199509. lajstromszámú szabadalom • Eljárás teikoplanin-származékok és hatóanyagként ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 199509 B oszlopkromatográfiával tisztítunk egy 750 g szilanizált szilikagélt tartalmazó oszlopon, az előbbiekben az I közti termékkel kapcsolatban leírt körülmények között. Az eluálást azonban 5—35% acetonitril-víz lineáris grádiensével végezzük, 24 óra alatt, 250 ml/óra sebességgel. A cím szerinti tiszta vegyületet tartalmazó frakciókat ősszeöntjük és az 1. előállítási példában leírt módon feldolgozzuk. Az acetonitrilt és a vizet egyaránt eltávolítjuk, majd a kapott butanolos oldathoz 1 ml In HCl-t adunk és az elegyet kb. 40 ml végtérfogatra betöményítjük. Éter hozzáadására szilárd anyag válik ki, amelyet szűréssel összegyűjtünk, éterrel mosunk és vákuumban egy éjjelen át szárítunk, 35°C-on. A cím szerinti vegyület hidrokloridját kapjuk, kitermelés 0,6 g. b) Az I közti termékből i) 0,5 g — 3 mmól — I közti terméket (amelyet az 1. előállításipélda szerinti eljárással állítottunk elő) 60 ml 90%-os vizes trifluorecetsavban (TFA) oldunk és az oldatot 10 percen át 5°C-on, majd 90 percen át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután 240 ml etilétert adagolunk és a kivált csapadékot összegyűjtjük, majd 200 ml metanolban újra feloldjuk. Az oldhatatlan maradékot szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet csökkentett nyomáson kis térfogatra töményitjük be. Éter hozzáadására szilárd anyag válik ki, amelyet összegyűjtünk, éterrel mosunk és vákuumban egy éjjelen át 35°C-on szárítunk. A cím szerinti vegyület tiszta trifluoracetátját kapjuk, kitermelés 3,96 g. ii) 6 g (3 mmól) nyers I közti termék-káliumsót (titere HPLC alapján 85%, a csúcsok területének %-os aránya alapján; a szennyezések nem definiált melléktermékeknek tulajdoníthatók) 100 ml 90%-os vizes TFA-ban oldunk és az oldatot 15 percen át 0°C-on, majd 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószereket szobahőmérsékleten, csökkentett nyomáson teljesen eltávolítjuk. Az olajos maradékot 150 ml 1:1 (térf./térf.) H20: :CH3CN elegyben oldjuk és a kapott oldatot 300 ml vízzel hígítjuk, majd felvisszük egy oszlop tetejére, amely 750 g szilanizált szilikagélt tartalmaz 90:10 0,5%-os vizes ammóniumformiát:CH3CN elegyben. Az oszlopot először 500 ml 85:15 (térf./térf.) víz:CH3CN eleggyel mossuk, majd 15—30% acetonitril-0,001 N HC1 lineáris grádiensével fejlesztjük ki, 24 óra alatt, 250 ml/óra sebességgel, 25 ml-es frakciókat szedve. A tiszta, cím szerinti vegyületet tartalmazó frakciókat öszszeőntjük. A jelenlevő kismennyiségű kristályos terméket összegyűjtjük, 1:2 (térf./térf.) acetonitriketiléter eleggyel mossuk és egy éjjelen át szobahőmérsékleten vákuumban (P205 fölött) szárítjuk. Belső só alakjában 0,85 g tiszta, cím szerinti terméket kapunk. Az anyalúgokat butanollal hígítjuk, majd betöményítjük; így kb. 200 ml térfogatú száraz butanolos szuszpenziót kapunk. 3 ml ln HCl 33 18 hozzáadására tiszta oldat képződik, amelyet csökkentett nyomáson kis térfogatra töményítünk be. Etiléter hozzáadására szilárd anyag válik ki, amelyet szűréssel összegyűjtünk, éterrel mosunk és egy éjjelen át vákuumban szobahőmérsékleten szárítunk (KOH pelletek fölött). A cím szerinti vegyület tiszta hidrokloridját kapjuk, kitermelés 2,3 g. 3. előállítási eljárás A 35,53-didehidro-34-dezoxi*teikoplanin ágiikon (111 közti termék) előállítása a) Az I közti termékből 0. 6 g I közti terméket (1. az 1. előállítási példát) 50 ml dimetoxi-etánban (DME) oldunk és a szuszpenzióba keverés közben száraz HCl-t buborékoltatunk, kis sebességgel, mimellett a belső hőmérsékletet 15—20°C-on tartjuk. Néhány óra alatt tiszta oldat képződik, amelyet ezután csökkentett nyomáson szárazra párolunk. A maradékot 100 ml 75:25 (térf./térf.) víz:CH3CN elegyben oldunk és a kapott oldatot felvisszük egy oszlop tetejére, amelyet 100 g vizes szilanizált szilikagéllel töltöttünk meg. Az oszlopot 25—60% CH3CN: :0,001 N HCl lineáris grádiensével fejlesztjük ki, 20 óra alatt, 150 ml/óra sebességgel, 15 ml-es frakciók felfogásával. A tiszta III közti terméket tartalmazó frakciókat összeöntjük és butanol hozzáadása után betöményítjük; így végeredményben kb. 100 ml térfogatú száraz butanolos oldatot kapunk. 300 ml száraz sósavas etiléter hozzáadására szilárd anyag válik ki, amelyet összegyűjtünk, éterrel mosunk és vákuumban szobahőmérsékleten 48 órán át szárítunk (KOH pelletek fölött). Hidroklorid alakban 0,35 g cím szerinti terméket kapunk. b) A II közti termékből 3 g II közti terméket (1. a 2. előállítási példát) 100 ml dimetoxi-etánban (DME) szuszpendálunk és a szuszpenzióhoz keverés közben, csepegtetve és 0°C-ra való hűtés mellet 25 ml 96—98%-os kénsavat adunk. A keletkezett oldatot szobahőmérsékleten 5 órán át keverjük, majd 250 ml étert adunk hozzá és a kivált szilárd anyagot összegyűjtjük, éterrel mossuk és vákuumban egy éjjelen át szobahőmérsékleten szárítjuk. Szulfát alakban 2,5 g cím szerinti vegyületet kapunk. 1. példa Az 1 (a-e) vegyület előállítása (A1 eljárás) 10 g (kb. 5 mmól) teikoplanin A2-t 1,5 liter 2:1 (térf./térf.) DMF:metanol elegyben oldunk és az olathoz keverés közben 5—K°C-on hozzáadunk 100 g nátrium-bórhidridet (kb. 0,4 g súlyú pelletek, Aldrich). 6 órán át 10—15°C-on és 120 órán át 20—25°C-on való keverés után a reakcióelegyet 5—10°C-ra való hűtés közben beleöntjük 160 ml jégecet 3 liter metanollal képezett oldatába. A kapott oldatot 45°C-on csökkentett nyomáson kb. 150 ml-es térfogatra töményitjük be és a csapadékot 34 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
