199772. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fluorozott diamino-hexin, savaddíciós sói és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 199772 B 2 2. példa Keményzselatin kapszulákat az alábbi alkotóanyagokból állítunk elő: (a) hatóanyag 20 mg (b) talkum 5 mg (c) laktóz 90 mg A készítményt úgy állítjuk elő, hogy a száraz porokat finom lyukméretű szitán átengedjük és alaposan összekeverjük azokat egymással. A port ezután keményzselatin kapszulákba töltjük, amelyek töltősúlya 115 mg kapszulánként. 3. példa Tablettákat a következő alkotóanyagokból készítünk: (a) hatóanyag 20 mg (b) keményítő 43 mg (c) laktóz 45 mg (d) magnézium-sztearát 2 mg A laktózt összekeverjük a hatóanyaggal (a) és a keményítő egy részével és granuláljuk keményítő pasztával, majd szárítjuk, szitáljuk és magnéziumsztearáttal keverjük. A keverékből lettákat sajtolunk. 110 mg- os tab-4. példa Befecskendezhető szuszpenziót intramuszkuláris beadásra készítünk és ezt követően 1 ml-es ampul-Iákba töltünk. A szuszpenzióhoz a tóanyagokat alkalmazzuk: következő alkotömeg (a) hatóanyag 1,0 (b) polivinil-pirrolidon 0,5 (c) lecitin 0,25 (d) szükséges víz az injekcióhoz 100.0 Az anyagokat összekeverjük, homogenizáljuk és 1 ml-es ampullákba töltjük. Az ampullákat lezárjuk és autoklávban tartjuk 20 percig 121 °C-on. Mindegyik ampulla 10 mg új vegyületet (a) tartalmaz ml-ként. 5. példa mg/kúp hatóanyag 50 teobroma-olaj 950 A gyógyszert porítjuk és átengedjük egy B.S. No. 100 méretű szitán és olvadt teobroma-olajjal trituráljuk 45 °C-on és így sima szuszpenziót készítünk. Az elegyet alaposan összekeverjük és 1G befogadóképességű formákba öntjük és úgy kúpokat állítunk elő. 6. példa Az (I) általános képletű vegyületek ODC gátlóhatását in vivo a következő módon határoztuk meg: Sprague-Dawley törzsbeli, 200-220 g súlyú hím patkányoknak a kívánságnak megfelelően adtunk táplálékot és vizet 12 óra hosszat világosban és 12 óra sötétben egyfolytában. Az állatoknak intraperitoneálisan gyógyszert fecskendeztünk be (0,9 %-os sóoldatban oldva) vagy gyomorszondán keresztül adtunk be (vízben oldva). Kontrollként olyan állatok szolgáltak, amelyek sóoldatot vagy vizet kaptak. A gyógyszer beadása után 5-6 órával az állatokat leöltük, a hasi dülmirigyet és a csecsemőmirigyet gyorsan kivettük és mindjárt vizsgáltuk. A szövetket homogenizáltuk három térfogatnyi 30 mmólos, 7,1 pH-jú nátrium- foszfát puffer-oldattal, amely 0,1 mmól EDTA-t, 0,25 mól szukrózt, 0,1 mmól piridoxál-foszfátot és 5 mmól ditiotreitolt tartalmazott. Az omitin-dekarboxiláz-aktivitását 1000 g dülmirigy-homogenizátum és az egész csecsemőmirigy-homogenizátum felhasználásával határoztuk meg Ono et al. [Biochem. Biophys. Acta, 284, 285 (1972)] által leírt módon. 7. példa Az (I) képletű vegyületek omitin-dekarboxiláz (ODC) gátlóhatását in vitro a következő módon határoztuk meg: Omitin-dekarboxilázt (ODC) olyan patkányok májából készítettünk, amelyekbe 150 mg/kg testsúly tioacetátot fecskendeztünk be 18 órával a boncolás előtt és körülbelül tízszer kezeltünk savval 4,6-os pH-n Ono et al. [Biochem. Biophys. Acta 284, 285 (1972)] által leírt módon. Az ODC törzsoldat 16 mg/ml proteint, 30 mmól 7,1 pH-jú nátrium-foszfát puffert, 5 mmól ditiotreitolt és 0,1 mmól piridoxál-foszfátot tartalmazott. Ennek a törzsoldatnak a fajlagos aktivitása 0,12 nmól C02/perc/mg protein volt. Kísérleti célra 320 ml ilyen törzsoldatot induláskor (0 időpont) 80 ml vizes inhibitor-oldattal kevertünk és 37 °C-on inkubáltunk. Különböző időpontokban 50-50 ml aliquot mennyiségeket valamely 1- ml olyan kísérleti közegbe vittünk be, amely 30 mmól 7,1 pH-jú nátrium-foszfátot, 5 mmól ditiotreitolt, 0,1 mmól piridoxál- foszfátot, 0,081 mól L-ornitint és 0,043 mól (58 Ci/mól, Amersham) DL-[1- C] omitint tartalmazott egy zárt reakcióedényben, amely 50 ml 1 mólos hiamin-hidroxiddal nedvesített szűrőpapírral volt kibélelve. A reakció 60 perc alatt lejátszódott 37 °C-on, amelyet 0,5 ml 40 %-os triklór-ecetsav hozzáadásával tettünk teljessé. A hozzáadás után 30 perccel a szűrőpapír által elnyelt C02-t szabványos szcintillációs folyadékban mértük. A Ki látszólagos disszociációs állandót és a T50 felezési időt végtelen inhibitor-koncentrációnál Kitz és Wilson [J. Biol. Chem. 237, 3245 (1962)] által leírt módszerrel számítottuk. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás (I) képletű C=ch H2N-CH2-CF2-CH2-CH-NH2 (i) fluorozott diamino-hexin és savaddíciós sói előállítására, azzal jellemezve, hogy (III) képletű C=CH H2N-CH2-CF2-CH2-CH-ftálimido (III) ftálimido-vegyület valamely amino-védett-származékáról a védőcsoportokat eltávolítjuk és kívánt esetben a kapott vegyületet savaddíciós sóvá alakítjuk. 2. Eljárás dekarboxiláz enzim gátlására alkalmas gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerinti eljárással előállított (I) képletű vegyületet megfelelő vivőanyaggal és adott esetben adalékanyaggal összekeverve gyógyszerkészítménnyé alakítjuk. Kiadja az Országos Találmányi Hivatal, Budapest A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető SZÜV LASER GYŐR Felelős vezető: Dr. Monoki Árpád igazgató 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
