199559. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A 10255 antibiotikum komplex és faktorai, valamint ezeket tartalmazó készítmények előállítására
noi 99UU? U A találmány további tárgya eljárás szarvasmarhák növekedésének gyorsítására és tápanyaghasznosításuk növelésére azáltal, hogy az állatoknak hatásos mennyiségű A10255 komplexet vagy valamelyik A10255 faktort adiuk be. Előnyös eljárás, ha az állatoknak AÍ0255 komplex hatásos mennyiségét adjuk be. Az eljárás szerint a szarvasmarhák növekedésének meggyorsítására az állatoknak hatásos mennyiségű A10255 komplexet vagy A10255 faktort adunk be szájon keresztül. A „hatásos mennyiség" 0,05—5,0 mg/kg, előnyösen 0,1—3,0 mg/kg napi dózist jelent. Az antibiotikum komplexet vagy faktort az állat eleségével adhatjuk be szájon keresztül, de a beadás más módon is történhet, például folyadék, bólusz vagy kapszula formájában. A bejuttatás előnyös módja, amikor az A10255 ve gyű letet egyszerűen belekeverjük az állatok eleségébe. A dózisok különféle ‘megformálását az állat-gyógyszertechnológia ismert módszereivel végezhetjük. A találmány további tárgya tápkészítmény szarvasmarhák tápanyaghasznosításának fokozására. A tápkészítmény szarvasmarha eleségből és az A10255 komplex vagy valamelyik A10255 faktor hatásos mennyiségéből áll. Előnyös az a tápkészítmény, mely a táplálék mellett az A10255 faktor hatásos mennyiségét tartalmazza. Szarvasmarhák számára a legelőnyösebb tápkészítmény a táplálék mellett hatékony mennyiségű A10255B faktor vagy A10255G faktort tartalmaz. Az egyes A10255B, C, E, F, G és H faktorok nagyjából bioekvivalensek egymással. A fenti szarvasmarha tápkészítményben a „hatásos mennyiség" azonos a szarvasmarhák tápanyaghasznosítását javító tápkészítmények előzőekben meghatározott menynyiségével. A tápkészítményben bármilyen, a szarvasmarhák etetésére szolgáló eleséget alkalmazhatunk. A találmány további hasznosítási területe, hogy az A10255 komplexet és faktorait, különösen az A10255 faktort felhasználhatjuk tiosztrepton rezisztenciagént tartalmazó Streptomyces törzsek azonosítására. Ezek a fajok vagy természetes állapotuknál fogva tartalmazzák a tiosztrepton rezisztenciaként, vagy a tiosztrepton rezisztenciagént tartalmazó plazmiddal vagy más vektorral történő transzformálásuk révén jutnak hozzá. Ezek szerint a . tiosztrepton antibiotikum A10255B faktorral és az A10255 komplexszel helyettesíthető, amikor a tiosztrepton rezisztenciagéneket akarjuk kimutatni Streptomyces törzsekkel végzett DNS rekombinációs kísérletekben. Különösen S.fraide, S.lividans vagy S.griseofuscus protoplasztokat transzformálunk tiosztrepton rezisztenciagént hordozó plazmiddal (pl. pIJ702 vagy pHJL401 plazmiddal) [C.J. Thomson és munkatársai, Nature 286: 525—527 (1980)]. A protoplasztokat 47 a sejtfalregeneráláshoz alkalmas szilárd táptalajra visszük, és egy éjszakán át (kb. 16 órán át) inkubáljuk 29°C hőmérsékleten. Az A10255 antibiotikumot tartalmazó lágy agart rétegezőnk a regenerálódó protoplasztokat hordozó lemez felszínére. A rárétegezett agarnak annyi A10255 antibiotikumot kell tartalmaznia, hogy a regeneráló táptalajra való rárétegezés után kb. 50 pg 'antibiotikumot tartalmazzon milliliterenkéht. Ezután a lemezeket 7—14 napon át 29°C hőmérsékleten inkubáljuk, hogy a tiosztrepton rezisztenciagénnel rendelkező plazmidokat tartalmazó sejtek telepei kinőjenek. A plazmidot nem tartalmazó sejtek ezek között a körülmények között nem nőnek. Az A10255 rezisztens transzformánsokat ezt követően milliliterenként 50 pg A10255 antibiotikumot tartalmazó táptalajra visszük át, mely biztosítja a tiosztrepton rezisztenciagéneket hordozó plazmidok fennmaradását. A találmány szerinti antimikrobiális vegyületek (azaz az A10255 komplex és az egyes faktorai) alkalmasak melegvérű állatok kórokozó baktériumokkal történt fertőzéseinek terápiás kezelésére vagy a fertőzések megelőzésére. Az antimikrobiális vegyületeket beadhatjuk szájon át, parenterálisan — például intravénásán, intramuszkulárisan vagy szubkután — vagy alkalmazhatjuk helyileg kenőcsként vagy oldatként. A találmány további tárgya az A10255 komplexet vagy egyes faktorait tartalmazó gyógyszerkészítmény. Ezek a készítmények a szóbanforgó antibiotikumok — azaz az A10255 komplex vagy az egyes faktorai: B faktor, C faktor, E faktor, F faktor, G faktor vagy H faktor — gyógyászatilag hatásos mennyiségéből és alkalmas hordozóanyagból állnak. Amennyiben a készítményt szájon át kívánjuk beadni, például tablettaként vagy kapszulában, az „alkalmas hordozóanyag" a szokásos adalékanyagokat jelenti, nevezetesen kötőanyagokat, például szirupot, arabmézgát, zselatint, szorbitolt, tragantmézgát, polivinilpirrolidint (Povidone), metil-cellulózt, etil-cellulózt, nátrium-karboxi-metil-cellulózt, hidroxi-propil-metil-cellulózt, szacharózt és keményítőt; töltelékanyagokat és vivőanyagokat, például kukoricakeményítőt, zselatint, laktózt, szacharózt, mikrokristályos cellulózt, kaolint, mannitolt, dikálcium-foszfátot, nátrium-kloridot és alginsavat; dezintegrátorokat, például kroszkarmellóz-nátriumot, mikrokristályos cellulózt, kukoricakeményítőt, nátrium-keményítő-glükonátot, alginsavat, nedvesítőszereket, mint amilyen a nátrium-lauril-szulfát; és sikosítóanyagokat, példuál magnézium-sztearátot és más fémsztearátokat, sztearinsavat, szilikon folyadékot, talkumot, viaszokat, olajokat és kolloidális szilícium-dioxidokat. Ugyancsak használhatunk aromásítóanyagokat, például borsosmentát, hangyaolajat, cseresznyearomát, stb. Adhatunk a készítményhez színe-48 25 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
