alkotórészt tartalmaz (az aktív alkotórészen a vinka gyógyszer részt értve). Az új konjugátumok széles adagolási tartományon belül, és heti összdózison belül hatékonyak, így pl. rákban szenvedő felnőtt ember kezeléséhez ez a tartomány 0,01-10 mg/kg tartományban van (a vinka gyógyszer részre számítva), általában inkább a 0,03-9 mg/kg tartományban. Meg lehet érteni azonban, hogy a ténylegesen beadott konjugátum mennyiségét csak az orvos határozhatja meg az adott körülmények figyelembevételével, ide értve a kezelendő beteg állapotát és a beadás kiválasztott útját. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás (I) általános képletű konjugátum előállítására, ahol R2 jelentése metilcsoport, R5 jelentése hidrogénatom, R4 jelentése etilcsoport, R3 jelentése hidroxilcsopoit, R jelentése -NHN= csoport, R1 jelentése hidrogénatom, m egész szám 5-től 35-ig, Ab valamely IgG osztályba tartozó ismert antitest, amely 6-18 % közti mennyiségben tartalmaz szénhidrátot, azzal jellemezve, hogy egy IgG osztályba tartozó, peijodáttal vagy enzimatikusan oxidált antitestet, amely 6-18 % szénhidrátot tartalmaz, egy (II) általános képletű vinka hidraziddal reagáltatunk, ahol R7 jelentése hidrazinocsoport, R8 jelentése hidrogénatom, és R2, R3, R4 és R5 a fenti. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakciót hűtött vizes, pufferolt oldatban végezzük 0 'C - 8 °C közti hőmérsékleten. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy IgG antitestként monoklonális antitestet alkalmazunk. 4. Eljárás injektálható gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerinti eljárással előállított (I) általános képletű konjugátumot - a képletben R, R1, R2, R3, R4, R5, m és Ab az 1. igénypontban megadott - egy vagy több, gyógyászatilag elfogadható hordozóval vagy hígítóval összekeverünk, és injektálható gyógyászati készítménnyé alakítunk. 5 10 15 r» 20 25 30 35 40 45 50 5
