199486. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vegyesen szubsztituált foszfatidil-kolinok és foszfatidil- -etanol-aminok előállítására
HU 199486 B bahőmérsékleten 45 percen keresztül keverünk, nedvesség kizárása mellett. Ezután az oleoil-imidazolid oldatához hozzáadunk 480 ml 1 -O-trifenil-metiI-sn-glicero-3-foszfo- (N-trifenil-metil)-etanol-amint (amit a 2. példa szerint állítottuk elő), majd hozzáadunk 41 mg fémes nátrium 3,1 ml dimetil-szulfoxiddal készített oldatát. A reakcióelegyet 20 percig szobahőmérsékleten reagáltatjuk, majd 17,8 ml 0,ln vizes ecetsavoldattal semlegesítjük. Ezután jeges vízzel felvesszük, dietil-éterrel háromszor extraháljuk, az egyesített szerves fázisokat vízzel kétszer mossuk, nátrium-szulfát felett szárítjuk, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A nyerstermék kovasavgélen petroléter-kloroform-grádienssel kromatográfiásan végzett tisztítása után 633 mg tiszta célvegyületet kapunk. A termék kovasavgélen vékonyréteg-kromatográfiásan vizsgálva (futtatószer : kloroform-metanol, 9:1 v/v] egységes foltot mutat, R/-érték 0,6. 'H-NMR-spektrum: delta ppm (CDC13) 0,88 (CH3), 1,26 (CHj), 1,8—2,3 (CH2-CH2- -C=C, -CH2-CH2-C=0), 3,1—4,3 (glicerol és etanol-amin C—H), 5,1 (glicerol C2-C-H, oleoil HC=CH), 7,25 (trifenil-metil C-H). B) 2-01eoil-sn-glicero-3-foszfo-( N-trifenil-metil)-etanol-amin 406 mg l-O-trifenil-metil-2-oleoil-sn-glicero-3-foszfo-(N-trifenil-metil)-etanol-amint 30 ml metilén-kloridból és 1 ml 20%-os metanolos bór-trifluoridból álló elegyben oldunk, majd az oldatot 30 percen át 0°C-on keverjük. Ezután 30 ml metilén-kloriddal elegyítjük, vízzel háromszor mossuk és a szerves fázist nátrium-szulfát felett szárítjuk. C) l-Palmitoil-2-oleoil-sn-gJicero-3-foszfo-( N--trifenil-metil )-etanol-amin A képződött 2-oleoil-sn-glicero-3-foszfo- ( N-trifenil-metil) -etanol-amin oldatához 1,3 g palmitinsavanhidridet és 230 mg dimetil-amino-piridint adunk. A reakcióelegyet 6 órán keresztül 20°C-on keverjük. Ezt követően az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradéknak kovasavgélen petroléter-kloroform-grádienssel végzett kromatografálása után a tiszta acilezett termék 361 mg mennyiségét kapjuk. A vegyület kovasavgélen vékonyréteg-kromatográfiásan vizsgálva (futtatószer: kloroform-metanol 9:1, v/v], egységes foltot mutat, Ráérték 0,6. 'H-NMR-spektrum: delta ppm (CDC13) 0,88 (CH3), 1,22 (CH2), 1,55 (CH2-C-CO), 1,8—2,3 (CH2-CH2C=, CH2-C=0), 3,1—4,3 (glicerol és etanol-amin C-H), 5,1 glicerol= =C-H, oleoil CH=CH), 7,25 trifenil-metil C-H). D) l-Palmitoil-2-oleofl-sn-glicero-3-foszfo-etanol-amin 190 mg l-palmitoil-2-oleoil-sn-glicero-(N-trifenil-metil)-etanol-amin Ç ml metilén-klorid és 6 ml trifluor-ecetsav elegyével készített oldatát nedvesség kizárása mellett 5 percen át 0°C-on állni hagyjuk. Ezután 23 ml 6%-os vizes ammónium-hidroxid-oldat hir-11 télén hozzáadásával semlegesítjük. A vizes fázist elkülönítjük és kloroform-metanol 2:1 (v/v] arányú eíegyével extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízzel mossuk. Az oldószernek vákuumban végzett eltávolítása után a nyersterméket kovasavgélen kloroform-metanol-grádienssel kromatográfiásan tisztítjuk. A vegyület vékonyréteg-kromatográfiásan vizsgálva kovasavgélen [futtatószer: kloroform-metanol-25%-os vizes ammóniaoldat, 50:25:6, v/v/v] egységes foltot mutat, Ráérték 0,5. 12. példa A) 1 -O-Trif enil-metil-2-linoleoil-sn-gHcero-3--foszfo-(N-trifenil-metil)-etanol-amin 464 mg linolsavat 15 ml tetrahidrofuránban 20°C-on 45 percig reagáltatunk 365 mg karbonil-diimidazollal. A képződött acil-imidazolid oldatát 530 mg 1-O-trifenil-metil-sn-gIicero-3-foszfo-(N-trifenil-metil)-etanol-aminhoz adjuk. Az oldószernek vákuumban végzett eltávolítása után a maradékot 15 ml dimetil-szulfoxidban oldjuk és beindítjuk a reakciót 49 mg fémes nátriumnak 3,7 ml dimetil-szulfoxidban való oldásával előállított, katalitikusán ható sevmegkötőszer hozzáadásával. A reakcióelegyet 20 percen át 20°C-on tartjuk, eközben időnként összerázzuk, majd 10,4 ml vizes 0,ln ecetsav oldat egyszerre való hozzáadásával semlegesítjük. Ezt követően kétszer egyenként 20 ml menynyiségű kloroform-metanol 2:1 [v/v] arányú eleggyel extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat egymás után egyenként 8 ml menynyiségű kloroform-metanol-vizes ammóniaoldat [3:48:47, v/v/v] eleggyel és kloroform-metanol-víz [3:48:47, v/v/v] eleggyel mossuk. Az oldószer vákuumban végzett eltávolítása és benzol jelenlétében való elpárologtatósa után nyersterméket kapunk, amely kovasavgélen kloroform-metanol-grádienssel végzett közepes nyomású kromatográfiás tisztítás után 670 mg (kitermelés 92%) tiszta vegyületet eredményez. A tiszta vegyület kovasavgélen vékonyréteg-kromatográfiásan vizsgálva [futtatószer: metanol-kloroform 8: :3, v/v] egységes foltot mutat, R/-érték 0,61. B) 2-Linoleoil-sn-glicero-3-foszfo-( N-trifenil-metil ) -etanol-amin 435 mg l-O-trifenil-metil-sn-glicero-3-foszfo- (N-trifenil-metil) -etanol-aminból all. példa B) lépésében megadott munkamódszer szerint lehasítjuk az 1-O-trifenil-metil-csoportot, 0,5 ml 20%-os metanolos bór-trifluorid-oldat alkalmazásával. C) l-01eoil-2-linoleoil-sn-glicero-3-foszfo-( N-trifeni l-meti 1 ) -etanol -amin D) 1 -Oleoi 1-2-1 inoleoil-sn-gl icero-3-foszf o-etanol-amin 2-linoleoil-sn-glicero-3-foszfo-(N-trifenil-metil)-etanol-amint a 11. példa C) lépésében megadott munkaelőírásokkal analóg módon olajsavanhidriddel reagáltatva 1-oleoil-2-lino!eoil-sn-glicero-3-foszfo-(N-trifenil-meda D) lépésében megadott munkamódszer12 7 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
