199486. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vegyesen szubsztituált foszfatidil-kolinok és foszfatidil- -etanol-aminok előállítására
HU 199486 B 6 mányunk szerinti előállítása ettől teljesen független. Az (I) általános képletű vegyületek előállítására használt (II) általános képletű 1- -O-triíenil-metU-sn-glicero-3-foszíokolint és 1- -0-trifenil-metil-sn-glicero-3-foszfo-(N-trifenil-metil)-etanol-amint az (V) ált. képletű sn-glicero-foszfokolin, illetve sn-glicero-3- -foszfo- (N-trifenil-metil ) -etanol-amin megfelelő, reakcióképes (VI) ált. képletű trifenil-metil-származékkal végzett tritilezésével nyerhető. Az Rj, R2’, R3 és T jelentése a már megadott, míg X jelentése halogénatom. A kiindulási anyagok előállítására természetes sn-glicero-3-foszfokolin vagy sn-glicero-3-foszfo-etanol-amin használható. E mindkét termék növényi, állati vagy mikrobális eredetű foszfolipidekből elszappanosítás és izolálás útján, gyakorlatilag korlátlan menynyiségben állítható elő. Az alábbi példák a találmány közelebbi megvilágítására szolgálnak, anélkül, hogy azt korlátoznák. 1. példa A) 1 -0-Trifenil-metil-2-oleiI-sn-gIicero-3-foszfokolin 1,26 g olajsavat 794 g karbonil-diimidazollal reagáltatunk 25 ml tetrahidrofuránban, 45 percen át, szobahőmérsékleten, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk. Ezt követően a maradékot — amely a képződött zsírsavimidazolidot tartalmazza — 1,1 g 1-0- -trifenil-metil-sn-glicero-3-foszfokolin nyerstermék 28 ml dimetil-szulfoxidda^ készített oldatával elegyítjük. 148 mg fémes nátriumnak 11,5 ml dimetil-szulfoxidban való oldásával előállított katalizátor hozzáadása után a reakcióelegyet — időnként rázogatás közben — 20 percig 20°C-on állni hagyjuk. Végül egyszerre £4 ml, 0,1 n vizes ecetsavoldatot adunk hozzá. Ezt követően kloroform-metanol 2:1 térfogatarányú elegyével kétszer extraháljuk és az egyesített szerves fázisokat kétszer mossuk metanol-víz 1:1 [v/v] arányú elegyével. Az oldószernek vákuumban végzett elpárologtatása után a nyersterméket kloroformban oldjuk és kovasavgél-oszlopra visszük. A tiszta vegyületet (1,1 g) kloroform-metanol-grádienssel eluáljuk; a termék vékonyréteg-kromatográfiásan kovasavgélen (futtatószer: kloroform-metanol-25%-os ammónia [65:35:5, v/v] egységes foltot mutat, Rf-érték 0,4. B) 2-Oleil-sn-glicero-3-foszfokolin 500 mg l-O-trifenil-metil-2-oleil-sn-glicero-3-foszfokolän 30 ml metilén-kloriddal készített oldatát 0,5 ml mennyiségű, 20%-os metanolos bór-trifluorid-oldattal elegyítjük, majd 30 percen át 0°C-on keverjük. Ezt követően a reakcióelegyhez 15 ml metanolt és 9 ml vizet adunk, kirázzuk és elkülönítjük a szerves fázist. Az oldószert szobahőmérsékleten nagyvákuumban távolítjuk el. C) l-PalmitoiI-2-oIeoil-sn-g!icéro-3-foszfokolin 5 A képződött 2-oleoil-sn-glicero-3-foszfokolint tartalmazó maradékot 30 ml vízmentes kloroformban oldjuk. Ezután az oldathoz 820 mg palmitinsavanhidridet és 200 ml dimetil-amino-piridint adunk és a reakcióelegyet 6 órán át 20°C-on keverjük, majd 15 ml metanolt adunk hozzá és először 0,ln hidrogén-klorid-oldattal, ezt követően pedig vízzel kirázzuk. A szerves oldószernek vákuumban végzett eltávolítása után a terméket kovasavgélen kromatográfiásan tisztítjuk, kloroform-metanol-grádiens alkalmazásával. A 400 mg mennyiségű tisztított anyag kovasavgélen vékonyréteg-kromatográfiásan vizsgálva [futtatószer: kloroform-metanol-25%-os ammónia 65:35:5, v/v/v] egységes foltot mutat, Ráérték 0,4. 2. példa l-Sztearoil-2-oleoi!-sn-glicero-3-foszfoko!in 2-oleoil-sn-glicero-5-foszfokolint (amit 700 mg l-O-trifenil-metil-2-oleoil-sn-glicero-3-foszfokolinból, az 1 . példa A) és B) lépése szerint állítottuk elő az 1. példa C) lépése szerinti előírásnak megfelelően 1,2 g sztearinsavanhidriddel reagáltatunk, kromatográfiásan tisztítunk és analizálunk. 550 mg menynyiségű (kitermelés 76%, az 1-O-trifenil-metil-sn-glicero-3-foszfokolinra vonatkoztatva) l-sztearoil-2-oleoil-sn-glicero-3-foszfokolint kapunk, amely vékonyréteg-kromatográfiásan kovasavgélen vizsgálva [futtatószer: kloroform-metanol-25%-os vizes ammóniaoldat, 65:35:5, v/v] egységes foltot mutat, Ráérték 0,4. 3. példa A) l-0-Trifenil-metil-2-linoleoil-sn-glicero-3--foszfokolin 600 mg 1 -O-trifenil-metil-sn-glicero-3-foszfokolint 690 mg linolsavból és 440 mg karbonil-diimidazolból előállított linoleoil-imidazoliddal az 5. példa A) lépésében megadottak szerint acilezünk. Kovasavgélen végzett középnyomású kromatográfia után a tiszta vegyület (690 mg, kitermelés az elméletinek 75%-a) kovasavgélen végzett vékonyréteg-kromatogramon egy egységes foltot mutat, Rf-érték 0,3 (futtatószer kloroform-metanol-25%-os vizes NH3 oldat 65:35:5 térfogatarányú elegye). B) 2-Linoleoil-sn-glicero-3-foszfokolin 1 g l-O-trifenil-metiI-2-linoleoil-sn-glicero-3-foszfokolin 60 ml metilén-kloriddal készített oldatát az 1-O-trifenil-metil-csoport lehasítására 20%-os, metanolos bór-trifluorid-oldattal kezeljük, az 1. példa B) lépésében megadottaknak megfelelően. C) 1 -Sztearoil-2-llnoíeoil-sn-glicero-3-foszfokolin A B) lépésben kapott 2-linoleoil-sn-glicero-3-foszfokolint az 1. példa C) lépesében megadott munkaelőírások szerint 1,6 g sztearinsavanhidriddel reagáltatunk, és kromatográfiásan tisztítunk, 820 mg mennyiségű (kitermelés 80%, az l-O-trifenil-metil-2-linoleo-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
