199562. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás glükóz izomerizálására

HU 199562 B

31 32

(folytatás)

Példaszám

1

2

3

4

5

6

Össztérfogat (ml)

35,3

kb.35

60,9

51,2

31,4

25,1

Enzimet nem-tartalmazó töltet térfogata (ml)

22,3

kb.23

32,5

42,3

24,4

19,5

Átfolyási sebesség (ml/perc)

1,96

2,0

3,38

1,5

8,0

8,0

Oszlop (reakció)hőmérséklete(°C)

105,2

101,6

110,4

103,3

112,6

105,8

keakcióelegy pH-ja

6,75

6,75

6,47

6,75

6,55

6,50

Igénypont szerinti egyenletből kiszámítható maximális bomlási idő (perc)

24,5

31,5

32,8

28,0

23,5

41,8

A példák szerinti eljárásnál mért

11,4

11,5

9,6

28,2

3,0

2,4

bomlási idő (perc)

Az enzimet nem tartalmazó töltet térfogatát az izomeráz tömegéből és a töltet dimenzióiból számoltuk ki. A „maximális bomlási idő“-t az oszlop pH és hőmérséklet értékeinek a fenti egyenletbe való behelyettesítésével, a „mért bomlási idő“-t pedig az átfolyási sebesség- és az enzimet nem tartalmazó töltet térfogat-értékéből számoltuk, ki. A táblázat adatai mutatják, hogy a mért bomlási idő az 1—3., 5. és 6. példánál kisebb, a

4. példánál (mely eljárás során szintén megfelelő, azaz kismennyiségü szennyeződést tartalmazó szirupot állítottunk elő) azonos volt a maximális (számított) bomlási idővel. Következésképpen, a találmány szerinti eljárás során a számítottnál kisebb, bizonyos reakciókörülmények között azonos bomlási idő alkalmazásával megfelelő termék állítható elő.

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás glükóznak az összeá szénhidráttartalomra számítva 53—60 t% fruktóztartalomig történő izomerizálására oly módon, hogy egy glükóztartalmú, előnyösen 30— 50 t% szubsztrátot 90—125°C hőmérsékleten, 5,5—7,5 pH értéken olyan glükóz-izomerá^zal hozunk érintkezésbe, mely kémiailag stabilizált, egy vagy több kémiai kezeléssel jelentős mértékben megnövelt termostabilitással rendelkezik, azzal jellemezve, hogy a bomlási időt — mely a. glükóz-izomeráz enzim és a szubsztrát érintkezési idejét, valamint mindazt a kezelési időt foglalja magába, melyet a szubsztrát a reakció hőmérsékletén tölt el — úgy választjuk meg, hogy az egyenlő vagy kisebb legyen a

t„ = antilog (4300/ (T+273) -pH-3,23] ( 1 )

összefüggésből számított értéknél, ahol T reakcióhőmérsékletet °C-ban; pH a szubsztrát kémhatását; U a bomlási időt (percben) jelenti.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal 25 jellemezve, hogy a Streptomyces fajhoz tartozó mikroorganizmus által termelt glükóz-izomerázt alkalmazunk.

3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a Streptomyces sp. ATCC

30 21175 mikroorganizmus, vagy annak mutánsai, variánsai, illetve genetikai módosulatai által termelt glükóz-izomerázt alkalmazunk.

4. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a glükóz-35 tartalmú tápoldatot a kémiailag stabilizált glükóz-izomeráz enzimmel 100—110°C közötti hőmérsékleten hozzuk érintkezésbe.

5. Az 1—4. igénypontok bármelyike sze- 40 rinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az izomerizáláshoz alkalmazott közeg pH-ját 6—6,5 közötti értéken tartjuk!

6. Az 1—5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az érintkezési idő 2—30 perc közötti érték.

45

7. Az 1. igénypont szerinti eljárás glükóznak az összes szénhidráttartalomra számítva 53—57 t% fruktóztartalomig történő izo-5Q merizálására, melynél 40—50 t% glükózt tartalmazó szubsztrátot 60—70°C hőmérsékleten, 6—6 pH-értéken hozunk érintkezésbe a glükóz-izomeráz enzimmel; az izomerizáláshoz alkalmazott közeg hőmérsékletét 90°C-ról 120°C-ra emeljük; a közeg pH-ját 6—7 közötö ti értékre állítjuk be, majd a fruktóztartalmú oldatot kémiailag stabilizált glükóz-izómerázzal hozzuk érintkezésbe, azzal jellemezve, hogy a bomlási időt úgy választjuk meg, hogy az egyenlő vagy kisebb legyen 60 U = antilog (4300/ (T+273) -pH-3,23] ( 1 )

összefüggésből számított értéknél, ahol T, pH és id jelentése az 1. igénypontban megadott.

Rajz nélkül

17